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γ线与HPM微波复合照射免疫系统的损伤效应及其机制研究

作　者: 夏红杰
导　师: 王德文；左红艳
学　校: 中国人民解放军军事医学科学院
专　业: 病理与病理生理学
关键词: 微波 γ线 复合照射 脾脏 淋巴细胞 Raji细胞 损伤效应
分类号: R144
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


目的:免疫系统既是电离辐射敏感器官,也是电磁辐射重要的效应器官,但复合照射对其的损伤效应及机制研究较少。本课题较系统地研究了γ线和S波段高功率微波(S-HPM)复合照射致小鼠免疫系统相关脏器脾脏及离体Raji细胞的损伤效应,并进行了初步的机制探讨,拟为γ线与HPM复合照射损伤的诊断、治疗及防护提供实验与理论依据。方法:分别以60COγ线5.5Gy、S波段HPM 50mW/cm2、γ线和HPM复合照射二级昆明小鼠和Raji细胞,小鼠于照后6h,1、3、7、14、28、90 d活杀,取脾脏组织, Raji细胞于照后6h,采用光镜、电镜、图像分析,倒置相差显微镜,流式细胞术,Annexin-V和PI双标记检测,Fluo-3荧光探针负载和激光扫描共聚焦显微镜等仪器和技术,从组织、细胞及分子水平,研究γ线和HPM复合照射后免疫系统的损伤效应及其机制。结果:第一部分活体动物γ线、S-HPM及复合照射均造成小鼠脾脏淋巴细胞损伤,并均经历凋亡与坏死、再生修复及基本恢复等阶段,损伤在照后6h即开始出现,照后1-3d损伤最重,照后7d开始恢复,28d后基本恢复正常。γ线组和S-HPM及复合组照射后小鼠脾淋巴细胞出现凋亡坏死改变,主要的损伤效应表现为脾小体的面积、周长、面密度及周密度减小;单个脾小体内淋巴细胞的数量减少,面密度与周密度减小;HPM照射后脾淋巴细胞典型的凋亡坏死改变程度较轻微,主要以巨噬细胞增多为表现,脾小体形态未见明显变化。上述变化以复合照射组最重,其次为γ线组,HPM组最轻,伪照射组无明显损伤。第二部分离体细胞①细胞形态学对照组Raji细胞小而圆,胞体透亮,折光性强;辐射后即刻,Raji细胞形状不规则,胞体皱缩,折光性差,其中以γ+S-HPM组最重,γ组次之,S-HPM组最轻。②细胞周期S期:各辐射组细胞数均多于对照组,其中γ组和γ+S-HPM组具有显著性差异(P<0.01),尤其以γ+S-HPM组更为显著;G0/G1期:各辐射组细胞数均明显少于对照组(P<0.01),辐射组间未见明显差异; G2/M期:S-HPM组较对照组细胞数显著增多(P<0.05),γ组和γ+S-HPM组细胞数均与对照组无显著差异,明显低于S-HPM组(P<0.01)。③细胞凋亡和坏死各辐射组细胞凋亡率和坏死率均高于对照组,其中γ组和γ+S-HPM组具有显著性差异(P<0.05或P<0.01),尤以γ+S-HPM组最为显著(P<0.01);辐射组间比较,γ+S-HPM组明显高于S-HPM组和γ组(P<0.01)。④Ca2+浓度各辐射组细胞内Ca2+荧光强度均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01),各辐射组间比较,均具有非常显著性差异(P<0.01),其荧光强度值依次为S-HPM <γ<γ+S-HPM。结论:微波和γ线照射均可影响活体小鼠脾脏和体外培养淋巴细胞的凋亡、坏死、生长和增殖,其中微波与γ线复合照射对淋巴细胞的损伤效应较单纯照射加重,其损伤特点主要表现为γ线效应,微波在一定程度上加重了γ线的损伤,细胞内钙超载可能是其损伤机制之一。

全文目录


英文缩略词表  6-8
中文摘要  8-10
英文摘要  10-13
前言  13-16
  参考文献  15-16
第一部分 活体动物 γ线与 HPM 复合照射致小鼠脾脏损伤 的形态改变和图像分析研究  16-29
  材料和方法  16-18
  结果  18-25
  讨论  25-27
  结论  27-28
  参考文献  28-29
第二部分 离体细胞 γ 线与 HPM 复合照射对离体培养 Raji 细胞的 影响及机制探讨  29-47
  第一节 电磁辐射和电离辐射复合照射体外培养 淋巴细胞损伤及凋亡观察  29-36
    材料与方法  29-31
    结果  31-33
    讨论  33-34
    结论  34-35
    参考文献  35-36
  第二节 微波和γ线复合照射对 Raji 细胞 细胞周期变化的影响  36-41
    材料与方法  36-37
    结果  37-38
    讨论  38-39
    结论  39-40
    参考文献  40-41
   第三节 微波和γ线复合照射 Raji 细胞 Ca2+浓度的 变化及其意义  41-47
    材料与方法  41-42
    结果  42-43
    讨论  43-45
    结论  45-46
    参考文献  46-47
全文结论  47-48
在读期间发表的论文  48-49
综述  49-61
发表论文  61-73
个人简历  73-74
致谢  74-75

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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 放射卫生 > 放射性的测量和剂量
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