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Ghrelin与饮食诱导大鼠肥胖易感性的关系

作 者: 郭芳芳
导 师: 杨年红
学 校: 华中科技大学
专 业: 营养与食品卫生学
关键词: Ghrelin GOAT 肥胖 肥胖抵抗 高脂饲料 低脂饲料
分类号: R589
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的:以高脂饮食诱导的肥胖肥胖抵抗大鼠为研究对象,分析促食欲激素ghrelin及催化其酰化的ghrelin酰基转移酶(GOAT)与摄食及肥胖易感性的关系,以及针对高脂饮食诱导的肥胖与肥胖抵抗大鼠进行低脂饲料干预后胃组织ghrelin表达和分泌的变化,进而揭示膳食干预对食欲的调节及其与肥胖易感性的关系。方法:(1)肥胖易感性模型建立期:雄性SD大鼠56只,初始体重120~140g,在SPF级动物房适应性喂养10天后,按体重随机分为高脂喂养组(46只)和对照组(10只),分别给予高脂饲料(脂肪供能比占49.65%)和低脂饲料(脂肪供能比占13.68%)。10周后,高脂喂养组中,大鼠体重超过对照组体重的均数+1.96SD定为肥胖易感(OP);大鼠体重小于对照组体重均数+SD定为肥胖抵抗(OR)。实验期间动物均自由摄食和饮水。(2)低脂膳食干预期:待肥胖易感模型建立后,从OP和OR中分别随机选出6只继续高脂喂养(OP-HF与OR-HF),6只改为低脂饲料喂养(OP-LF与OR-LF)。对照组继续低脂饲料喂养。8周后,各组大鼠隔夜禁食12小时后断头处死,取全血,分离血清,置-80°C冰箱冻存,以备葡萄糖、甘油三酯、胰岛素水平的测定。迅速分离肝脏(约100 mg),冰上匀浆以备肝脏甘油三酯的测定。分离胃组织,取部分匀浆,酶免试剂盒(EIA)测定胃组织ghrelin多肽水平;部分用于RNA提取,实时定量-聚合酶链反应(Real time-PCR)方法测定胃组织ghrelin和GOAT mRNA表达。分离下丘脑,匀浆提取RNA,Real time-PCR法测定GOAT mRNA表达。同时分离肾脏周围脂肪和睾丸周围脂肪并称重。实验期间每日记录大鼠给食量及剩食量,计算大鼠进食量,每周称大鼠体重并记录。结果:高脂饲料喂养10周后,19只大鼠为OP,12只为OR。OP组体重显著高于OR组。OR组与对照组大鼠体重相比差异无统计学意义。OP组大鼠的能量摄入量显著高于OR组,OR组与对照组相比无统计学差异。经8周的低脂饲料干预后,转为低脂饲料喂养的肥胖大鼠(OP-LF)与持续高脂饲料喂养的肥胖抵抗大鼠(OP-HF)相比体重明显降低,其中脂体比与对照组相比差异无统计学意义。转为低脂饲料喂养的肥胖抵抗大鼠(OR-LF)与持续高脂饲料喂养的肥胖抵抗大鼠(OR-HF)相比体重无显著变化;OR-LF大鼠的脂体比稍低于OR-HF,与对照组相比无显著性差异。OP-LF、OR-LF大鼠的累积食物摄入量分别与OP-HF、OR-HF相比有所增多,但累积能量摄入量低于OP-HF与OR-HF。低脂饲料干预后,OP-LF组与OP-HF组相比,大鼠血糖水平显著下降,OR-LF与OR-HF相比,血糖水平也明显下降。各组之间血清甘油三酯水平与对照组相比,差异无显著性。与对照组相比,OP-HF与OR-HF组大鼠肝脏甘油三酯含量明显升高,OP-HF大鼠甘油三酯水平又显著高于OR-HF大鼠。转为低脂饲料喂养后,OP-LF与OR-LF组大鼠肝脏甘油三酯含量与其高脂喂养组相比显著降低。