学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

CD86及NF-κB在IL-10修饰的DC诱导大鼠角膜移植免疫耐受中的作用

作　者: 苏海英
导　师: 李兵
学　校: 辽宁医学院
专　业: 眼科学
关键词: 白细胞介素-10 树突状细胞角膜移植免疫耐受 CD86 NF-κb
分类号: R779.65
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 25次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的研究CD86及NF-κB在IL-10-DC诱导大鼠同种异体角膜移植免疫耐受中的作用。方法1. DC培养与鉴定:参照经典Hermans方案直接分离诱生法进行细胞培养,分三组,分别为6-DC组、12-DC组和IL-10-DC组。在经典分离诱导方案(GM-CSF+IL-4)的基础上培养至第6天为6-DC;第二组细胞继续培养至12天,即为12-DC;第三组在第6天加入IL-10继续培养至12天,为IL-10-DC。光镜观察DC形态,用流式细胞仪(FCM)检测所得DC表型。2.用培养的供体来源的6-DC及IL-10-DC预处理受体,建立Wistar-SD大鼠穿透性角膜移植模型。供体Wistar大鼠21只;受体SD大鼠42只,受体鼠随机分为3组,每组均为14只,角膜移植前3d,每只受体鼠经尾静脉注射不同物质。A组:注射PBS;B组:注射6-DC,细胞数为2×10~6个/只;C组:注射IL-10-DC,细胞数为2×10~6个/只。以混浊、水肿和新生血管3项指标作为临床评估标准,观察术后各组受体角膜植片的存活时间。术后第14天各组随机抽取4只鼠取术眼角膜行组织病理学检查及免疫组化法检测CD86及NF-κb的表达。结果1.DC的生长情况、形态和表型:新分离的细胞呈圆形,胞体小。培养至第2天,细胞开始集落生长;第4天集落最大,随着培养时间的延长,细胞体积增加呈现典型的树突状细胞形态。流式细胞仪检测DC的表型:IL-10-DC组CD83、CD86表达最低,而12-DC组表达最高。三组比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。2.各组大鼠角膜植片存活情况:平均存活时间为A组(10.10±1.66)d,B组(17.80±1.81)d,C组(26.40±1.65)d。术后第14d,A组角膜植片均发生排斥,而B、C两组角膜植片仍保持透明。B、C两组植片存活时间与A组比较显著延长(P<0.01);B、C组间比较,差异有统计学意义(P<0.01)。植片组织病理学检查:A组角膜植片显著水肿、增厚,出现大量的淋巴细胞和单核细胞浸润,角膜基质排列紊乱。B、C两组植片炎性细胞浸润均显著减少,角膜厚度及结构基本正常。CD86及NF-κB,在对照组中呈高表达(P<0.05),B,C组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论1.直接分离诱生法联合应用细胞因子GM-CSF、IL-4可以从大鼠骨髓中获得大量较高纯度imDC,满足了进一步实验对细胞量的要求。IL-10可有效抑制DC成熟。2.摄取供体的imDC能显著延长角膜植片的存活时间,成功诱导了同种异体大鼠角膜移植的免疫耐受。CD86及NF-κB参与了同种异体角膜移植排斥反应的调控。IL-10-DC可抑制CD86及NF-κB的表达水平,从而抑制角膜排斥反应的发生。

全文目录

摘要  4-6
英文摘要  6-8
英文缩略语表  8-10
前言  10-12
实验材料与方法  12-17
结果  17-19
讨论  19-23
结论  23-24
本研究创新性的自我评价  24-25
参考文献  25-28
附图  28-32
综述  32-40
  参考文献  37-40
在学期间科研成绩  40-41
致谢  41-42
个人简介  42-43

CD86及NF-κB在IL-10修饰的DC诱导大鼠角膜移植免疫耐受中的作用

内容摘要

全文目录

相似论文