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SIBLING蛋白在牙及牙周组织中的分布及意义研究

作　者: 王渝
导　师: 孙宏晨
学　校: 吉林大学
专　业: 口腔医学
关键词: 小整合素结合配体N端联结糖蛋白牙本质基质蛋白1 牙本质涎磷蛋白牙本质涎蛋白骨桥蛋白骨涎蛋白牙及牙周组织免疫组织化学染色
分类号: R780.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

骨和牙本质细胞外基质(ECM)均含有胶原和非胶原蛋白(noncollagenous proteins,NCPs)。小整合素结合配体N连接的糖蛋白(small integrin-binding ligand,n-linked glycoprotein family,SIBLING),是NCPS的一类。其成员包括:牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP 1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、骨涎蛋白(bone sialoprotein, BSP)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、基质细胞外磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)。这五种蛋白的生物学特性主要是在骨组织形成和牙齿发育过程中起着重要的发育调控作用。DMP 1在蛋白水解酶的作用下水解为两个具有活性的功能片段:57kDa (C-DMP1)和37kDa (N-DMP1)。C-DMP1和N-DMP1蛋白片段不仅组织的属性和蛋白结构不同,而且在细胞和组织中分布部位也不相同, C-DMP1蛋白主要在矿化的牙本质中存在表达,而N-DMP1蛋白表达主要位于非矿化的前期牙本质。因此提示C-DMP1和N-DMP1蛋白可能具有不同的生物学作用。牙本质涎磷蛋白(DSPP),经过类似于DMP1的蛋白水解活化过程后形成牙本质涎蛋白(DSP)和牙本质磷蛋白(DPP)。骨涎蛋白(BSP)是一种磷酸化硫化糖蛋白,在成熟的骨细胞中表达,而未成熟的前体细胞不表达,蛋白特异性分布于矿化组织,是成骨细胞分化的标志。骨桥蛋白(OPN)是一种分泌型磷酸化糖蛋白,体内外研究均表明OPN可以有效抑制羟基磷灰石晶体的合成和生长,在牙骨质和牙本质形成过程中具有抑制和调节矿化的作用。一直以来,学者对于SIBLING蛋白的研究主要集中在大鼠等动物的牙齿发育及功能,而对于SIBLING蛋白在人牙及牙周组织的分布情况和意义尚无研究报道。因此,我们设计了本实验,利用SIBLING蛋白家族成员中抗C-DMP1、N-DMP1、DSP、BSP、OPN蛋白的五种特异性抗体,通过免疫组化技术,研究C-DMP1、N-DMP1、DSP、BSP、OPN五种蛋白在人牙及牙周组织中的表达情况,并探讨他们的表达意义。本实验对象选取30例吉林大学口腔医学院颌面外科颌骨恶性肿瘤切除的牙及牙周组织标本,制作牙及牙周组织联合切片。采用PV二步免疫组化的方法进行上述五种抗体的免疫组织化学染色。染色后观察C-DMP1、N-DMP1、DSP、BSP、OPN蛋白的五种抗体在人牙及牙周组织中的表达部位及探讨这五种抗体分布的意义。对实验结果讨论分析后得到以下的结论:一、DMP1蛋白的不同活化形式(N-DMP1和C-DMP1)在人牙及牙周组织中分布位置不同,进一步证实了N-DMP1和C-DMP1在组织矿化过程中具有不同的生物学特性;二、DMP1和DSPP在人牙齿发育过程和形成维持过程中起到协同和互补的作用。三BSP、OPN在人牙及牙周组织中不同部位表达程度不同,可能均参与基质的矿化,并具有不同的作用。

全文目录

内容提要  4-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-12
英文缩写词表  12-13
第1章 SIBLING 蛋白综述  13-19
  1.1 牙本质基质蛋白1（DENTIN MATRIX PROTEIN1, DMP1）  14-15
    1.1.1 牙本质基质蛋白1 在组织中的分布  14
    1.1.2 牙本质基质蛋白-1 的生物学功能  14-15
    1.1.3 牙本质基质蛋白-1 的调控作用  15
  1.2 牙本质涎磷蛋白（DENTIN SIALOPHOSPROTEIN，DSPP）  15-16
    1.2.1 牙本质涎磷蛋白在组织中的分布  15-16
    1.2.2 牙本质涎磷蛋白的生物学功能  16
  1.3 骨涎蛋白（BONE SIALOPROTEIN，BSP）  16-17
    1.3.1 骨涎蛋白在组织中的分布  16-17
    1.3.2 骨涎蛋白的生物学功能  17
  1.4 骨桥蛋白（OSTEOPONTIN,OPN）  17-19
第2章实验材料与方法  19-22
  2.1 主要仪器及试剂  19
  2.2 组织化学及免疫组化试剂  19
  2.3 组织标本及固定  19
  2.4 制作切片的方法  19-21
  2.5 染色方法  21
  2.6 显微镜观察及结果判定  21-22
第3章结果  22-29
  3.1 C-DMP1  22
  3.2 N-DMP1  22
  3.3 OPN  22-23
  3.4 BSP  23
  3.5 DSP  23-29
第4章讨论  29-32
第5章结论  32-33
参考文献  33-38
导师及作者简介  38-39
致谢  39

SIBLING蛋白在牙及牙周组织中的分布及意义研究

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