学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

酶法合成西汀类手性中间体及其最佳反应参数的研究

作 者: 童凌斐
导 师: 罗智
学 校: 华中科技大学
专 业: 药物化学
关键词: 不对称生物还原 贝克酵母 3-氯代苯丙酮 正交实验 直观分析法 方差分析法
分类号: R914
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 5次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
 

内容摘要


目的:在无氧环境下,以高活性贝克酵母细胞体内氧化还原酶生物还原3-氯代苯丙酮,通过改进反应条件和分离提纯的方法,最终得到单一异构体(S)-(-)-3-氯-1-苯基-1-丙醇。在保持最佳对映体过量值(ee值)的前提下,选择温度、pH、反应时间、底物投量、酵母投量、共底物类别、D-葡萄糖投量七个因素利用正交实验表通过32组实验和直观分析法分析评价得到酶促反应的最佳反应参数,以获得更高的产率。同时通过专业统计分析软件对正交实验实验数据采用方差分析法评价分析获得最大影响因子。方法:在无氧环境下,首先以3-氯代苯丙酮为原料和乙醇作为反应共底物,在恒温且能恒速搅拌的装置(可用水浴锅或摇床)里,通过一定时间的贝克酵母细胞的高温活化过程和一定时间的不对称生物还原反应,再通过硅藻土的助滤等后处理,最后分离提纯得到单一异构体(S)-(-)-3-氯-1-苯基-1-丙醇。通过IR、1H-NMR、13C-NMR对反应产物进行鉴定,通过熔点仪和旋光仪测得其熔点和比旋光度。再通过专业设计好的7因数4水平的正交实验表从温度、pH、反应时间、底物投量、酵母投量、共底物类别、葡萄糖投量来研究这步酶促反应的最佳反应参数和最大影响因子。通过数理统计中的直观分析法,在保持最佳对映体过量值的前提下以产率大小作为考核指标得到最佳反应参数,通过统计分析软件SPSS16.0版本对所得的正交实验的32组实验数据进行方差分析法评析得到最大影响因子。结果:通过第一部分的酶促反应得到(S)-(-)-3-氯-1-苯基-1-丙醇,产率为60%。经过IR、1H-NMR、13C-NMR确证了目标化合物的分子结构,与参考文献的标准图谱值一致。[a]D25-23.8o(c 1,CHCl3),ee值为100%,测得目标产物的熔点mp为58℃-60℃。通过直观分析法得到最佳反应参数:温度为23℃、pH为6.5、反应时间最低为63小时、底物投量为0.5g、酵母投量为25g、共底物为乙醇且投量为5ml、葡萄糖投量为15g(在体积为125ml的缓冲液里)。经过验证实验可得其产量为0.36g,产率为72%,在正交实验组中最高,通过IR、1H-NMR结构验证符合文献,ee值为100%。通过SPSS16.0统计软件用方差分析法得到底物与共底物对酶促反应的影响具有统计学意义(仅当P<0.05),也就是最大影响因子。而且8个因素之间完全没有相互影响,便于单一因素的调控。结论:与之前类似文献相比,改进了酶促反应条件,提高了分离提纯的效率和产率,得到了酶法合成(S)-(-)-3-氯-1-苯基-1-丙醇的最佳反应参数。反应产物中只有目标产物,且得到对贝克酵母完整细胞体内酶促反应反应的最大影响因子,为放大化实验奠定理论基础。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-12
第一部分 贝克酵母细胞还原3-氯代苯丙酮的研究  12-22
  1 酶法合成的方法设计  12-16
  2 实验仪器和试剂  16-17
  3 实验方法  17-19
  4 实验结果  19
  5 实验讨论  19-22
第二部分 3-氯代苯丙酮的最佳酶促反应参数的研究  22-41
  1 实验参数及其各水平的选定  22-27
  2 实验仪器与试剂  27
  3 统计分析  27-28
  4 实验方法与操作  28-34
  5 酶促反应的正交实验分析  34-38
  6 实验结果  38
  7 讨论  38-41
参考文献  41-47
综述  47-58
  参考文献  54-58
致谢  58-59
附录 图表  59-65

相似论文

  1. 煤制液体燃料过程中可弃型催化剂的设计与实验研究,TQ529.1
  2. 三种中药浸膏微波真空干燥工艺优化及降解动力学研究,TQ461
  3. 熔融酯交换法制备双酚A型聚碳酸酯的研究,TQ323.41
  4. 造纸污泥的生物干化试验研究,X793
  5. 黄精多糖提取工艺及黄精酸豆奶研制,TQ461
  6. 生物活性肽胶囊的分析及应用研究,R927.2
  7. 黑龙江杜尔伯特重度盐碱化草地改良技术研究,S156.4
  8. 基于神经网络的注塑制品翘曲优化研究,TQ320.66
  9. 波动水压对灌水器水力性能影响的实验研究,S277.95
  10. 40Cr钢固体渗硼研究,TG156.87
  11. 阜新矿区矿井水混凝及过滤优化研究,X703
  12. 优选高效脱氮功能菌株及复合脱氮菌群构建研究,X703
  13. 腰果分级技术研究,TS255.6
  14. 开水煲外壳零件的数值模拟与优化设计,TG386
  15. 光学玻璃切削过程中金刚石刀具磨损规律的实验研究,TG711
  16. 碱溶性羟乙基纤维素双螺杆湿法纺丝工艺的研究,TQ340.6
  17. 电沉积Ni-W合金镀层的制备、结构及其性能研究,TQ153.2
  18. MnZn软磁铁氧体材料的制备,TM277
  19. 摩托车汽油机高能点火系统参数优化及设计,U483
  20. 城市污水厂污泥营养土堆制参数优化,X703

中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药物基础科学 > 药物化学
© 2012 www.xueweilunwen.com