学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

UCMSCs经枕大池移植治疗发育鼠HIE后遗症实验研究

作　者: 钟严艳
导　师: 黄亚玲
学　校: 华中科技大学
专　业: 小儿神经系统疾病
关键词: 新生鼠缺氧缺血性脑病动物模型神经行为学脐带间充质干细胞枕大池行为学
分类号: R722.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 5次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:探讨宫内缺氧缺血性脑病模型的制作及评价方法。方法:选用孕20天SD孕鼠,随机分为实验组(n=12)和对照组(n=3)。实验组结扎孕鼠子宫动脉15分钟,自然分娩,所生小鼠为宫内全脑缺氧缺血损伤模型组小鼠;对照组为正常组孕鼠所生小鼠。记录各组实验小鼠数目,计算死亡率。监测D1~D16体重,观察睁眼、耳廓展开时间,用神经反射测试、悬吊实验、矿场实验、拒俘反应试验、转棒仪实验及Morris水迷宫等对实验组与对照组进行运动功能与认知功能评价。随机取初生幼鼠做病理切片观察。结果:模型组胎鼠总数163只,死产率47.2%,1周内死亡率6.9%。实验组体重增长较对照组缓慢,睁眼和耳廓展开时间较对照组延迟。部分神经反射较对照组出现延迟;悬吊实验模型组悬吊时间明显较对照组短(P<0.05);转棒仪实验模型组停留时间明显较对照组短(P<0.05);旷场实验模型组小鼠穿格次数及粪便粒数明显较对照组少(P<0.05),而站立次数与对照组相比无显著性差异;拒俘反应实验模型组小鼠较对照组难以抓取;Morris水迷宫实验,实验组小鼠获取隐藏平台位置时间较对照组明显延长,在目的象限停留时间比对照组短。HE染色光镜观察,模型组大脑皮层及海马区有炎性细胞聚集,神经元细胞明显减少,神经元细胞变性坏死,胶质细胞反应性增生。结论:结扎孕鼠子宫动脉制备宫内缺氧缺血动物模型可以成功模仿人类HIE模型。目的:探索脐带源性间充质干细胞(UCMSCs)移植治疗发育鼠缺氧缺血性脑病(HIE)后遗症的有效性。方法:人脐带组织经胶原酶和胰蛋白酶消化后,分离、培养得到UCMSCs,DII标记,制备并标记UCMSCs。取子宫动脉结扎制备的全脑缺血缺氧模型出生20天(D20)小鼠为实验组,随机分为干细胞组(n=39)和PBS组(n=39);干细胞组经枕大池穿刺注射DII标记之UCMSCs,PBS组经枕大池穿刺注射PBS液。于移植后1、6周,采用免疫组化方法检测DII、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(Nestin)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)。用悬吊实验、转棒仪实验及Morris水迷宫实验进行行为学评估,记录各项评分。正常组孕鼠自然分娩,所生小鼠为对照组,与实验组进行同期对照。并进行统计学处理。结果:干细胞移植后1周、6周发现海马区及皮质运动区出现DII、NSE、Nestin和GFAP阳性细胞。悬吊实验,移植后2周干细胞组较PBS组、对照组悬吊持续时间长,三者差异有统计学意义(p<0.05)。转棒仪实验,移植后3周干细胞组较PBS组、对照组在转棒仪上停留时间长,三者差异有统计学意义(p<0.05)。Morris水迷宫实验,干细胞组、PBS组、对照组的平均潜伏期差别具有统计学意义(p<0.05),不同时间平均潜伏期差别具有统计学意义(p<0.05),组别与时间之间无明显的交互作用(p=0.0939)。空间探索实验单因素方差分析结果显示,60s内干细胞组、PBS组、对照组在目标象限(3象限)游泳时间,三者无统计学差异(P>0.05)。干细胞组、PBS组、对照组第一次穿过平台所在位置的时间,三者无统计学差异(P>0.05)。结论:人脐带间充质干细胞经枕大池移植至缺氧缺血性脑损伤大鼠模型后,可迁移至海马区与皮质运动区,并分化为神经干细胞、神经元及星形胶质细胞;外源性干细胞移植在一定程度上能促进脑功能恢复。

全文目录

中文摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-11
第一部分新生鼠宫内缺氧缺血性脑病模型的建立与评价  11-25
  实验材料  11-12
  实验方法  12-15
  实验结果  15-19
  讨论  19-21
  结论  21-22
  参考文献  22-25
第二部分脐带间充质干细胞移植治疗有效性研究  25-39
  实验材料  25-27
  实验方法  27-30
  实验结果  30-33
  讨论  33-34
  结论  34-35
  参考文献  35-39
综述  39-51
  参考文献  48-51
致谢  51

UCMSCs经枕大池移植治疗发育鼠HIE后遗症实验研究

内容摘要

全文目录

相似论文