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乳腺癌人源骨转移细胞株中TGFA基因表达的作用及意义

作 者: 江隆昌
导 师: 屈新才
学 校: 华中科技大学
专 业: 外科学
关键词: 乳腺癌 骨转移 人源骨小鼠模型 转化生长因子α
分类号: R737.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


【目的】研究乳腺癌细胞在骨转移前后基因表达谱的改变,探究表达差异基因在乳腺癌特异性骨转移中的作用。【方法】①建立乳腺癌人源骨转移NOD/SCID小鼠模型。②分离培养并利用染色体技术鉴定骨转移细胞株。③使用cDNA微阵列技术及RT-qPCR技术筛选差异表达基因。④利用siRNA技术进行对差异基因的表达进行干扰。⑤应用RT-qPCR技术和蛋白质印记技术检测干扰前后差异基因表达改变情况,以及使用Transwell技术检测肿瘤细胞侵袭能力和体外成瘤能力等生物学形状的变化。⑥使用SPSS统计软件对数据进行统计分析, P<0.05认为具有统计学意义。【结果】①人源移植骨的肿瘤形成概率高于同源移植骨肿瘤的形成率(50% vs 28%,P<0.05)。②人源骨转移细胞株相对于肿瘤母系发生染色体众数的改变(n=68 vs n=66)。③经过cDNA微阵列的筛选,发现骨转移细胞株有3474个上调表达位点,及2894个下调表达位点。经相关文献及RT-qPCR验证,发现TGFA基因是一个可能对骨转移产生重要影响的基因。④对骨转移细胞进行siRNA干扰并建立转移株siTGFA细胞,转移株siTGFA细胞中TGFA基因的转录(0.277±0.031)及表达(0.078±0.005)水平相对于未干扰细胞发生了显著下降(P<0.05);其体外侵袭能力也发生显著下降(P<0.05);在体外成瘤实验中,转移株成瘤率(80%)显著高于肿瘤母系(40%,P肿瘤母系vs转移株细胞<0.05),而转移株siTGFA细胞成瘤率(20%)显著低于转移株(P转移株siTGFA细胞vs转移株细胞<0.05)。【结论】①利用人源移植骨建立的乳腺癌NOD/SCID小鼠模型比传统模型更适合研究乳腺癌骨转移的末端亲和机制。②乳腺癌发生人源移植骨转移后,其染色体众数发生改变可能与基因表达谱的改变及对骨组织的亲和力有关。③TGFA在乳腺癌特异性骨转移中发挥重要作用,过量表达的TGFA可能是通过增强肿瘤细胞的侵袭能力和对骨的寻找能力而诱导骨转移几率的增高。

全文目录


前言  4-7
摘要  7-9
Abstract  9-12
1 绪言  12-13
2 乳腺癌NOD/SCID 小鼠人移植骨模型及骨转移模型的建立  13-21
3 骨转移乳腺癌细胞亚系的建立  21-28
4 基因芯片筛选骨转移相关基因  28-47
5 TGFA 在乳腺癌特异性骨转移中的作用  47-57
6 讨论  57-59
7 参考文献  59-64
综述  64-84
  1 前言  64-65
  2 骨吸收与形成的细胞生物学基础  65-67
  3 骨质破坏的相关生物学机制  67-70
  4 乳腺癌骨转移的生物学机制  70-72
  5 结语  72-74
  6 参考文献  74-84
致谢  84-86
附录一 (硕士阶段参与撰写并发表的论文)  86

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
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