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单侧肾上腺切除对哮喘大鼠嗜铬细胞转变的影响及补肾方的干预作用
作 者: 邹叶强
导 师: 胡成平
学 校: 中南大学
专 业: 呼吸内科
关键词: 单侧肾上腺切除 补肾方 哮喘 肾上腺髓质嗜铬胞 神经元
分类号: R562.25
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
研究目的:本研究旨在通过建立肾阳虚模型来探讨单侧肾上腺切除对哮喘大鼠肾上腺嗜铬细胞转变的影响及补肾方的干预作用,从而进一步揭示嗜铬细胞表型转变与哮喘发病的关系。方法:用卵蛋白致敏、激发方法建立哮喘模型,56只雄性SD大鼠随机分为7组,分别为哮喘组、单侧肾上腺切除哮喘组(手术哮喘组)、补肾哮喘组(补肾组)、单侧肾上腺切除补肾哮喘组(手术补肾组)、地塞米松哮喘组(地米组)、单侧肾上腺切除地塞米松哮喘组(手术地米组)及正E常对照组。采用全身体积描计法检测各组大鼠气道阻力变化情况;光镜观察各组大鼠肾上腺髓质的病理改变,电镜观察各组大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞的超微结构;免疫组化法检测肾上腺髓质中苯乙醇胺-N-甲基转移酶(Phenylethanolamine N-methyl transferase, PNMT)、GDP解离抑制因子(Rho GDP dissociation inhibitorα, Rho GDIα)及外周蛋白(Peripherin)的表达;RT-PCR和western blot法分别检测肾上腺髓质中Rho GDIα、Peripherin mRNA及其蛋白质的表达水平;ELISA法检测各组大鼠血清中肾上腺素(Epinephrine, EPI)水平的变化。结果:1.与正常对照组相比,哮喘组大鼠肾上腺髓质结构破坏明显,可见空泡变性或脂质增多,气道周围可见大量炎症细胞浸润;手术哮喘组大鼠的肾上腺髓质及肺脏结构破坏则较哮喘组进一步加剧,补肾组和地米组肾上腺髓质及肺脏结构破坏较哮喘组减轻;与手术哮喘组相比,手术补肾组和手术地米组肾上腺髓质及肺脏结构破坏较轻。电镜下,对照组肾上腺髓质嗜铬细胞形态规整,线粒体结构清晰,嗜铬颗粒数目多,密度均匀;与对照组相比,哮喘组嗜铬细胞胞浆及线粒体出现肿胀,分泌颗粒减少;手术哮喘组除了上述表现,还可见髓质嗜铬细胞出现凋亡及突起样改变,而补肾组和地米组结构破坏程度较哮喘组有所减轻;与手术哮喘组相比,手术补肾组和手术地米组肾上腺髓质嗜铬细胞病变减轻。2.与对照组相比,哮喘组大鼠髓质嗜铬细胞中PNMT的表达及血清中EPI水平明显降低(P<0.05);与哮喘组相比,手术哮喘组较哮喘组进一步降低(P<0.05),而补肾组和地米组中PNMT及EPI的表达增高(P<0.05);与手术哮喘组相比,其在手术补肾组和手术地米组表达增高(P<0.05)。3.Rho GDIα与PNMT的表达趋势相类似,在对照组中,Rho GDIα有明显的表达;与对照组相比,哮喘组表达降低(P<0.05);与哮喘组相比,手术哮喘组较哮喘组进一步降低(P<0.05),而补肾组和地米组表达增高(P<0.05);与手术哮喘组相比,手术补肾组和手术地米组表达增高(P<0.05)。4.在各组大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞中均可见Peripherin的表达,与对照组相比,Peripherin在哮喘组表达增高(P<0.05);与哮喘组相比,手术哮喘组中表达进一步增高(P<0.05),补肾组和地米组表达降低(P<0.05);与手术哮喘组相比,手术补肾组和手术地米组表达降低(P<0.05)。结论:1.单侧肾上腺切除能够加剧哮喘大鼠AMCC结构和功能的改变,同时还可以促使AMCC向神经元转变。2.补肾方能够抑制哮喘大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞向神经元转变的进程。3Rho GDIα和Peripherin的表达变化与肾上腺髓质嗜铬细胞转变之问存在密切关系。
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全文目录
摘要 5-8 ABSTRACT 8-12 英文缩略词表 12-13 前言 13-15 第一章 材料与方法 15-28 1.1 材料 15-19 1.2 动物实验方法 19-27 1.3 统计学分析 27-28 第二章 结果 28-38 2.1 实验结果 28-38 第三章 讨论 38-42 第四章 结论 42-43 参考文献 43-47 综述 哮喘发病的非炎性因素及其与中间丝蛋白的相关性研究 47-63 参考文献 55-63 攻读硕士学位期间完成的论文情况 63-64 致谢 64
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 呼吸系及胸部疾病 > 气管和支气管疾病 > 支气管疾病 > 支气管哮喘
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