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湖南省部分地区鸡蛔虫感染情况调查及rDNA ITS序列分析研究

作　者: 刘明洋
导　师: 刘毅
学　校: 湖南农业大学
专　业: 兽医
关键词: 鸡蛔虫调查核糖体DNA 内转录间隔区分子鉴定
分类号: S858.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 21次
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内容摘要

鸡蛔虫(Ascaridia galli)寄生于鸡、吐绶鸡、珍珠鸡及其它野禽的小肠,偶见于嗉囊、胃和食道。鸡蛔虫病分布于全世界和全国各地,在我国具有分布广、感染率高、感染强度较高等特点。因此,正确鉴别鸡蛔虫,不仅具有重要学术价值,而且对预防和控制该病也具有重要意义。本研究从2009-2010年对湖南湘西、湖南岳阳、湖南常德、湖南湘潭、湖南郴州五地农贸市场或者鸡场共采集鸡1200只。利用寄生虫学调查方法对湖南省鸡蛔虫感染情况进行调查。结果如下：1.本次调查共检查鸡1200只,其中378只感染鸡蛔虫,感染率为31.5%(378/1200)。2.经调查发现,湖南湘西、湖南常德、湖南岳阳、湖南湘潭、湖南郴州的鸡蛔虫感染率依次为：感染率40.0%、38.4%、25.5%、24.4%和24.0%。3.经调查发现,湖南湘西、湖南郴州、湖南常德、湖南岳阳、湖南湘潭的鸡蛔虫感染强度依次分别为：感染强度1-47、1-12、1-9、1-7、1-6。4.分子鉴定与形态学鉴定结果一致。核糖体DNA ITS基因片段核苷酸序列分析结果显示：鸡蛔虫ITS序列种内差异较小；种间差异较明显。由此结论可以得出,ITS基因的序列可以作为鸡蛔虫的遗传标记。此次调查从实践中获得了第一手关于湖南省鸡蛔虫感染调查资料,并通过对鸡蛔虫ITS基因的多态性研究,发现ITS基因可以作为鸡蛔虫有效的遗传标记,从而为湖南地区鸡蛔虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查研究奠定了基础。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-8
第一章文献综述  8-14
  1 鸡蛔虫病简介  8-10
    1.1 鸡蛔虫病  8
    1.2 鸡蛔虫感染地区分布  8-9
    1.3 鸡蛔虫病药物治疗  9-10
      1.3.1 药物的抗药性问题已经成为寄生虫病治疗的主要障碍之一  9
      1.3.2 抗寄生虫药物的措施  9-10
  2 PCR方法及其序列分析  10
    2.1 PCR方法  10
    2.2 DNA遗传序列分析  10
  3 研究中DNA序列的筛选  10-14
    3.1 内转录间隔区(ITS)  11-12
    3.2 线粒体DNA(MTDNA)  12-14
第二章湖南省鸡蛔虫感染情况调查  14-19
  1 材料与方法  14-16
    1.1 材料  14-15
      1.1.1 样品来源  14-15
      1.1.2 器材准备  15
      1.1.3 试剂  15
    1.2 方法  15-16
      1.2.1 样品采集  15
      1.2.2 虫体鉴定  15-16
  2 结果与分析  16-18
    2.1 调查结果  16-17
    2.2 形态观察  17-18
  3 讨论  18-19
    3.1 湖南省五个地区鸡蛔虫感染率  18
    3.2 乡村散养鸡与养殖场的鸡蛔虫感染差异分析  18-19
第三章鸡蛔虫RDNA ITS序列分析研究  19-30
  1 材料与方法  19-27
    1.1 材料  19-21
      1.1.1 虫体样品  19-20
      1.1.2 仪器设备  20
      1.1.3 酶类和试剂  20
      1.1.4 工程菌及载体  20
      1.1.5 缓冲液及其它溶液的制备  20-21
      1.1.6 培养基的制备  21
      1.1.7 其它试剂  21
    1.2 方法  21-27
      1.2.1 虫体DNA的抽提  21-22
      1.2.2 核糖体ITS片段的PCR扩增  22-27
  2 结果与分析  27-29
    2.1 PCR扩增结果  27
    2.2 测序结果及序列分析  27-29
      2.2.1 ITS基因序列系统发生树  28-29
  3 讨论  29-30
全文结论  30-31
参考文献  31-34
附录  34-35

湖南省部分地区鸡蛔虫感染情况调查及rDNA ITS序列分析研究

内容摘要

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