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茶籽壳原花青素的提取、分离研究

作　者: 董瑞霞
导　师: 李立祥
学　校: 安徽农业大学
专　业: 茶学
关键词: 材料筛选 茶籽壳 原花青素 提取 大孔吸附树脂 分离
分类号: S571.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


原花青素（Procyanidins,简称PC）是一种广泛分布于植物界的黄烷醇及其聚合体,是一种高效、低毒的天然活性物质,具有抗氧化、抗肿瘤、降低胆固醇等多种药理活性。本文对茶籽壳PC进行提取分离研究,旨在利用茶籽壳进行PC开发,扩大它的提取资源,并提高农业产品及其副产品的利用率和附加值,同时为茶籽壳有效的利用和进一步综合开发提供理论依据。本研究首先采用两种PC含量检测方法,对多种植物材料进行分析,寻找资源较丰富、PC含量较高的材料。结果表明:花生红衣、水杉果、侧柏果、茶籽壳（茶籽外种皮）、花椒果中PC含量较高,可达5.79%以上;其他材料PC含量较低。以茶籽壳为材料进行PC提取研究。以材料粉碎度、提取时间、乙醇浓度、提取温度、料液比及提取次数为提取因子,进行单因素提取研究,结果表明:PC浸取率随茶籽壳粉碎度的增大先增大（80～100目时达最大值）,后呈减小趋势;PC浸取率随提取时间的延长先增大（30min左右时达最大值）,后基本不变;浸取率随乙醇浓度的增加先增大（60%时达最大值）后减小;浸取率随提取温度上升先增大（45℃左右时达最大值）,后呈减小趋势;浸取率随料液比的增大而增大,料液比小于1:10时浸取率增加速度较快,而大于1:10时结果相反;提取2次可取得较好的效果。为了更好的进行PC提取,应用二次通用旋转组合设计,对茶籽壳提取PC的参数进行研究。得回归方程:（?）=8.179+0.155X1+0.177X2+0.160X3+0.154X4-0.150X12-0.174X22+0.099X32-0.002X42+0.084X1X3+0.151X2X4;结果表明:提取时间（X1）,乙醇浓度（X2）,提取温度（X3）,料液比（X4）对PC的浸取率均有较显著影响,并呈现X2＞X3＞X1＞X4。模拟优化后,提取PC参数优化方案为:提取时间28min,乙醇浓度60%,提取温度55℃,料液比1:14:计算机模拟最高浸取率为96.80mg/g,验证实验浸取率95.30mg/g,经提取小试实验证明参数有效。为了得到较纯的PC,本研究采用柱层析法进行PC分离。以大孔吸附树脂HPD100、HPD200A、HPD400A、HPD700、HPD800和30～60目的聚酰胺为填充材料,应用柱静态法进行柱填充材料筛选。结果表明:30～60目的聚酰胺、HPD800及HPD200A对PC吸附量较大,HPD200A解吸量最大,所以将HPD200A作为研究的柱材料。以动态条件下的吸附量、吸附率、吸附时间、解吸率、解吸时间为指标,通过吸附和解吸实验,考察上样流速、上样液pH值、洗脱流速、洗脱液pH值、洗脱液浓度等因素,对HPD200A吸附及解吸PC的影响。结果表明:动态条件下的检测指标,随考察因子的梯度变化而有符合理论规律的变化。综合生产效率及影响因素考虑:大孔吸附树脂HPD200A装柱;上样液pH值5.0、上样流速1.50ml/min上样;用pH值7.0的20%和60%乙醇水溶液以0.50ml/min的流速分步洗脱。结果表明:吸附量69.12mg/ml,吸附率92.86%,吸附时间486min;20%乙醇水溶液的（洗脱液浓缩干燥得样品Ⅰ）解吸率28.40%,60%乙醇水溶液的（洗脱液浓缩干燥得样品Ⅱ）解吸率69.87%;总解吸率98.27%。对PC产品定性和定量分析。以花青素反应、IR法、TLC法定性分析,结果表明:样品Ⅰ和Ⅱ均为PC。定量分析表明:样品Ⅰ和Ⅱ得率分别为15.00mg/g和36.90mg/g;纯度分别为97.22%和76.46%;HPLC分析样品Ⅰ中D,L-C0.05%、EGCG0.35%和可可碱0.02%;样品Ⅱ中EGCG0.01%、可可碱0.02%和咖啡碱0.07%。

全文目录


中文摘要  3-5
Abstract  5-9
1 文献综述  9-17
  1.1 原花青素概述  9-15
    1.1.1 结构、分类及性质  9-10
    1.1.2 生物药理活性  10-12
    1.1.3 应用现状  12-13
    1.1.4 原花青素的资源研究  13
    1.1.5 原花青素的制备及分析  13-15
  1.2 茶籽壳概述  15
  1.3 超声波提取技术简介  15-16
  1.4 大孔吸附树脂分离的应用  16-17
2 引言  17-18
  2.1 研究目的及意义  17
  2.2 主要研究内容  17-18
3 材料与方法  18-25
  3.1 材料  18
  3.2 仪器与试剂  18-19
  3.3 实验方法  19-22
    3.3.1 原花青素提取材料的筛选  19
    3.3.2 茶籽壳原花青素的提取研究  19-20
    3.3.3 茶籽壳原花青素的分离研究  20-22
  3.4 分析方法  22-25
    3.4.1 原花青素含量测定  22-23
    3.4.2 茶籽壳其他成分分析  23
    3.4.3 样品分析  23-25
4 结果与分析  25-39
  4.1 原花青素提取材料的筛选  25-26
    4.1.1 材料筛选  25-26
    4.1.2 茶籽壳原花青素及其他成分  26
  4.2 茶籽壳原花青素的提取  26-31
    4.2.1 单因素提取  26-28
    4.2.2 提取参数优化  28-31
    4.2.3 提取小试实验  31
  4.3 茶籽壳原花青素的分离  31-39
    4.3.1 提取液的预处理  31
    4.3.2 静态实验  31-32
    4.3.3 动态实验  32-34
    4.3.4 分离小试实验  34-35
    4.3.5 样品分析  35-39
5 讨论  39-43
  5.1 茶籽壳的利用  39
  5.2 提取参数的优化  39-40
  5.3 大孔吸附树脂在分离中的应用  40-41
  5.4 样品的分析  41-43
6 结论  43-45
参考文献  45-50
附录  50-51
致谢  51-52
作者简介  52

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 饮料作物 > 茶
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