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大肠癌细胞MLH1基因甲基化发生机制研究

作 者: 樊婧
导 师: 陈会平
学 校: 华中科技大学
专 业: 医学遗传学
关键词: 大肠癌 MLH1基因 甲基化 启动子 Alu序列
分类号: R735.34
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 16次
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内容摘要


目的:通过对大肠癌细胞系及正常组织进行实验,我们分析了其MLH1基因内从启动子到第一内含子区域(含启动子、第一外显子及第一内含子中的Alu序列)甲基化的具体情况,并进一步分析其产生的可能原因,为进一步的实验提供依据。方法:选择RKO、SW48两个大肠癌细胞系作为实验样本,正常的大肠组织和人外周血液样本作为实验对照。提取DNA后重亚硫酸亚处理并进行BSP( Bisulfate-sequencing PCR ,亚硫酸氢盐修饰后测序法PCR )和MSP(Methylation-specific PCR,甲基化特异性PCR)。将PCR产物或者克隆产物测序,对测序结果进行分析比较。结果:大肠癌细胞系启动子区域的甲基化程度很高,而正常对照组织在此区域是非甲基化的;大肠癌细胞系第一内含子内Alu序列的甲基化程度相较于正常组织有所降低;位于启动子与内含子之间的区域里,大肠癌细胞系发生较高程度的甲基化,而正常组织是非甲基化的,且只局限在临近第一个Alu序列的几个CpG位点有甲基化发生。结论:大肠癌细胞系启动子区域的高度甲基化可能是由其Alu序列传递过来的。

全文目录


中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
第1章 前言  8-10
第2章 对象与方法  10-24
第3章 结果  24-29
第4章 讨论  29-32
第5章 结论  32-33
参考文献  33-35
综述  35-48
  参考文献  46-48
致谢  48

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤 > 大肠肿瘤
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