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复合生物制剂对淡色库蚊Culex pipiens pallens Coquillett 4龄幼虫的毒效研究

作　者: 孟美娇
导　师: 杨绍斌
学　校: 沈阳大学
专　业: 动物学
关键词: 淡色库蚊 复合生物制剂 大型真菌液体培养产物 植物乙醇提取物 微乳剂
分类号: R184
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


淡色库蚊Culex pipiens pallens Coquillett,能够传播班氏丝虫病和流行性乙型脑炎等多种疾病,危害人类健康,属于在我国北方城乡中的优势蚊种,而且对某些常用杀虫剂易产生抗药性,一直是防治中的重点。本文对大型真菌和杀虫植物进行筛选,将大型真菌液体培养产物提取物配合植物乙醇提取物制成复合生物制剂,研究结果如下:1、以毒杀效率在90%及以上为标准,对18科52种供试大型真菌的液体培养产物提取物进行杀虫试验和稳定性检测,筛选出了豹斑毒鹅膏菌Amanita pantherina (Dc.:Fr.)Schrmm和橙黄鹅膏菌Amanita citrina (Schaeff.) Pers. ex S.,两者的液体培养产物提取物对试虫的LC50分别为58.945mg/mL和59.726mg/mL;对14科32种供试植物的乙醇提取物进行杀虫活性试验和稳定性检测,筛选出了猪毛蒿Artemisia capillaris Thunb和辽细辛Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim.) Kitag.,两者的乙醇提取物对试虫的LC50分别为0.039mg/mL和0.026mg/mL。2、分别将筛选出的两种大型真菌液体培养产物提取物与两种植物乙醇提取物按照质量比为1000:1的比例进行混配,得到4种不同的组合,测试杀虫效率。计算出豹斑毒鹅膏菌Amanita pantherina (Dc.:Fr.)Schrmm液体培养产物提取物与辽细辛Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim.) Kitag.乙醇提取物的组合的LC50为27.91mg/mL,共毒系数为64.71,是毒力最强的一组,因此被选为复合生物制剂的原药。3、利用“超声转相乳化法”将原药制成剂型,得到复合生物制剂——微乳剂,并且符合微乳剂的一系列相关的质量指标。配方:20.02%原药:豹斑毒鹅膏菌Amanita pandering (Dc.:Fr.)Schrmm液体培养产物提取物:辽细辛Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim.) Kitag.乙醇提取物=1000:1;0.14%乳化剂:农乳500#:农乳600#=5:7;0.01%共乳化剂:异戊醇;0.025%分散剂:SDS:木质素磺酸钠=1:1;7%防冻剂:甘油:氯化钠饱和液=7:3;0.1%消泡剂:30%有机硅消泡剂T-210;0.1%抗微生物剂:山梨酸钾;水:脱氯自来水。在转相前以小于临界速度的速度加入水相至水相体积大于总体积的74%,待完成转相后可以任一速度加入水相直至完成体系的100%总体积。本文的试点为加工50mL体系,其临界速度为0.5mL/s。该微乳剂对淡色库蚊Culex pipiens pallens Coquillett 4龄幼虫的LC50为139g/L。对斑马鱼的96hLC50为4520mg/L,属于低毒。4、该制剂对淡色库蚊4龄幼虫的作用方式包括触杀和熏蒸。5、该微乳剂应放入不透光的密封良好的白色塑料瓶内,于-2℃~28℃条件下避光储存,且在储存与运输时尽量不要使其产生过多的泡沫。在使用时,要保证局部环境的药液浓度不得低于139g/L,不宜在雨天和阳光直射强度较大时使用。避免该制剂与眼睛、鼻腔、口腔、呼吸道和皮肤直接接触,若不慎接触则立即用清水清洗,必要时立即就医。本研究的创新之处在于将大型真菌的次生代谢产物应用在对淡色库蚊的防治上,而且与杀虫植物的乙醇提取物进行混配,通过超声波来提供高强度的剪切力,利用“超声转相乳化法”加强乳化效应,将原药制成现阶段国内外较为新颖的微乳剂。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-14
1 绪论  14-30
  1.1 淡色库蚊  14-19
    1.1.1 淡色库蚊简介  14-15
    1.1.2 淡色库蚊的生物学习性  15-16
    1.1.3 淡色库蚊的生态习性  16-17
    1.1.4 淡色库蚊的生理习性  17
    1.1.5 淡色库蚊的危害  17-18
    1.1.6 淡色库蚊的国内外研究进展  18-19
  1.2 大型真菌  19-23
    1.2.1 大型真菌杀虫活性的国内外研究进展  19-21
    1.2.2 大型真菌杀虫剂的开发利用  21-22
    1.2.3 大型真菌杀虫剂在研究中所存在的问题  22-23
  1.3 杀虫植物  23-28
    1.3.1 植物源杀虫剂的国内外研究概况  23-27
    1.3.2 辽宁省杀虫植物资源  27-28
