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大鼠三叉神经脊束核和背柱核向外侧丘系核投射的神经通路研究

作 者: 张宇鹏
导 师: 管振龙
学 校: 河北师范大学
专 业: 生理学
关键词: 三叉神经脊束核 背柱核 外侧丘系核 GABA能神经元 神经投射通路 耳鸣 免疫荧光技术 大鼠
分类号: R764
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要


躯体感觉是非听觉信号传入听觉相关核团的主要来源,这些传入信号包括本体感觉和来自躯体表面的触觉、温度觉以及痛觉。三叉神经感觉复合体和背柱核是躯体感觉系统上行传导通路中二级神经元胞体所在的部位,在接受头面部、躯干和四肢的躯体感受器的传入以及调节听觉和各种机体活动中具有重要作用。头面部的本体感觉信号和听觉信号在很多核团和脑区进行整合。目前已经确定躯体感觉信号传递至听觉系统的IC、听皮层、上橄榄复合体和蜗神经核等部位,并在这些部位进行听觉和躯体感觉的整合。目前认为主观性耳鸣主要是由噪声或药物等损伤内耳毛细胞使其向听觉中枢的传入不平衡,引发IC等听觉中枢自发放电增加造成的。而大量的临床实践和实验研究证明,电刺激或穴位刺激躯体感受器能抑制耳鸣。所以,躯体感觉系统调节听觉系统活动,尤其是躯体感觉刺激抑制耳鸣的研究已成为热点。这些神经化学通路和生理机制的阐明对于治疗耳鸣以及耳鸣治疗方法的探索都有重大的理论意义和现实意义。有资料显示,IC内GABA释放的减少亦会使其放电增加诱发耳鸣,而向IC内注射微量的GABA受体激动剂能显著地降低耳鸣的响度。Shore等发现电刺激三叉神经能抑制由声音诱发的IC神经元放电。因此有人推测躯体感觉传入信号通过某种神经通路增加了IC内GABA的释放,降低了IC神经元的放电,这可能是临床上刺激躯体感受器治疗耳鸣的机制之一。在以往的研究中,重点主要放在了躯体感觉系统与听觉系统在蜗神经核和IC水平的整合关系,而对NLL与躯体感觉相互关系的研究则关注较少。NLL三个亚核内都含有GABA能神经元,且均向IC有投射,是IC内抑制传入的主要核团。电刺激DNLL能增加IC内GABA的释放,抑制由声音诱发的IC放电活动。现在认为这些抑制作用主要与声源定位有关。但是否存在Sp5、背柱核→NLL(GABA能)→IC的神经通路,经此通路将刺激躯体感受器的信号传递至NLL,进而激活NLL内向IC投射的GABA能神经元,并由此抑制IC的放电而抑制耳鸣,至今尚无详细的报道。该通路可能是躯体感觉系统影响IC神经元放电活动的重要组成部分。有鉴于此,本文以SD大鼠为实验材料,应用神经束路追踪和免疫荧光等技术,对Sp5I和背柱核向NLL中GABA能神经元的直接投射进行了研究。实验分为三个部分:(1)Sp5I向NLL的直接定位投射研究;(2)Sp5I投射至NLL内的纤维终末与GABA能神经元之关系研究;(3)背柱核向NLL的直接定位投射研究。结果如下:1.Sp5I向NLL的直接投射分别将顺行追踪剂dextran-Texas Red电泳入Sp5I,逆行追踪剂FG电泳入DNLL、INLL和VNLL。观察dextran-Texas Red顺行标记纤维和终末在NLL内的分布。结果发现:①向NLL投射的神经元主要分布在较小区间内的Sp5I背侧和腹侧。②向NLL投射的纤维和终末主要分布在对侧DNLL、INLL和VNLL。③Sp5I主要向对侧下丘外侧皮质核、对侧上丘、双侧蜗神经核、对侧脑桥网状核、对侧脑桥内侧核和脑桥腹侧核等核团有投射。2.Sp5I向NLL投射的纤维终末与GABA能神经元之关系研究将顺行追踪剂dextran-Texas Red电泳入Sp5I,免疫荧光方法染色显示NLL内GABA能神经元。顺行标记纤维终末与GABA能神经元的重叠区域主要出现在对侧的DNLL、INLL、VNLL和下丘外侧皮质核。激光扫描共聚焦显微镜观察发现,来源于Sp5I的顺行标记纤维终末与DNLL、INLL和VNLL内的GABA能神经元有直接接触。3.背柱核向NLL的直接投射将顺行追踪剂dextran-Texas Red电泳入背柱核,发现顺行标记纤维和终末主要分布在对侧DNLL和VNLL,少量分布在对侧INLL。在对侧外侧丘系旁核、下丘外侧皮质核的边缘区、下橄榄核、丘间核、脑桥外侧核、脑桥内侧核和脑桥腹侧核也有顺行标记纤维和终末的分布。将逆行追踪剂FG分别电泳入DNLL、INLL和VNLL,发现逆行标记细胞主要分布在闩平面及其尾侧较小节段内的对侧薄束核和楔束核。