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李离体繁殖及再生体系的建立

作　者: 丁燕
导　师: 高志红；乔玉山
学　校: 南京农业大学
专　业: 果树学
关键词: 李 离体培养 繁殖 叶片 茎段 再生
分类号: S662.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 84次
引　用: 4次
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内容摘要


本文以中国李品种大石早生李（Prunus salicina Lindl.’Oshiwase’）、小黄李（Prunussalicina Lindl.’Xiaohuangli’）和欧洲李品种大玫瑰（Prunus domestica L.’Grand Rose’）为试材,建立了稳定高效的李离体快繁技术体系,并在此基础上,研究了不同因子对小黄李再生不定芽的影响,以期建立高效的李再生技术体系,为李遗传转化研究和创新种质资源奠定基础。主要结果如下:1.以中国李品种大石早生李为试材,通过外植体消毒试验,结果表明4-5月为最佳取材时期,此时外植体正处于春季萌发生长阶段,带菌较少,成活率高,易诱导成苗。此时期外植体采用70%酒精30s+（O.5%NaClO+吐温-20 2-3滴）12min消毒效果较好。其较适合的继代增殖培养基配方为:F14+0.6-0.8 mg·L-1 6-BA+0.1-0.2mg·L-1NAA+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂,增殖倍数达6.0;较适合生根的培养基为:1/2Ms+0.2 mg·L-1NAA+0.1 mg·L-1IBA,生根率66.7%;驯化基质:蛭石:珍珠岩:泥炭（1:1:1）,成活率皆在65%以上。2.以小黄李的单芽茎段为外植体进行离体培养,研究不同培养基,植物生长调节剂的种类及其浓度、pH值对小黄李增殖与生根的影响。结果表明:较合适的增殖培养基为F14+0.8 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1NAA+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂,pH值5.4-5.8之间;较合适的生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L-1NAA+0.2 mg·L-1IBA+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂,生根率达100%,单株平均根数3-4根,且植株生长健壮;以蛭石:珍珠岩:泥炭（1:1:1）移栽生根苗,成活率80%以上,为工厂化育苗生产奠定了基础。3.以欧洲李品种大玫瑰为试材,筛选出其较适合的继代增殖培养基配方:1/2MS+0.5 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA+0.5 mg·L-1 GA3+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂,增殖倍数达6.5;较适合生根的培养基:1/2MS+0.2 mg·L-1NAA+0.2 mg·L-1IBA,生根率达79.8%。4.以中国李品种小黄李为试材,研究不同基本培养基种类,植物生长调节剂的种类及浓度、暗处理时间对其不定芽再生率的影响。试验结果表明:叶片、普通茎段、白化茎段三种外植体的最适合再生的基本培养基均为WPM培养基,最佳浓度配比为WPM+1.5 mg·L-16-BA+0.8 mg·L-1IBA+30 g·L-1蔗糖+6.0 g·L-1琼脂;6-BA的诱导叶片再生效果优于TDZ,其再生的最佳暗处理时间为21d。5.三种外植体中,叶片再生率最高,达66.35%,但再生芽苗不能存活,主要表现为褐化致死,且不同抗氧化剂处理改善褐化现象不明显;其次为白化茎段,普通茎段最差,最高再生频率分别为30.42%、18.57%。但以白化茎段为外植体的再生芽苗生长正常,存活率100%;着生于白化茎段顶端第1、2节位的节间为适宜再生的外植体。

