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母爱剥夺和慢性温和应激对大鼠行为与海马let-7a、mir-16表达的影响

作 者: 张晟
导 师: 朱熊兆
学 校: 中南大学
专 业: 应用心理学
关键词: 心理应激 海马 抑郁样行为 let-7a mir-16
分类号: B849
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的:研究母爱剥夺和慢性温和应激对大鼠行为与海马let-7amir-16表达的影响;研究早期应激对大鼠成年后再次经历慢性应激的行为反应及海马let-7a、mir-16表达的影响。方法:将新出生的SD大鼠按窝别随机分入母爱剥夺组(n=17)、慢性温和应激组(n=17)、双重应激组(n=17)和对照组(n=17)。母爱剥夺组大鼠在出生后接受母爱剥夺应激。慢件温和应激组大鼠在成年后接受慢性温和应激。双重应激组大鼠出生后接受母爱剥夺应激,且在成年后接受慢性温和应激。对照组大鼠除日常清洁外,不接受任何实验性处理。所有大鼠在13周龄时接受行为评估,包括旷场实验、强迫游泳实验和糖水偏爱实验,分别评定大鼠在旷场实验中爬行总路程、中央格比例、直立次数、大便颗数;在强迫游泳实验中评定大鼠在水中的漂浮时间;在糖水偏爱实验中检测大鼠的糖水偏爱率。于行为学实验结束后处死大鼠,采用实时定量荧光PCR技术检测四组大鼠海马中microRNA let-7a、mir-16的表达水平。采用单因素方差分析和多因素方差分析对数据进行统计分析。结果:1.行为学实验结果表明:(1)旷场实验结果比较:1)爬行总路程:母爱剥夺应激和慢性温和应激对大鼠爬行总路程的影响没有主效应(P>0.05)。而母爱剥夺应激与慢性温和应激对爬行总路程的影响有交互作用;2)直立次数:母爱剥夺应激对直立次数的影响没有主效应(P>0.05)。慢性温和应激对直立次数的影响具有主效应。母爱剥夺应激与慢性温和应激对直立次数的影响具有交互作用(P<0.05);3)中央格比例:母爱剥夺应激、慢性温和应激对大鼠在旷场实验中中央格比例的影响没有主效应。母爱剥夺应激与慢性温和应激对大鼠在旷场实验中中央格比例的影响不存在交互作用(P>0.05);4)大便颗数:母爱剥夺应激对大鼠在旷场实验中大便颗数的影响没有主效应。母爱剥夺与慢性温和应激对大鼠在旷场实验中大便颗数的影响不存在交互作用(P>0.05)。而慢性温和应激对大鼠在旷场实验中大便颗数的影响具有主效应(P<0.05)。(2)强迫游泳实验结果比较:母爱剥夺应激对大鼠在强迫游泳实验中静止漂浮时间的影响没有主效应(P>0.05)。而慢性温和应激对大鼠在强迫游泳实验中静止漂浮时间的影响具有主效应(P<0.05)。母爱剥夺应激与慢性温和应激对大鼠在强迫游泳实验中静止漂浮时间的影响具有交互作用(P<0.05)。(3)糖水偏爱实验结果比较:母爱剥夺应激和慢性温和应激对大鼠在糖水偏爱实验中糖水偏爱率的影响均没有主效应(P>0.05)。而母爱剥夺应激与慢性温和应激对大鼠在糖水偏爱实验中糖水偏爱率的影响具有交互作用(P<0.∞)。2. microRNA表达水平检测结果显示:(1)let-7a检测结果:母爱剥夺组、慢性温和应激组和双重应激组大鼠海马let-7a相对表达量分别是对照组的26.21倍、1.12倍和44.62倍。母爱剥夺应激、慢性温和应激对大鼠海马microRNA let-7a的表达水平的影响具有主效应(P<0。05),且母爱剥夺应激与慢性温和应激对大鼠海马microRNAlet-7a表达水平的影响具有交互作用(P<0.05)。(2)mir-16检测结果:母爱剥夺组、慢性温和应激组和双重应激组大鼠海马mir-16的相对表达量分别是对照组的5。66倍、1.35倍和8.92倍。母爱剥夺应激对大鼠海马mir-16表达水平的影响具有主效应(P<0。05)。而慢性温和应激对大鼠海马mir-16表达水平的影响不存在主效应,且母爱剥夺应激与慢性温和应激对大鼠海马mir-16表达水平的影响不存在交互作用(P>0.05)。结论:1.母爱剥夺应激是大鼠在遭遇慢性温和应激后表现出抑郁样反应的易感因素,即与未经历过母爱剥夺应激的大鼠相比,经历过母爱剥夺应激的大鼠在其成年后经历慢性温和应激后表现出更明显的抑郁样行为。2.母爱剥夺应激、慢性温和应激可使大鼠海马microRNA let-7a的表达水平增加。母爱剥夺应激可增加大鼠对慢性温和应激的反应,即与未经历过母爱剥夺应激的大鼠相比,经历过母爱剥夺应激的大鼠在经历慢性温和应激后其海马中microRNA let-7a表达增加更明显。3.母爱剥夺应激可使大鼠海马mir-16表达水平增加。而慢性温和应激对大鼠海马microRNA mir-16表达水平影响不明显,且母爱剥夺应激未能明显地增加经历慢性温和应激的大鼠海马microRNA mir-16的表达水平。

全文目录


摘要  4-7
ABSTRACT  7-13
第一章 前言  13-17
第二章 材料和方法  17-24
  2.1 研究对象  17
    2.1.1 实验动物  17
    2.1.2 实验分组  17
    2.1.3 标本收集  17
  2.2 仪器与试剂  17-19
    2.2.1 实验仪器  17-18
    2.2.2 主要试剂  18
    2.2.3 其他常用试剂  18
    2.2.4 主要液体配置  18-19
  2.3 实验方法  19-24
    2.3.1 动物模型建立  19-20
    2.3.2 行为评定方法  20
    2.3.3 microRNA表达水平检测  20-22
    2.3.4 数据分析  22-24
第三章 结果  24-33
  3.1 行为学实验结果  24-29
    3.1.1 旷场实验  24-25
    3.1.2 强迫游泳实验  25
    3.1.3 糖水偏爱实验  25-29
  3.2 大鼠海马microRNA let-7amir-16表达水平检测结果  29-33
    3.2.1 扩增曲线和溶解曲线  29-30
    3.2.2 实时定量荧光PCR检测结果  30-33
第四章 讨论  33-38
  4.1 母爱剥夺和慢性温和应激对成年大鼠行为的影响  33-34
  4.2 母爱剥夺和慢性温和应激对成年大鼠海马microRNA let-7a、mir-16表达的影响  34-38
第五章 结论  38-39
参考文献  39-45
综述  45-51
  参考文献  49-51
致谢  51-52
在读期间发表文章参编著作与参研项目  52

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中图分类: > 哲学、宗教 > 心理学 > 应用心理学
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