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微小RNA-223及其标靶基因c-myc在肝癌发病中的作用

作　者: 赵文月
导　师: 叶进
学　校: 华中科技大学
专　业: 内科学
关键词: 癌肝细胞基因 C-myc 微小RNA-223
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的探讨微小RNA-223(miR-223)对原癌基因c-myc的调控作用及miR-223-c-myc信号通路在肝癌发病中的作用。方法1.通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常肝脏组织、癌旁、肝癌组织、胎肝细胞L02及肝癌细胞Hep G2中miR-223和c-myc mRNA的表达水平;2.利用Western blot检测上述组织及细胞中c-myc的蛋白质表达水平;3.构建miR-223模拟物(mimics)转染肝癌细胞Hep G2并上调细胞中miR-223表达后,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测Hep G2中c-myc表达水平变化。结果1. miR-223在正常肝组织、癌旁组织及肝癌中表达下调(相对表达量分别为0.055±0.015、0.030±0.008和0.020±0.016,下调分别为30.77%和61.53%);2.相对于胎肝细胞L02,在肝癌细胞Hep G2中miR-223表达下调(相对表达量分别为0.011±0.006和0.005±0.003,P <0.05); 3. c-myc的mRNA在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织相对表达量分别为0.029±0.023、0.136±0.071和0.425±0.026),肝癌组织高于正常肝组织(t=-0.317, P<0.05); c-myc蛋白相对表达量分别为0.137±0.015、0.299±0.033和0.439±0.027),差异有统计学意义(F=103.35, P<0.05),提示miR-223的表达量与c-myc表达量呈负相关趋势;4.通过miR-223 mimics转染Hep G2细胞后,c-myc mRNA在空白组、转染组和阴性组表达无明显差异(相对表达量分别为0.031±0.009、0.032±0.007和0.056±0.029,P>0.05),而c-myc蛋白表达下调(0.423±0.041、0.116±0.015和0.432±0.034,P<0.05)。结论在肝癌组织和细胞中miR-223表达量较正常肝组织和细胞降低,提示异常表达的miR-223参与了肝癌的发生; miR-223通过上调原癌基因c-myc的表达与致癌活性参与肝癌发生的调控;上调肝癌细胞中miR-223的表达可以降低c-myc基因的表达和生物活性,提示miR-223参与了c-myc通路的致癌机制。miR-223在肝癌中表达下调,其丧失对c-myc表达抑制导致c-myc异常高表达可能是肝癌发生的重要机制。提示上调miR-223表达可能成为一种有潜在价值肝癌预防和治疗方法。

全文目录

研究背景  5-6
摘要  6-8
Abstract  8-10
背景  10
材料与方法  10-14
结果  14-18
讨论  18-20
参考文献  20-25
综述  25-34
  参考文献  29-34
缩略词表  34-35
致谢  35-36

微小RNA-223及其标靶基因c-myc在肝癌发病中的作用

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