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急性药物性内耳损伤中CaV1.3钙通道及三种细胞凋亡因子的检测及变化

作 者: 李志勇
导 师: 褚汉启
学 校: 华中科技大学
专 业: 耳鼻咽喉头颈外科学
关键词: C57BL/6J小鼠 氨基糖甙类抗生素 CaV1.3 细胞凋亡
分类号: R764
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 2次
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内容摘要


目的研究卡那霉素和速尿诱导的耳毒性发生后CaV1.3钙离子通道蛋白在内耳含量的改变,以及三种细胞凋亡因子cyt-c、caspase-3、p53在内耳中的表达改变,并分析其与卡那霉素联合速尿快速诱导耳蜗损伤导致细胞凋亡之间的关系。方法选取4周龄C75BL/6J小鼠为实验对象,将小鼠随机分为实验组和对照组,实验组采用硫酸卡那霉素颈部皮下注射(1g/kg),30分钟后速尿腹腔注射(0.4g/kg);对照组给与等量生理盐水。在注射药物前以ABR检查小鼠听觉功能,注射1周后再检测ABR反应阈值。应用RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)检测CaV1.3 mRNA在实验组和对照组中的表达水平。采用免疫组织化学方法确定cyt-c、caspase-3、p53蛋白在耳蜗内的定位,并比较其在实验组和对照组之间的差别。结果给药后实验组ABR的反应阈值较对照组明显上升,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.001)。实验组CaV1.3 mRNA的表达量较对照组有所减少。免疫组织化学检测发现CaV1.3钙通道蛋白主要分布在血管纹、螺旋韧带、螺旋凸、毛细胞等处,在耳毒性发生后,其表达明显减弱。cyt-c、caspase-3、p53主要分布在血管纹、螺旋韧带、螺旋凸、毛细胞等部位,在实验组小鼠的耳蜗其表达较对照组的表达显著增强。结论应用卡那霉素联合速尿序贯注射能引起小鼠的急性耳蜗损伤和听力的减退。这种药物引起的耳毒性与内耳CaV1.3钙离子通道蛋白的损害呈现相关性,并且与内耳毛细胞、血管纹、螺旋神经元的凋亡有关。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
1、绪言  7-8
2、实验材料  8-11
3、实验方法  11-24
4、实验结果  24-29
5、讨论  29-33
6、参考文献  33-35
综述  35-41
  参考文献  38-41
附录 主要缩略词一览表  41-42
致谢  42-43

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中图分类: > 医药、卫生 > 耳鼻咽喉科学 > 耳科学、耳疾病
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