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Tf-SPIONs用于大鼠脑胶质瘤MRI成像的研究

作 者: 蒋玮丽
导 师: 徐海波
学 校: 华中科技大学
专 业: 影像医学与核医学
关键词: 脑胶质瘤 磁共振成像 转铁蛋白 超顺磁性氧化铁纳米粒
分类号: R739.4
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 3次
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内容摘要


目的:将Tf作为脑胶质瘤的靶向配体,与SPIONs成像能力相结合,通过对大鼠C6脑胶质瘤的体外和体内两方面检测及MRI成像,探讨偶联转铁蛋白的超顺磁性氧化铁纳米粒(Tf-SPIONs)是否对其具有特异性靶向标记成像的特性。方法:(1)通过傅里叶变换红外光谱(FT-IR)检测Tf与SPIONs是否偶联成功。采用透射电子显微镜(TEM)观察Tf-SPIONs和SPIONs的形貌与粒径。使用3.0T磁共振仪对浓度范围为1-20μg/ml的Tf-SPIONs和SPIONs进行T2加权序列扫描并分别测量计算其弛豫率r2值。(2)将浓度依次为0,5,10,15和20ug/ml的Tf-SPIONs和SPIONs分别与C6胶质瘤细胞共培养后,行T2加权序列扫描并分别测量其T2WI信号强度值SI,比较二者信号变化强度。同时测定不同浓度的两样品细胞内铁含量。将20μg/mL的Tf-SPIONs和SPIONs分别与C6胶质瘤细胞共孵育后行普鲁士蓝染色,观察两组样品普鲁士蓝染色阳性细胞百分比。(3)通过脑立体定位注射C6胶质瘤细胞的方法建立大鼠脑胶质瘤模型,经尾静脉注射Tf-SPIONs和SPIONs比较二者对于脑胶质瘤的成像效果。种植14天左右,采用3.0T磁共振仪对上述荷瘤大鼠先行T2加权、T1加权及SWI序列扫描,然后经尾静脉注射Gd-DTPA后重复T1加权序列扫描。隔日分别经尾静脉注射Tf-SPIONs和SPIONs,经过2小时、24小时、48小时重复上述T2WI、SWI扫描,观察肿瘤部位信号的变化。最后肿瘤标本切片行HE和普鲁士蓝染色,作为病理学和生化对照。(4)本实验数据资料用(χ|-)±s表示,运用SPSS16.0软件,对上述实验数据行独立样本t检验, p<0.05表示差异具有统计学意义。结果:①傅里叶变换红外光谱(FT-IR)证实Tf与SPIONs偶联成功。透射电镜结果显示SPIONs粒径为9.3±0.5 nm,Tf-SPIONs粒径为14.1±0.6 nm。从浓度-弛豫率曲线看出,Tf-SPIONs和SPIONs的浓度和T2弛豫时间呈线性关系,随着样品浓度增大,其弛豫率也增大;根据MRI图像计算得到SPIONs的弛豫率为120.4mM-1S-1,Tf-SPIONs的弛豫率为64.3 mM-1S-1。②C6细胞体外MRI成像显示,Tf-SPIONs组对C6细胞T2信号强度的改变比SPIONs组更明显。浓度—铁含量曲线结果表明,在0-20μg/mL浓度范围下试验组的细胞内铁含量均高于对照组。而且试验组普鲁士蓝染色阳性细胞百分比为(98.7±1.5)%,明显高于对照组普鲁士蓝染阳性细胞(14.5±1.2)%。③平扫荷瘤大鼠肿瘤组织呈长T1、长T2信号,注射Gd-DTPA后在T1WI上明显强化。对照组注射SPIONs后,荷瘤大鼠肿瘤区在T2加权及SWI图像上未见明显信号改变。试验组注射Tf-SPIONs后2h,荷瘤大鼠肿瘤区在T2加权及SWI图像上信号开始降低,24及48h后T2加权及SWI图像中仍可发现肿瘤区呈明显低信号,且较前范围扩大。脑组织切片行HE染色证实肿瘤细胞呈现胶质瘤细胞特征;普鲁士蓝染色证实试验组大鼠肿瘤组织内积聚大量蓝染颗粒并且位于肿瘤细胞内,而对照组肿瘤组织内几乎未见蓝染颗粒。结论: Tf-SPIONs能提高磁共振T2WI和SWI图像对于胶质瘤显示的敏感性和特异性,并且可以维持较长时间的显像,或许能作为一种较理想的靶向对比剂对C6胶质瘤进行标记成像。

全文目录


前言  6-12
中文摘要  12-14
Abstract  14-17
第一部分 Tf 与 SPIONs 的偶联及表征  17-21
  1 材料与方法  17-18
  2 结果  18-19
  3 讨论  19-21
第二部分 C6 胶质瘤细胞对 Tf-SPIONs 的体外摄取  21-26
  1 材料与方法  21-22
  2 结果  22-23
  3 讨论  23-26
第三部分 Tf-SPIONs 用于大鼠脑胶质瘤模型的 MRI 成像  26-34
  1 材料与方法  26-28
  2 结果  28-30
  3 讨论  30-34
附图  34-40
总结  40-41
参考文献  41-49
附录  49-50
致谢  50-51

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 神经系肿瘤
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