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HBV野生株与变异株对HepG2和L02细胞感染的初步研究

作 者: 杨凯凯
导 师: 何生松
学 校: 华中科技大学
专 业: 内科学
关键词: 人肝癌细胞系HepG2 人肝正常细胞L02细胞 HBV DMSO 野生株 变异株
分类号: R512.62
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 3次
引 用: 0次
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内容摘要


目的:采用HBV变异株野生株病毒血清感染HepG2和L02细胞,评价这两种细胞是否可被HBV自然感染,并探讨二者复制能力是否有差异。方法:分别收集ADV变异株、LAM变异株及野生株的HBV感染患者血清。用2% DMSO培养液培养人肝癌细胞系HepG2细胞和人正常肝细胞系L02细胞4天后,用收集的患者血清分别感染这两种细胞,于感染后0、1、2、4、6、8、10天收集细胞上清,采用时间分辨荧光免疫分析法检测细胞上清中HBsAg水平;实时定量PCR法检测细胞上清中HBV DNA含量。收集感染后0、24h、48h、96h时间点的细胞,细胞免疫荧光法检测细胞中HBcAg的定位。结果:1. HepG2和L02细胞上清中HBsAg含量均呈递增趋势,在感染后第2天达到最高峰,之后逐渐下降。2.两种细胞上清中HBV-DNA的量均呈递增趋势,在感染后第4天达到最高峰,以后呈下降趋势;3. 24h后在两种细胞胞质中首次见强信号的HBcAg,呈均匀分布,而胞核中未见阳性表达物;48h后可在细胞核中看见红色标记物,而胞质中HBcAg表达减弱;96h后细胞核和细胞质中HBcAg的表达均减少。4. ADV变异株、LAM变异株、HBV野生株病毒血清感染HepG2后检测细胞上清中HBsAg和HBV DNA含量,分别比较,差异有统计学意义(p<0.05)。其中ADV变异株与LAM变异株相比,结果无统计学意义(p>0.05),其它两两相比结果有统计学意义(p<0.05)。5. ADV变异株、LAM变异株、HBV野生株病毒血清感染L02后检测细胞上清中HBsAg量,相互比较,结果有统计学意义(p<0.05)。其中ADV变异株与HBV野生株相比,结果有统计学意义(p<0.05),其它两两相比结果无统计学意义(p>0.05)。结论:HBV变异株和野生株的病毒血清可感染HepG2和L02细胞,HBV变异株的复制能力弱于HBV野生株。

全文目录


缩略词表  6-7
中文摘要  7-8
ABSTRACT  8-10
前言  10-13
  参考文献  11-13
实验材料  13-15
实验方法  15-23
实验结果  23-30
讨论  30-33
参考文献  33-36
综述  36-47
  参考文献  43-47
致谢  47

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 传染病 > 病毒传染病 > 病毒性肝炎 > 乙型肝炎
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