全文目录


摘要  8-10
ABSTRACT  10-12
缩略词表  12-13
引言  13-14
第一章 核果类果树组织培养及遗传转化研究进展  14-30
  1 核果类果树组织培养研究进展  14-21
    1.1 茎尖及茎段培养  14-15
    1.2 胚培养  15-16
    1.3 胚乳、子叶及下胚轴培养  16
    1.4 原生质体培养  16-17
    1.5 叶片再生培养  17-18
    1.6 其他类型的培养  18-19
    1.7 组织培养的主要影响因子  19-20
      1.7.1 基本培养基  19
      1.7.2 植物生长调节物质  19-20
      1.7.3 培养条件  20
    1.8 存在的问题  20-21
  2 核果类果树遗传转化研究进展  21-23
    2.1 核果类果树遗传转化方法  21-22
    2.2 影响果树遗传转化的因素  22-23
  3 小结  23
  参考文献  23-30
第二章 三个李品种离体繁殖体系的建立  30-46
  1 材料和方法  30-32
    1.1 试验材料  30-31
    1.2 试验方法  31-32
      1.2.1 初代培养  31
        1.2.1.1 外植体采集与处理  31
        1.2.1.2 外植体表面消毒  31
      1.2.2 增殖培养  31-32
        1.2.2.1 基本培养基的筛选  31
        1.3.2.2 不同生长调节剂对芽增殖的影响  31-32
        1.2.2.3 培养基pH值对增殖的影响  32
      1.2.3 生根培养  32
      1.2.4 试管苗驯化移栽  32
      1.2.5 培养条件  32
      1.2.6 数据统计与分析  32
  2 结果与分析  32-41
    2.1 大石早生李离体繁殖体系的建立  32-36
      2.1.1 初代培养  32-34
        2.1.1.1 外植体取材时间对培养效果的影响  32-33
        2.1.1.2 不同消毒方法对培养效果的影响  33-34
      2.1.2 增殖培养  34-35
        2.1.2.1 基本培养基为大石早生李增殖的影响  34
        2.1.2.2 增殖培养基中BA和NAA对芽增殖的影响  34-35
      2.1.3 不同浓度生长素对生根的影响  35-36
      2.1.4 试管苗炼苗移栽  36
    2.2 小黄李砧木离体繁殖体系的建立  36-39
      2.2.1 初代培养  36
      2.2.2 基本培养基对小黄李增殖的影响  36-37
      2.2.3 植物生长调节剂对芽增殖的影响  37-38
      2.2.4 培养基pH值对增殖的影响  38
      2.2.5 生长素对生根的影响  38-39
      2.2.6 试管苗驯化移栽  39
    2.3 大玫瑰离体繁殖体系的建立  39-41
      2.3.1 基本培养基对大玫瑰增殖的影响  39
      2.3.2 不同浓度BA和NAA组合对大玫瑰增殖的影响  39-40
      2.3.3 GA_3对大玫瑰芽增殖和伸长的影响  40-41
      2.3.4 生长素对生根的影响  41
      2.3.5 试管炼苗和移栽  41
  3 讨论  41-43
    3.1 初代培养的影响因素  41-42
      3.1.1 外植体取材  41-42
      3.1.2 外植体消毒  42
    3.2 影响继代培养的因素  42-43
      3.2.1 培养基选择  42-43
      3.2.2 植物生长调节剂的影响  43
      3.2.3 培养基pH值的影响  43
  参考文献  43-46
第三章 小黄李离体再生体系的研究  46-58
  1 材料和方法  46-48
    1.1 试验材料  46
    1.2 方法  46-48
      1.2.1 叶片再生  46-47
        1.2.1.1 基本培养基筛选  46-47
        1.2.1.2 植物生长调节剂种类及浓度组合叶片不定芽再生的影响  47
        1.2.1.3 暗培养时间对小黄李叶片不定芽再生的影响  47
        1.2.1.4 抗氧化剂对叶片再生不定芽的影响  47
      1.2.2 茎段再生  47
        1.2.2.1 基本培养基筛选  47
        1.2.2.2 植物生长调节剂种类及浓度组合茎段不定芽再生的影响  47
        1.2.2.3 不同节位对小黄李白化茎段不定芽再生的影响  47
      1.2.3 培养条件  47
      1.2.4 数据统计与分析  47-48
  2 结果与分析  48-54
    2.1 叶片愈伤组织诱导及不定芽再生  48-51
      2.1.1 不同基本培养基对叶片愈伤组织诱导及不定芽再生  48
      2.1.2 植物生长调节剂种类及浓度组合叶片不定芽再生的影响  48-50
        2.1.2.1 BA/IBA浓度组合对小黄李不定芽再生的影响  48-49
        2.1.2.2 BA/NAA浓度组合对小黄李不定芽再生的影响  49-50
        2.1.2.3 TDZ/2,4-D浓度组合对小黄李不定芽再生的影响  50
      2.1.3 暗培养时间对小黄李叶片不定芽再生的影响  50-51
      2.1.4 小黄李叶片再生不定芽的褐化问题  51
    2.2 茎段愈伤组织诱导及不定芽再生  51-54
      2.2.1 不同基本培养基对茎段愈伤组织诱导及不定芽再生  51-52
      2.2.2 植物生长调节剂种类及浓度组合茎段不定芽再生的影响  52-53
      2.2.3 不同节位对小黄李白化茎段不定芽再生的影响  53-54
  3 讨论  54-55
    3.1 再生培养基的筛选  54
    3.2 植物生长调节剂对再生的影响  54-55
    3.3 暗培养的影响  55
    3.4 外植体类型的影响  55
  参考文献  55-58
全文结论  58-60
图版Ⅰ  60-61
图版Ⅱ  61-62
图版Ⅲ  62-63
图版Ⅳ  63-64
硕士在读期间发表的论文  64-66
致谢  66

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 核果类 > 李
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