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炎症、肿瘤与肥胖的相关基础及临床研究

作　者: 杨瑞雪
导　师: 马向华；沈捷
学　校: 南京医科大学
专　业: 内分泌与代谢性疾病
关键词: 肿瘤坏死因子-a TLR4 脂多糖人单核细胞系胃肠道肿瘤脂联素脂肪组织
分类号: R589.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：探讨TNF-α对人单核巨噬细胞细胞系THP-1的TLR4表达和功能的影响。方法：(1)使用不同浓度TNF-a (10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml)分别干预THP-1细胞(24小时),以流式技术检测细胞凋亡、标记细胞表面TLR4的表达情况,Real-time PT-PCR检测THP-1细胞TLR4 mRNA的表达(2)实验分组：TNF-a干预THP-1组、TNF-a+LPS干预组、LPS干预组、对照组(无干预因素组),上述各组干预以后,Western blot检测炎症信号通路NF-κB的变化,通过ELISA检测上清IL-6的含量、提取细胞总RNA, Real-time RT-PCR检测不同组细胞IL-6、TNF-a mRNA表达水平的变化。结果：(1)流式结果显示,TNF-a呈不同浓度依赖性降低THP-1细胞表面TLR4表达,其中50ng/ml以上达到平台期,且该抑制作用与凋亡无关,Real-time RT-PCR检测结果示,TNF-a浓度依赖性降低THP-1细胞表面TLR4mRNA的表达,其中50ng/ml以上达到峰值(P<0.05)。(2)Western blot检测结果示,LPS单独刺激THP-1组显著上调NF-κB蛋白水平,与之相比TNF-a预刺激THP-1后加入LPS刺激组,NF-κB蛋白水平显著下降(P<0.05)。信号通路下游炎症因子的表达：1,ELISA结果示：LPS组IL-6含量最高,TNF-a+LPS干预组较低(P<0.05)：空白对照组与TNF-a单独干预组IL-6含量无明显差异。2,Real-timePCR检测IL-6、TNF-a mRNA表达结果显示：LPS组IL-6、TNF-a mRNA表达显著高于TNF-a+LPS干预组(P<0.05)。结论：TNF-a可诱导THP-1细胞表面TLR4表达降低,并降低其对LPS的反应性。目的：脂联素由脂肪细胞分泌的内源性胰岛素敏感因子,不仅具有增加胰岛素敏感性,调节糖脂代谢的作用,而且最近研究发现其与肿瘤细胞的发生发展也有一定的相关性,本文通过分析胃肠道肿瘤患者腹内脂肪组织脂联素表达的变化,探讨其临床意义。方法：临床收集外科2008-2010年胃肠道肿瘤患者腹内脂肪39例,根据手术中病理切片结果分组,其中转移组21例,未转移组18例,非肿瘤对照组20例为：病理切片无肿瘤细胞,未服用降脂降糖药物,无严重肝肾疾病及影响内分泌代谢了性疾病的患者腹内脂肪20例；收取标本立即置于液氮中保存,提取脂肪组织中总RNA,逆转录为CDNA,采用Real-Time PCR技术检测脂联素的表达水平。结果：三组之间年龄、性别、一般生化指标无明显差异(p>0.05),胃肠道肿瘤组脂肪组织脂联素表达较对照组降低,差异有统计学意义(p<0.05),肿瘤转移组( 3.85±1.41)较未转移组(4.9±1.06)脂联素表达降低,但差异无统计学意义(p>0.05)。结论：脂肪组织脂联素表达降低与胃肠道肿瘤的发生有关,脂联素可能成为肿瘤治疗的新途径,具有重要的临床意义。

全文目录

英文缩写注释  5-7
引言  7-10
第一部分 TNF-a对人单核细胞系(THP-1)细胞表面TLR4表达及功能的影响  10-36
  中文摘要  10-11
  英文摘要  11-13
  前言  13-15
  材料和方法  15-26
  结果  26-34
  讨论  34-36
第二部分胃肠道肿瘤患者腹内脂肪脂联素的表达及其临床意义  36-49
  中文摘要  36-37
  英文摘要  37-38
  前言  38-39
  材料和方法  39-44
  结果  44-47
  讨论  47-49
全文小结  49-51
参考文献  51-56
综述  56-65
  参考文献  62-65
硕士期间发表论文情况  65-66
致谢  66

炎症、肿瘤与肥胖的相关基础及临床研究

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