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番茄黄化卷叶病的抗病性鉴定及其与番茄叶片结构相关性的研究

作　者: 付蓉蓉
导　师: 陈火英；刘杨
学　校: 上海交通大学
专　业: 园艺学
关键词: 番茄 番茄黄化卷叶病 鉴定方法 叶片结构 抗性基因
分类号: S436.412
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


番茄黄化卷叶病(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)是世界范围内流行的一种毁灭性的病毒病,已成为世界番茄生产的限制性因素。近年来番茄黄化卷叶病在我国有逐年加重,自南向北迅速蔓延的趋势,已对中国番茄种植业造成了极其严重的损失。抗病育种一直以来被认为是解决病害问题最有效、最直接的方法。因此,本试验以番茄黄化卷叶病的10种抗病材料和2种感病材料为试验材料,鉴定番茄黄化卷叶病毒;采用石蜡切片及电镜扫描的方法研究番茄黄化卷叶病毒与番茄叶片结构的相关性;对材料的抗性基因进行了分子鉴定,并通过田间自然发病的方法对鉴定结果进行验证,为我国的番茄黄化卷叶病抗病育种工作提供了理论基础。研究内容及结果如下:1.比较GenBank中已报道的番茄黄化卷叶病毒的DNA序列,并根据其保守序列使用DNASTAR软件设计一对引物,在疑似感染番茄黄化卷叶病毒的番茄植株中PCR扩增得到一条800bp的特异带,通过克隆测序并在GenBank上比对,建立了番茄黄化卷叶病毒的鉴定方法,并证实了感染试验所用番茄材料的病毒为番茄黄化卷叶病毒。2.根据番茄的生长情况,以及番茄黄化卷叶病的流行情况,采取叶片制作石蜡切片并进行电镜扫描。结果表明:叶片细胞排列结构对番茄黄化卷叶病的抗性并无影响,而番茄黄化卷叶病毒对叶片细胞排列结构的影响却较大;叶片表面结构对番茄黄化卷叶病抗性的影响较大,而且番茄黄化卷叶病抗性对叶片表面结构也有影响。3.采用PCR方法对番茄黄化卷叶病抗病材料及感病材料的抗性基因Ty-1,Ty-2和Ty-3进行鉴定,并通过田间自然发病的方法对这些材料的抗性进行验证。试验结果表明:PCR方法可迅速,准确地鉴定番茄黄化卷叶病抗性,且同时含有纯合Ty-1和Ty-3抗性基因的番茄材料有更高更稳定的抗性;番茄黄化卷叶病的Ty-1和Ty-3抗性基因为不完全显性遗传。所以在番茄黄化卷叶病抗病育种中,可用PCR方法快速筛选抗源,将多种抗病基因聚合在一个品种中,以培育对番茄黄化卷叶病具有更高更稳定抗性的番茄品种。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-11
第一章 文献综述  11-26
  1.1 引言  11-12
  1.2 番茄黄化卷叶病毒的结构，分类及检测  12-17
    1.2.1 TYLCV 的基因组结构  12-13
    1.2.2 TYLCV 的分类  13-14
    1.2.3 TYLCV 的检测  14-17
  1.3 番茄黄化卷叶病的症状及鉴定  17-20
    1.3.1 TYLCD 的症状  17-18
    1.3.2 TYLCD 的抗病性鉴定  18-20
  1.4 番茄黄化卷叶病的抗性种质资源及研究进展  20-24
    1.4.1 醋栗番茄  21-22
    1.4.2 秘鲁番茄  22
    1.4.3 智利番茄  22-23
    1.4.4 多毛番茄  23-24
    1.4.5 契斯曼尼番茄  24
  1.5 展望  24-26
第二章 番茄黄化卷叶病毒的分子鉴定及其序列分析  26-34
  2.1 材料与方法  26-29
    2.1.1 试验材料  26-27
    2.1.2 试验方法  27-29
  2.2 结果与分析  29-32
    2.2.1 田间症状  29-30
    2.2.2 PCR 扩增结果  30-31
    2.2.3 扩增目的片段测序结果  31
    2.2.4 序列分析  31-32
  2.3 讨论  32-33
    2.3.1 番茄叶片DNA 的提取  32-33
    2.3.2 TYLCV 的PCR 检测  33
  2.4 本章小结  33-34
第三章 番茄叶片结构与番茄黄化卷叶病的相关性研究  34-44
  3.1 材料与方法  34-36
    3.1.1 试验材料  34-35
    3.1.2 试验方法  35-36
  3.2 结果与分析  36-41
    3.2.1 叶片细胞排列结构与番茄黄化卷叶病抗性的相互影响  36-39
    3.2.2 叶片表皮结构与番茄黄化卷叶病抗性的相互影响  39-41
  3.3 讨论  41-42
    3.3.1 叶片细胞排列结构的观察  41-42
    3.3.2 叶片表皮结构的观察  42
  3.4 本章小结  42-44
第四章 番茄黄化卷叶病Ty-1 和Ty-3 抗性基因的PCR 鉴定  44-52
  4.1 材料与方法  44-47
    4.1.1 试验材料  44-45
    4.1.2 试验方法  45-47
  4.2 结果与分析  47-50
    4.2.1 Ty-1 抗性基因检测结果  47-48
    4.2.2 Ty-2 抗性基因检测结果  48
    4.2.3 Ty-3 抗性基因检测结果  48-49
    4.2.4 大田验证结果  49-50
  4.3 讨论  50-51
    4.3.1 TYLCD 抗性的分子标记鉴定  50
    4.3.2TYLCD 抗性遗传规律  50-51
  4.4 本章小结  51-52
全文结论  52-53
参考文献  53-61
附录  61-62
致谢  62-63
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文  63

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 园艺作物病虫害及其防治 > 蔬菜病虫害 > 茄果类病虫害 > 番茄病虫害
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