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花旗松素、槲皮素对LPS诱导流产小鼠子宫巨噬细胞的影响

作 者: 王丽霞
导 师: 张顺利
学 校: 河南师范大学
专 业: 发育生物学
关键词: 花旗松素 槲皮素 巨噬细胞 非特异性酯酶 CD14 小鼠
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 31次
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内容摘要


目的:通过研究不同浓度水红花子的有效活性单体槲皮素花旗松素对细菌脂多糖(LPS)诱导流产小鼠子宫局部巨噬细胞的变化,初步探讨这两味单体活性成分对母胎界面的局部免疫抑制作用和机理,为新型免疫制剂的筛选提供理论基础和实验依据。方法:昆明种小鼠随即分为对照组(A组)和实验组。实验组又分为细菌脂多糖(LPS)B组、低浓度花旗松素双处理C1组、高浓度花旗松素双处理C2组、低浓度槲皮素双处理(D1)组和高浓度槲皮素双处理(D2)组,对照组和各实验每组各5只小鼠。A、B组于孕2天至孕8天连续灌PBS(0.4ml),在孕6天时A组尾静脉注射PBS(0.2ml),B组尾静脉注射LPS;C1组、C2组、D1组、D2组从孕2天至孕8天分别灌不同浓度的槲皮素和花旗松素,孕6天分别尾静脉注射LPS(0.01μg),所有组别在孕8天时剖开腹腔,观察子宫和胚胎状态,取子宫通过免疫组化和非特异性酯酶染色检测巨噬细胞的分布、数量、灰度值和阳性面积比的变化。结果:LPS处理组与正常组相比,子宫内膜、肌层α-NAE~+巨噬细胞数量极显著增加(P<0.01),非特异性酯酶含量极显著增多(P<0.01),CD14~+巨噬细胞数量显著增加(P<0.01),CD14表达上调,差异极显著(P<0.01),高、低浓度槲皮素和花旗松素组与LPS处理组相比,内膜、肌层α-NAE~+巨噬细胞数量极显著减少(P<0.01),非特异性酯酶含量极显著减少(P<0.01),CD14~+巨噬细胞显著减少(P<0.01),CD14表达下调(P<0.01)。结论:不同浓度的槲皮素和花旗松素可以阻止孕鼠子宫巨噬细胞从系膜区和外膜向子宫内膜迁移,调节子宫中巨噬细胞的数量和分布,从而改变子宫局部免疫状态。(2)槲皮素和花旗松素可能通过阻断LPS-LBP/CD14系统信号通路,从而阻断巨噬细胞的抗原呈递,减弱LPS对巨噬细胞的激活。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-6
缩略语表  6-10
1 文献综述  10-28
  1.1 妊娠与母胎免疫耐受  10-11
  1.2 母胎界面的免疫细胞及细胞因子  11-23
    1.2.1 自然杀伤细胞  11-12
    1.2.2 T 淋巴细胞  12-13
    1.2.3 B 细胞  13
    1.2.4 肥大细胞  13-14
    1.2.5 巨噬细胞  14-21
    1.2.6 细胞因子  21-23
  1.3 流产  23-24
  1.4 脂多糖  24-25
  1.5 中药免疫抑制剂研究进展  25-28
2 材料与方法  28-34
  2.1 实验动物  29
  2.2 药品与试剂  29
  2.3 主要实验仪器  29-30
  2.4 实验方法  30-34
    2.4.1 药物制备及分组给药方法  30
    2.4.2 实验方法  30-34
3 结果  34-44
  3.1 花旗松素槲皮素对流产小鼠胚胎数目的影响  34
  3.2 花旗松素、槲皮素对子宫α-NAE~+巨噬细胞的影响  34-39
  3.3 花旗松素、槲皮素对子宫内CD14~+巨噬细胞的影响  39-43
  3.4 花旗松素、槲皮素对子宫内巨噬细胞分布的影响  43-44
4 讨论  44-52
  4.1 LPS 诱导的妊娠流产效应以巨噬细胞为研究对象的意义  44-46
  4.2 花旗松素、槲皮素对子宫中α-NAE~+巨噬细胞的影响  46-47
  4.3 花旗松素、槲皮素对子宫中CD14~+巨噬细胞的影响  47-49
  4.4 中药水红花子活性成分花旗松素和槲皮素对抗LPS 诱导流产展望  49-52
5 结论  52-53
参考文献  53-59
图版  59-64
致谢  64-65
攻读学位期间发表的学术论文目录  65-66

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