与对照组相比,OP-HF大鼠胰岛素水平显著升高,胰岛素敏感性下降;OP-LF与OP-HF组相比,胰岛素水平显著下降,胰岛素敏感性增强。进一步研究发现OP-HF、OR-HF、OP-LF、OR-LF各组胃组织ghrelin mRNA表达与对照组相比差异无统计学意义。但OP-HF大鼠胃组织多肽水平与对照组相比显著下调,而OR-HF大鼠胃组织ghrelin多肽水平与对照组相比差异无显著统计学意义。OP-LF大鼠胃组织ghrelin多肽水平与OP-HF组相比差异无显著的统计学意义,但有上升趋势。OR-LF大鼠胃组织ghrelin多肽水平与OR-HF组及对照组相比无显著统计学差异。下丘脑的GOAT mRNA表达结果显示在高脂饲料或低脂饲料喂养条件下,OP大鼠下丘脑GOAT表达都显著高于OR大鼠。结论:1)在高脂饲料喂养条件下,能量摄入量的不同导致SD大鼠体重差异,部分大鼠表现为肥胖,部分大鼠表现为肥胖抵抗。而转为低脂饲料喂养可以使肥胖大鼠能量摄入减少,体重降低。2)高脂饲料喂养的肥胖大鼠胃组织ghrelin多肽水平下调;肥胖抵抗大鼠胃组织ghrelin多肽水平维持在对照组水平,提示食欲调节激素ghrelin与高脂饮食诱导大鼠肥胖与肥胖抵抗密切相关。肥胖大鼠可以通过降低胰岛素敏感性诱导ghrelin多肽水平下调,而经过低脂干预后,肥胖大鼠可以通过改善胰岛素敏感性诱导胃组织ghrelin多肽水平升高。3)肥胖大鼠下丘脑的GOAT mRNA表达显著高于肥胖抵抗大鼠,表明肥胖抵抗大鼠可能通过降低GOAT mRNA表达诱导ghrelin生物活性降低,从而导致肥胖抵抗大鼠能量摄入量及体脂含量减少。GOAT的发现为我们研究ghrelin提供了一个新的视角,但由于技术条件限制,我们没有对GOAT的蛋白表达进行测定。GOAT的表达在一定程度上反映了具有促食欲活性的ghrelin的表达。所以对胃组织及下丘脑GOAT的蛋白表达的测定有助于我们证实GOAT的基因表达是否与其多肽表达相一致,从而进一步反映促食欲激素ghrelin的活性。创新点:目前,国内外尚无对ghrelin及ghrelin酰基转移酶(GOAT)与同种系SD大鼠肥胖易感性关系的综合研究,以及低脂干预后ghrelin与GOAT的变化。GOAT在研究ghrelin与饮食诱导肥胖易感性关系方面具有重要的意义。目前关于营养素对ghrelin表达和分泌的影响集中在短期食欲调节的研究中,而对于长期高脂或低脂膳食对肥胖与肥胖抵抗大鼠ghrelin和GOAT表达的研究尚未见相关报道。

全文目录


中文摘要  5-8
英文摘要  8-11
前言  11-14
第一部分 肥胖肥胖抵抗大鼠模型建立  14-26
  1. 材料与方法  14-16
  2. 实验结果  16-24
  3. 讨论  24-26
第二部分 胃组织ghrelin mRNA 及多肽表达水平与饮食诱导肥胖易感性差异的关系  26-35
  1. 材料与方法  26-31
  2. 实验结果  31-32
  3. 讨论  32-35
第三部分 胃组织及下丘脑GOAT 的表达与饮食诱导肥胖易感性差异的关系  35-38
  1. 材料与方法  35-36
  2. 实验结果  36-37
  3. 讨论  37-38
小结  38-39
参考文献  39-43
综述  43-57
  参考文献  52-57
附录  57-59
致谢  59

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 代谢病
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