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甲状腺功能亢进对成年期大鼠前额叶内突触结合蛋白1表达的影响

作　者: 王建月
导　师: 朱德发
学　校: 安徽医科大学
专　业: 老年医学
关键词: 甲状腺功能亢进症甲状腺机能减退症前额叶 syt1 免疫组织化学法 Western blot
分类号: R581.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的观察成年期甲状腺功能亢进(简称甲亢)对大鼠前额叶突触结合蛋白1(synaptotagmin-1, syt 1)表达水平的改变,并探讨这种损伤可能的分子机制。方法健康3月龄成年Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为三组：甲亢组(n=11)、甲减组(n=11)、正常对照组(n=11)。在正常环境中以普通饲料、普通饮水饲养。用左旋甲状腺素(L-Thyroxine, L-T4) 50ug/100gWB·d腹腔注射3周,复制甲状腺功能亢进(甲亢)模型；丙基硫氧嘧啶(PTU) 1mg/100gWB·d腹腔注射6周,复制甲状腺功能减退(甲减)模型；正常对照组给予等量无菌生理盐水腹腔注射。造模结束后,腹主动脉取血1.5ml,离心后取血清采用放射免疫法测定T3、T4水平。取血后将大鼠断头处死,冰上迅速分离脑组织,整个右侧大脑半球被分离,置于4%的多聚甲醛溶液中固定7天备于免疫组织化学检测,左前额叶迅速分离后置于-80℃待做Western blot:(1)超敏S-P法行免疫组织化学检测,光学显微镜拍摄额叶Ⅰ层(分子层)、Ⅱ层(外颗粒层)、Ⅲ层(外椎体细胞层)、Ⅳ层(内颗粒层)、Ⅴ层(内椎体细胞层),生物图像分析系统对前额叶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ层的的免疫反应产物syt 1进行光密度值分析,以平均光密度(average optical density, AOD)作为观察指标(2) Western blot方法：提取大鼠左脑前额叶突触小体后,采用此法获得显影条带,对条带进行光密度分析,通过与内参照GAPDH的条带光密度值的比值间接反映syt1的表达量。实验资料采用均数±标准误(x±s)表示。所有数据运用SPSS 16.0统计软件采用单因素方差分析(one way ANOVA),进一步用LSD (least-significant difference for post hoc analysis)法进行多重比较。P<0.05为差异有显著性。结果1.血清T3、T4水平：与正常对照组相比,甲亢组血清T3、T4浓度均明显升高(P<0.01)；甲减组大鼠血清T3、T4水平显著降低,分别为对照组的52.3%、77.9%(P<0.05)。2.免疫组化：甲亢组大鼠前额叶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ层syt 1免疫反应产物比对照组减少(P<0.05),仅在第Ⅳ层与对照组比较无统计学意义。甲减组大鼠前额叶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ层syt 1免疫反应产物明显少于对照组(P<0.05)；3. Western blot方法：甲亢组大鼠前额叶syt 1蛋白表达水平有减少,但无统计学意义(P>0.05),甲减组大鼠前额叶syt 1蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.05)。结论免疫组化和Western blot法均显示甲状腺功能亢进可致成年期大鼠前额叶内syt 1蛋白表达减少。

全文目录

中英文缩略词表  5-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
前言  11-13
材料与方法  13-17
结果  17-23
讨论  23-28
  实验动物的选择  23-24
  造模方法选择  24-25
  血清甲状腺激素水平  25
  甲亢、前额叶与学习记忆  25-26
  syt 1与学习记忆  26-27
  甲亢大鼠前额叶syt 1表达减少  27
  甲减大鼠前额叶syt 1表达减少  27-28
  甲亢和甲减大鼠前额叶syt 1表达减少  28
结论  28-29
参考文献  29-37
附录  37-38
致谢  38-39
综述  39-52
  综述参考文献  46-52

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