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子宫内膜癌及内膜增生患者血清蛋白质谱分析

作　者: 王宜生
导　师: 徐丛剑；金红；曹锐；张晓燕
学　校: 复旦大学
专　业: 妇产科学
关键词: 子宫内膜癌 子宫内膜增生过长 血清蛋白质组学 iTRAQ
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的:子宫内膜癌是妇科常见恶性肿瘤之一。Ⅰ型子宫内膜癌存在明显的从正常子宫内膜到不伴不典型的增生过长到不典型增生过长最后癌变的发展过程。对这一系列内膜增生性病变的研究将有助于深化对子宫内膜癌发病机制的理解,继而从中寻找相应靶点运用于临床,进行早期诊断、病情监测,并及时阻断或逆转病变发展。蛋白质组学研究已经在子宫内膜癌中发现了一系列差异表达蛋白。但这些研究大多只进行了子宫内膜癌与正常对照之间的比较,而很少涉及各种内膜增生性病变。本实验的目的在于通过对内膜增生及早期子宫内膜癌患者血清进行蛋白质组学检测,寻找在子宫内膜癌发生发展过程中可能出现的差异表达蛋白。材料与方法:1、采集子宫内膜癌、内膜增生患者以及正常体检妇女血清用于蛋白质组学检测。为避免代谢性疾病的影响,所有受试者均经内科排除高血压、糖尿病和高脂血症。最终病例数为27例,包括6例Ⅰ期子宫内膜样腺癌,4例子宫内膜不典型增生过长,4例子宫内膜复杂型增生过长,6例子宫内膜简单型增生过长以及7例正常对照。2、去除血清高丰度蛋白后,样本经iTRAQTM Reagents试剂盒进行iTRAQ标记。3、样本经二维液相色谱（强阳离子交换色谱,反相液相色谱）串联质谱（飞行时间质谱,四极杆质谱）分析得到肽段定性与定量信息。4、肽段质谱分析结果经IPI v3.45 human数据库检索和Protein Pilot v1.0软件处理,得到各种蛋白的定性信息以及其在各组的相对定量。5、以比值大于1.6或小于0.625为标准,确定不同组间比较所得差异表达蛋白。结果:1、以正常对照组为参照,血清淀粉样蛋白A1和A2在子宫内膜癌组表达上调;抗凝血酶Ⅲ和α1抗胰凝乳蛋白酶在不典型增生组表达上调;富含组氨酸糖蛋白在不典型增生组表达下调;载脂蛋白A-Ⅳ在复杂型增生组表达下调;载脂蛋白C-Ⅱ,载脂蛋白E在简单型增生组表达上调。合并复杂型和简单型增生组结果,未发现差异表达蛋白。2、与子宫内膜癌组比较,血清淀粉样蛋白A1和A2水平在子宫内膜增生组明显低表达。载脂蛋白A-Ⅳ和维生素D结合蛋白在不典型增生组水平与内膜癌组有明显差异。3、载脂蛋白C-Ⅲ变异体1和补体因子H相关蛋白1在不典型增生组表达水平明显低于简单型和复杂型增生组。α1抗胰凝乳蛋白酶,血红素结合蛋白和SERPINC1蛋白在不典型增生组表达明显高于简单和复杂型增生组。结论:1、富含组氨酸糖蛋白在不典型增生组明显下调,可能与子宫内膜癌发生易感性增加有关。2、血清淀粉样蛋白A在子宫内膜癌组表达上调,可能与机体对肿瘤浸润的反应有关。3、本研究中受试者均以排除高血压、糖尿病和高血脂,但检测结果仍显示内膜病变患者存在脂代谢异常。因此,子宫内膜癌发病与脂代谢异常之间的关系需进一步多角度的研究。4、本研究所发现的差异表达蛋白有待进一步验证。5、未发现表达水平与子宫内膜病变程度呈线性相关的差异表达蛋白。

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
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