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大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛病理变化与细胞凋亡相关因子AKT、JNK的表达研究

作　者: 焦松
导　师: 任光阳
学　校: 遵义医学院
专　业: 神经外科
关键词: 蛛网膜下腔出血脑血管痉挛细胞凋亡 AKT JNK
分类号: R743.34
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 3次
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内容摘要

目的：运用大鼠蛛网膜下腔出血模型,对基底动脉进行形态学测定和病理检查,动态观察血管痉挛的病理演变过程与细胞凋亡的关系,检测AKT、JNK在痉挛血管中表达情况。方法：运用改良枕大池二次注血法建立大鼠SAH模型,60只SD大鼠随机分成对照组和SAH后第1、3、7、11、14组。相应时间点观察两组大鼠基底动脉血管厚度、内径周长以及透射电镜下的结构变化；荧光显微镜观察荧光染色后观察基底动脉细胞凋亡；Western blot方法测定不同时间点基底动脉P-JNK、P-AKT表达水平。结果：1.光学显微镜检查：与对照组(B组)相比,实验组(A组)组基底动脉血管痉挛程度明显,光镜下观察到痉挛血管管壁增厚、管腔内径周长减少、内弹力层增厚皱褶,同时观察到痉挛血管细胞增殖现象明显,其中以SAH后第3、7天明显,血管厚度增加和内径周长减少程度与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2.透射电子显微镜观察：与对照组(B组)比较,实验组(A组)内皮细胞出现类凋亡样变化,透射电镜下观察到痉挛血管内皮细胞膜起泡,胞质凝聚,胞浆空泡变,核染色质凝聚、趋边,以SAH后第3、7天改变显著,内皮细胞间隙增加,内弹力膜增厚,严重变形,甚至断裂,平滑肌细胞也出现细胞肿胀等病理改变。到SAH后第11天痉挛缓解,上述改变减轻。3.荧光显微镜观察到SAH后痉挛的基底动脉见内皮细胞和平滑肌细胞出现细胞凋亡,表现为核固缩,荧光染色着色深,凋亡程度随其痉挛程度的加重而增加。4.Western blot检测P-AKT和P-JNK的蛋白表达,与内参β-actin比较测灰度值。结果显示SAH后第3、7天P-JNK的表达显著高于对照组(P<0.05),而P-AKT表达增加与对照比较无统计学意义(P>0.05)；而SAH后第11、14天P-AKT表达显著高于对照组(P<0.05), P-JNK与对照比较无统计学意义(P>0.05)。结论：蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的发生与血管周围细胞的增殖以及基底动脉内皮细胞凋亡样变化相一致,表明细胞凋亡和血管细胞增殖可能是CVS发生机制中非常重要的因素。促凋亡基因JNK与抑制凋亡基因AKT的在痉挛血管中均有表达,SAH后不同时间点两者表达量有差异,说明JNK与AKT细胞凋亡信号通路可能与CVS后细胞凋亡调控有关。

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英文缩略词表 4-6摘要 6-7Abstract 7-9前言 9-11材料与方法 11-16结果 16-25讨论 25-29结论 29-30参考文献 30-32综述:细胞凋亡在蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛中的研究进展 32-40 参考文献 37-40致谢 40-41作者简介 41

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