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β2肾上腺素受体激动剂克仑特罗对PC12细胞的损伤作用及其机制研究

作 者: 朱冰艳
导 师: 向继洲
学 校: 华中科技大学
专 业: 药理学
关键词: 克仑特罗 PC12细胞 阿尔茨海默病 凋亡 NO iNOS ERK1/2
分类号: R96
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 14次
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内容摘要


目的:采用PC12细胞观察克仑特罗对其损伤作用。方法:采用MTT比色法检测细胞存活率;LDH法检测培养液上清LDH漏出量;Hoechst33342荧光染色法观察凋亡细胞形态学改变。结果:(1)β2-AR激动剂克仑特罗对PC12细胞的生长具有明显的抑制效应,该作用可被特异性β2-AR阻断剂ICI 118551所阻断;(2)克仑特罗可升高PC12细胞培养液上清LDH水平, ICI 118551对其具有抑制作用;(3)Hoechst33342荧光染色法显示克仑特罗可诱导PC12细胞凋亡,ICI 118551可减轻克仑特罗诱导细胞凋亡的作用。结论:克仑特罗可通过激动β2-AR对PC12细胞具有损伤作用。目的:探讨NO信号转导通路在克仑特罗对PC12细胞损伤中的作用。方法:MTT比色法检测经NO阻断剂L-NAME处理后的细胞存活率;LDH试剂盒检测其上清LDH漏出量;NO试剂盒检测其NO释放量;AnnexinV-PI双染色观察其形态学改变;Western Blot检测Caspase-3、iNOS蛋白的表达。结果:(1)克仑特罗可促进PC12细胞NO合成,伴有iNOS表达水平增加,该作用可被一氧化氮合酶抑制剂L-NAME阻断;(2)L-NAME对克仑特罗降低细胞存活率及促细胞凋亡具有抑制作用。结论:NO信号途径可能参与克仑特罗对PC12细胞的损伤作用。目的:探讨ERK1/2信号通路在克仑特罗对PC12细胞损伤中的作用。方法:MTT比色法检测细胞存活率;Western Blot检测PC12细胞ERK磷酸化和Caspase-3蛋白表达水平。结果:(1)克仑特罗可促进ERK1/2去磷酸化,给予MAPK激酶MEK1特异性抑制剂PD98059可加强其去磷酸化作用;(2)PD98059对克仑特罗降低细胞生存率以及促进凋亡相关基因Caspase -3蛋白表达具有协同作用。结论ERK1/2参与克仑特罗对PC12细胞损的伤作用。

全文目录


缩写词  5-6
前言  6-8
摘要  8-11
Abstract  11-12
第一部分 β_2肾上腺素受体激动剂克仑特罗PC12细胞的损伤作用  12-20
  材料与方法  12-16
  统计学处理  16
  结果  16-18
  讨论  18-20
第二部分 NO 信号通路在克仑特罗致PC12 细胞损伤中的作用  20-34
  材料与方法  20-26
  统计学处理  26
  结果  26-31
  讨论  31-34
第三部分 MAPK 信号通路在克仑特罗致 PC12细胞损伤中的作用  34-41
  材料与方法  34-36
  统计学处理  36
  结果  36-40
  讨论  40-41
全文总结  41-42
参考文献  42-44
综述  44-53
  参考文献  48-53
致谢  53

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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