    1.3.3 植物源杀虫剂在研究中所存在的问题  28
  1.4 本研究的目的意义  28-29
  1.5 本研究的创新点  29-30
2 试验材料与方法  30-52
  2.1 试验材料  30-31
    2.1.1 供试昆虫  30
    2.1.2 供试大型真菌  30
    2.1.3 供试植物  30
    2.1.4 试验试剂  30-31
    2.1.5 试验仪器  31
  2.2 试验方法  31-49
    2.2.1 淡色库蚊幼虫的引种及饲养  31
    2.2.2 大型真菌的采集、鉴定、及固体菌管的制作与保藏  31-32
    2.2.3 大型真菌的液体培养及培养产物提取物的杀虫活性试验  32-33
    2.2.4 植物的采集与鉴定  33
    2.2.5 植物活性成分的提取及提取物的杀虫活性试验  33-34
    2.2.6 大型真菌液体培养产物提取物与植物乙醇提取物对淡色库蚊4 龄幼虫的LC_(50)的测定  34-35
    2.2.7 大型真菌液体培养产物提取物和植物乙醇提取物的稳定性试验  35
    2.2.8 大型真菌液体培养产物提取物与植物乙醇提取物的混配  35-36
    2.2.9 复合生物制剂的初步研制  36-48
    2.2.10 复合生物制剂的生物活性检测  48
    2.2.11 复合生物制剂的安全性检测  48-49
  2.3 数据处理  49-52
    2.3.1 试虫死亡率与校正死亡率的计算方法  49-50
    2.3.2 LC_(50)及毒力回归方程的的计算方法  50
    2.3.3 共毒系数的计算方法  50-51
    2.3.4 急性毒性试验的安全质量浓度的计算方法  51-52
3 结果与分析  52-114
  3.1 淡色库蚊幼虫的饲养结果  52
  3.2 大型真菌的采集、鉴定、固体菌管的制作与保藏以及液体培养结果  52-57
  3.3 大型真菌液体培养产物提取物的杀虫活性试验结果及其筛选  57-65
  3.4 植物的采集与鉴定结果  65-68
  3.5 植物乙醇提取物的杀虫活性试验结果及其筛选  68-74
  3.6 大型真菌液体培养产物提取物与植物乙醇提取物对淡色库蚊4 龄幼虫LC_(50)的测定结果  74-80
    3.6.1 大型真菌液体培养产物提取物对试虫LC_(50)的测定结果  74-77
    3.6.2 8钟植物乙醇提取物对试虫LC_(50)的测定结果  77-80
  3.7 大型有毒真菌液体培养产物提取物和植物乙醇提取物的杀虫活性稳定性的试验结果  80-96
    3.7.1 大型真菌液体培养产物提取物的杀虫活性稳定性试验的结果  80-87
    3.7.2 植物乙醇提取物的杀虫活性稳定性试验的结果  87-96
  3.8 大型真菌液体培养产物提取物与植物乙醇提取物的混配结果  96-99
  3.9 复合生物制剂剂型的初步研究结果  99-110
    3.9.1 原药的HLB 值的粗略测定结果及原药溶解度的测定结果  99
    3.9.2 乳化剂的选择结果  99-102
    3.9.3 分散剂的选择结果  102-104
    3.9.4 防冻剂的选择结果  104-106
    3.9.5 消泡剂的选择结果  106-107
    3.9.6 抗微生物剂的选择结果  107
    3.9.7 微乳剂加工工艺的结果  107-109
    3.9.8 微乳剂相关性能的检测结果  109-110
  3.10 复合生物制剂的生物活性检测结果  110-111
  3.11 复合生物制剂的安全性检测结果  111-114
    3.11.1 预试验结果  111
    3.11.2 正式试验结果  111-114
4 讨论  114-118
  4.1 大型真菌及其液体培养  114
  4.2 杀虫植物及其乙醇提取物  114-115
  4.3 复合生物制剂对淡色库蚊幼虫的作用方式  115-116
  4.4 关于原药的混配及混配后的复合生物制剂的杀虫效应  116
  4.5 关于原药的剂型加工  116-117
  4.6 关于复合生物制剂的安全性检测  117
  4.7 关于复合生物制剂的储存和运输条件以及正确的使用方法  117-118
5 结论  118-120
  5.1 筛选出2 种高效杀蚊幼大型真菌  118
  5.2 筛选出2 种高效杀蚊幼植物  118
  5.3 筛选出1 种对淡色库蚊幼虫具有毒杀活性的复合生物制剂原药配方  118-119
  5.4 筛选出1 种对淡色库蚊幼虫具有高效毒杀作用的水基型复合生物制剂  119-120
参考文献  120-126
在学期间研究成果  126-127
致谢  127-128

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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 流行病学与防疫 > 防疫措施和管理
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