将顺行追踪剂dextran-Texas Red电泳入背柱核,然后用免疫荧光化学反应染色显示NLL内GABA能神经元,结果未发现来源于背柱核的投射纤维终末与NLL内的GABA能神经元有接触。这些结果提示:(1) Sp5I向NLL有直接投射,来自Sp5I的顺行标记纤维终末和NLL内的GABA能神经元有直接接触,即存在Sp5I→NLL(GABA能)→IC的神经通路;(2)背柱核向NLL有直接投射,但投射终末不与NLL内的GABA能神经元接触。这些通路的进一步确证及相应的生理功能还有待于进行超微结构和电生理学的研究。经河北省科学技术情报研究院查新表明,本研究结果在国内外文献中尚未有相同的报道。这些成果为进一步研究刺激躯体感受器抑制耳鸣的神经机制、耳鸣形成机制以及躯体感觉信息与听觉信息在脑干听觉中枢的整合机制提供了部分形态学证据。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-12
引言  12-14
1 综述一 躯体感觉和听觉在听觉中枢的整合作用  14-21
  1.1 躯体感觉和听觉在听皮层的整合  14-16
  1.2 躯体感觉和听觉在下丘的整合  16-17
    1.2.1 神经形态学证据  16
    1.2.2 神经电生理学证据  16-17
  1.3 躯体感觉和听觉在蜗神经核的整合  17-21
    1.3.1 神经形态学证据  17-19
    1.3.2 神经电生理学证据  19
    1.3.3 神经化学通路相关的神经递质  19-21
2 综述二 外侧丘系核的投射通路和功能  21-27
  2.1 NLL的位置及细胞构筑  21
  2.2 DNLL的神经纤维联系和生理功能  21-24
    2.2.1 DNLL的传入和传出投射联系  21-23
      2.2.1.1 DNLL的传入投射联系  22-23
      2.2.1.2 DNLL的传出投射联系  23
    2.2.2 DNLL处理双耳听觉的生理功能  23-24
  2.3 INLL和VNLL的神经纤维联系和生理功能  24-27
    2.3.1 INLL和VNLL的传入传出投射联系  24-25
    2.3.2 INLL和VNLL处理单耳听觉的生理功能  25-27
3 实验一 三叉神经脊束核极间部向外侧丘系核的直接投射  27-40
  3.1 材料与方法  27-29
    3.1.1 实验动物分组  27
    3.1.2 仪器和试剂  27-28
    3.1.3 实验步骤  28-29
  3.2 结果  29-40
    3.2.1 Dextran-Texas Red顺行追踪实验结果  29-33
    3.2.2 FG的逆行追踪实验结果  33-40
4 实验二 三叉神经脊束核极间部投射纤维终末与外侧丘系核中GABA能神经元的直接接触  40-45
  4.1 材料与方法  40-42
    4.1.1 实验动物分组  40
    4.1.2 仪器和试剂  40-41
    4.1.3 实验步骤  41-42
  4.2 结果  42-45
    4.2.1 Dextran-Texas Red顺行追踪实验结果  42
    4.2.2 Dextran-Texas Red顺行标记纤维终末与GAD阳性神经元重叠区域  42-45
5 实验三 背柱核向外侧丘系核的直接投射  45-55
  5.1 材料与方法  45-48
    5.1.1 实验动物分组  45
    5.1.2 仪器和试剂  45-46
    5.1.3 实验步骤  46-48
  5.2 结果  48-55
    5.2.1 Dextran-Texas Red顺行追踪实验结果  48-52
    5.2.2 FG逆行追踪实验结果  52-55
6 讨论  55-58
7 结论  58-60
参考文献  60-71
附录  71-83
  1 中英缩略语及中文对照表  71-75
  2 科技查新报告  75-83
后记(含致谢)  83-84
攻读硕士期间取得的科研成果清单  84
攻读硕士学位期间参加研究的课题  84

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中图分类: > 医药、卫生 > 耳鼻咽喉科学 > 耳科学、耳疾病
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