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利多卡因对幼鼠小肠缺血—再灌注致肾损伤的保护作用

作 者: 刘庆文
导 师: 吴学东
学 校: 大理学院
专 业: 儿科学
关键词: 肠缺血-再灌注 肾损伤 免疫组织化学 利多卡因 幼鼠
分类号: R965
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的制作幼龄SD大鼠小肠缺血-再灌注(Ⅱ/R)损伤模型,通过静脉注射利多卡因作为干预,检测大鼠血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)值,测定肾组织中丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、细胞间粘附分子1 (ICAM-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和核转录因子κB (NF-κB)水平,探讨利多卡因在幼龄SD大鼠肠缺血-再灌注致肾损伤过程中对肾脏的保护作用,为临床预防肠缺血-再灌注致肾损伤提供动物实验参考。方法将80只4周龄SD大鼠随机分为四组:①假手术组(Sham组,10只),仅游离肠系膜上动脉(SMA),不夹闭SMA, 1h后处死取材;②肠缺血组(Ⅱ组,10只),游离并夹闭SMA, 1h后取材;③肠缺血-再灌注组(Ⅱ/R组,30只),游离并夹闭SMA 1h,再灌注前通过股静脉注射生理盐水0.5ml,再灌注后0.5h、1h、2h每个时间点分别处死10只动物。④利多卡因干预组(Lid组,30只),游离并夹闭SMA 1h,再灌注前通过股静脉注射利多卡因2mg/kg(稀释于0.5ml生理盐水里),再灌注后0.5h、1h、2h每个时间点分别处死10只动物。处死动物后,肾组织送病理学检查,分别测定各组血Scr和BUN值,用紫外可见光分光光度计测定肾组织MDA含量和MPO活性,用ELISA法测定肾组织ICAM-1的表达,以及用免疫组织化学的方法测定肾组织TNF-α和NF-κB表达。结果进行单因素方差分析。结果(1)肾组织病理变化:肾组织切片H-E染色光镜下见假手术组肾组织无形态结构损伤;肠缺血组可见组织水肿;肠缺血-再灌注组出现不同种度的组织充血水肿,肾小管上皮细胞空泡变性,且随再灌注时间延长损伤加重;利多卡因干预组肾组织充血水肿,未见肾小管上皮细胞空泡变性,对应时间点的组织损伤较肠缺血-再灌注组轻。肾组织切片TNF-α和NF-κB免疫组织化学染色光镜下可见各组肾小管上皮细胞胞浆及胞核内均有不同程度的棕黄色阳性表达。(2)血Scr和BUN变化情况:再灌注1h和2h两个时间点肠缺血-再灌注组血Scr测得值均高于其它三组,对应时间点测得血Scr值在利多卡因干预组高于假手术组(P<0.05),而肠缺血-再灌注组血Scr显著高于利多卡因干预组(P<0.01)。各组间BUN值分别比较差异无统计学意义(P>0.05)(3)肾组织MDA及MPO变化情况:肠缺血-再灌注组及利多卡因干预组肾脏组织MDA和MPO均从再灌注0.5h起逐渐升高。测得各时间点肾脏组织MDA和MPO含量进行组间比较,除利多卡因干预组0.5h时间点MDA、MPO含量与肠缺血组比较无统计学意义外,肠缺血-再灌注组及利多卡因干预组组织MDA和MPO测得值均高于假手术组和肠缺血组,差异有显著性(P<0.05),其中,再灌注1h和2h两个对应时间点肠缺血-再灌注组组织MDA和MPO含量均显著高于利多卡因干预组(P<0.01)。(4)肾组织ICAM-1变化情况:肠缺血-再灌注组组织中ICAM-1水平在再灌注1h升高达峰值后开始下降。测得肾脏组织中ICAM-1水平在组间比较,肠缺血-再灌注组和利多卡因干预组各时间点测得值均高于假手术组(P<0.01),Lid组各个时间点测得值与Ⅱ组测得值间差异无统计学意义(P>0.05),而在再灌注1h和2h两个对应时间点,测得ICAM-1水平肠缺血-再灌注组高于肠缺血组和利多卡因干预组,差异有显著性(P<0.01)。(5)肾组织TNF-α和NF-κB变化情况:肠缺血-再灌注组及利多卡因干预组组织TNF-α和NF-κB均从再灌注0.5h起逐渐升高。组间比较,再灌注各时间点肠缺血-再灌注组及利多卡因干预组组织TNF-α和NF-κB水平均显著高于假手术组和肠缺血组(P<0.01),而再灌注各对应时间点肠缺血-再灌注组组织TNF-α水平高于利多卡因干预组,差异有显著性(P<0.01)。结论幼龄SD大鼠小肠缺血-再灌注可导致Scr升高和肾组织中MDA、MPO、ICAM-1、TNF-α和NF-κB水平升高。利多卡因通过降低幼龄SD大鼠肠缺血-再灌注后Scr浓度和肾组织中MDA含量及MPO活性,下调肾组织中TNF-α、ICAM-1和NF-κB的表达,从而对幼龄SD大鼠因小肠缺血-再灌注所致肾损伤发挥保护作用,其作用机制有待进一步研究。

全文目录


缩略词  4-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-11
前言  11-13
材料与方法  13-26
结果  26-32
讨论  32-40
结论  40-41
参考文献  41-45
附录  45-58
文献综述  58-63
  参考文献  61-63
致谢  63

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学 > 实验药理学
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