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延迟亚低温对自发性高血压大鼠永久性大脑中动脉闭塞后的作用以及对星形胶质细胞影响的观察

作　者: 葛安岩
导　师: 范薇
学　校: 复旦大学
专　业: 神经病学
关键词: 缺血性脑卒中 MCAO 亚低温 NeuN GFAP
分类号: R743.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

背景：缺血性脑卒中是严重威胁人类健康的疾病之一,对许多急性大面积脑梗塞的病人,目前尚缺乏行之有效的治疗方法。亚低温在普通动物的缺血性脑卒中模型中已经被发现有切实的脑保护作用。但高血压是脑卒中确定独立的危险因素,以往研究采用正常血压大鼠得到的结论如果推广到临床仍存在争议。为此我们制作自发性高血压大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型来探索亚低温的脑保护作用。目的：1、建立自发性高血压大鼠的永久性大脑中动脉闭塞模型2、观察亚低温对该模型是否有脑保护作用3、探索亚低温治疗的时间窗和发挥作用的机制。方法：35只雄性自发性高血压大鼠(SHR)随机分为2h亚低温组(A组；9只)；6h亚低温组(B组；9只)；常温组(C组；9只)与假手术组(D组；8只)。在A组,B组,C组应用线栓法制作永久性大脑中动脉闭塞(pMCAO)模型。A组和B组动物分别在MCAO后2h和6h时开始全身亚低温(肛温维持33±0.5℃)；C组大鼠术后置于常温,D组手术术中不插入栓线,术后置于常温。在MCAO后5h,24h,36h对缺血组大鼠进行Longa评分。所有大鼠在术后的36h处死,制作脑的连续冠状切片。经CV染色后计算脑梗塞灶体积百分比,脑水肿程度。取经过前联合的切片进行NeuN, GFAP, DAPI免疫荧光染色,观察各组大鼠脑内神经元脱失和星形胶质细胞存活的情况。结果：接受缺血手术的27只大鼠分别有1只因为术中大出血死亡,1只因为无神经行为学缺损且解剖未发现梗塞而剔除,最后共有25只入组,缺血模型总体成功率为92.59%。各组大鼠术后死亡率无明显差异。缺血后各个时间点的神经行为学评分各组之间比较无明显差异。与常温组比较,2h低温组与6h低温组的梗死体积分别减小23.75%与18.72%；水肿程度减轻25.32%与21.52%。但两亚低温组之间比较无明显差异。NeuN染色显示：在皮层梗死周边、皮层梗死核心区,缺血手术组与假手术组相比神经元脱失比较明显。在皮层缺血周边,两亚低温组与常温组比较NeuN阳性细胞数明显增多,两低温组比较无明显差异。在皮层梗死核心区,末观察到亚低温的这一作用。GFAP染色显示：在皮层梗死周边6h低温组与常温组的星形胶质细胞数较假手术组明显减少。2h低温组与常温组比较星形胶质细胞数明显增多,6h低温组与常温组比较有增多的趋势,但没有统计学意义。两低温组之间比较无明显差异。在皮层梗死核心区,缺血手术组与假手术组相比星形胶质细胞数都有明显的减少,两低温组与常温组比较星形胶质细胞减少的情况都有明显改善,两亚低温组比较无明显差异。结论1、应用自发性高血压大鼠制作pMCAO模型,可行性好且成功率高。2、亚低温对自发性高血压大鼠的pMCAO有脑保护作用。3、延迟至缺血后6h的亚低温治疗对自发性高血压大鼠的pMCAO仍然有脑保护作用,其效果与延迟2h的亚低温治疗无明显差异。4、亚低温对pMCAO早期的脑保护作用可能与减少缺血周边神经元的死亡保护梗死区与梗死周边星形胶质细胞有关,具体机制尚待进一步探索。

全文目录

全文缩略词  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-10
前言  10-13
材料与方法  13-22
  1.材料  13-15
  2.方法  15-22
结果  22-34
  1.高血压大鼠永久性大脑中动脉模型的建立与评价  22-24
  2 大鼠死亡情况及各个时间点神经功能缺损评分  24-26
  3.梗死体积百分比以及脑水肿程度  26-28
  4.NEUN染色观察神经元脱失  28-31
  5.GFAP染色观察星形胶质细胞  31-34
讨论  34-39
  1.自发性高血压大鼠的选择和PMCAO模型建立的总结  34-35
  2.延迟亚低温的脑保护作用  35-36
  3.延迟亚低温对星形胶质细胞的作用  36-39
全文小结  39-40
参考文献  40-48
综述  48-60
  参考文献  57-60
致谢  60-61

延迟亚低温对自发性高血压大鼠永久性大脑中动脉闭塞后的作用以及对星形胶质细胞影响的观察

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