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血液急性期蛋白作为猪群健康评价指标的研究

作　者: 许美芳
导　师: 徐子伟
学　校: 浙江师范大学
专　业: 动物学
关键词: 动物健康应激急性期蛋白
分类号: S828
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

急性期反应是机体在受到刺激时,迅速产生的一种非特异性保护机制,参与机体抵御炎症、消除病原菌等反应。本文以猪为研究对象,模拟养猪生产中存在的各种应激条件,探讨感染应激与猪群血液中急性期蛋白(acute phase protein,APP)含量的关系,并进一步开展血液急性期蛋白用于猪群健康状态评价的研究,以期为养猪生产者尽早掌握生猪即时的健康状态和改善调控猪场环境提供试验依据和理论指导。试验一：猪血液APP健康评价指标的检测与筛选本试验采用了两种途径检测猪只的健康状态,即实时荧光定量PCR技术检测APP mRNA表达水平与ELISA技术检测血液APP含量,并通过对两种途径的比较选择出合适的检测方法；再利用ELISA技术对5种血液APP指标(触珠蛋白(haptoglobin, HPT)、主要急性期蛋白(major acute phase protein, MAP)、载脂蛋白Al (apolipoprotein-Al, Apo-Al)、C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)与α1-酸性糖蛋白(α1-acid glycoprotein, a1-AGP))进行测定,筛选出对猪只健康状况敏感的APP指标或组合。结果表明：利用ELISA技术检测血液APP含量的方法在检测猪机体健康状态方面更为有效；与CRP和α1-AGP相比,HPT、MAP与Apo-Al更能体现猪机体的即时健康状态。试验二：不同应激处理对猪生产性能、血细胞参数及APP含量的影响本试验研究了不同应激处理(Hanks平衡盐液处理(对照组)、巴氏杆菌病活疫苗处理(PMVL组)、乙型脑炎活疫苗处理(SJEVL组)、三联活疫苗处理(TVL组)、LPS注射处理(LPS组))对猪生产性能、血细胞参数及APP含量的影响。结果表明：(1)试验第一周(0-7d),LPS组ADG显著(P<0.05)低于PMVL组。(2)PMVL组的白细胞参数、红细胞参数与血小板参数(血小板容积除外)均呈先升后降的趋势;SJEVL组、TVL组与LPS组的红细胞参数与血小板参数均呈下降趋势,WBC均呈升高趋势。(3)血液APP浓度与机体所受的刺激类型和刺激强度有关。细菌性感染(PMVL组)血液MAP与HPT浓度均在试验48 h达到最大值,Apo-Al在72 h降至最低值;病毒性感染(SJEVL组)血液MAP与HPT浓度分别在试验24 h与72 h升至最高值,Apo-Al在48 h降至最低值。(4)猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗应激对急性期反应造成的影响与三联活疫苗的应激效果显著相关(r=0.922,P<0.01)；应激处理后SJEVL组的APP变化趋势与已有报道结果一致,说明乙型脑炎活疫苗成功模拟了病毒性感染。试验三：猪群APP健康评价指标关系的研究本试验通过对表观健康猪与表观患病猪血液中HPT.MAP与Apo-Al含量的测定,研究猪群APP健康评价指标之间的关系。结果表明：(1)表观健康猪血液中MAP与HPT的浓度(分别为1.40±0.94 pg/mL与20.11±12.23μg/mL)均高于表观患病猪(1.23±0.70μg/mL与18.75±9.14μg/mL),表观健康猪血液中Apo-Al的浓度(61.53±16.18μg/mL)低于表观患病猪(69.24±13.49ψg/mL),均未达到差异显著水平。推测随着刺激时间的延长,机体应激反应会逐渐恢复至基础水平。(2)猪血液MAP浓度与HPT浓度显著正相关(r=0.999；P<0.01)。综上所述,APP变化幅度与机体所受的刺激类型与刺激强度有关。感染72 h以内血液正相APP(MAP与HPT)浓度显著升高,负相APP(Apo-Al)浓度显著下降。随着刺激时间的延长,机体APP含量会逐渐恢复至基础水平。

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摘要 4-6ABSTRACT 6-9目录 9-13第一部分文献综述 13-25 1 本研究的目的与意义 13-14 2 国内外研究现状 14-23 2.1 生猪健康养殖 14-17 2.2 急性期蛋白(APP) 17-21 2.3 猪群健康评价的研究 21-23 3 当前存在的问题 23 4 研究内容与方法 23-25第二部分试验部分 25-66 第一章猪血液APP健康评价指标的检测与筛选 25-37 1 材料与方法 25-30 1.1 主要仪器与试剂 25-26 1.2 试验动物与样品采集、处理 26 1.3 猪血液HPT mRNA水平的检测 26-28 1.4 猪血液APP含量的检测 28-30 1.5 数据处理与统计分析 30 2 结果与分析 30-33 2.1 猪血液中HPT及其mRNA表达水平的检测 30-33 2.2 健康猪与患病猪血液APP含量的检测 33 3 讨论 33-36 3.1 猪血液中HPT及其mRNA表达水平的检测比较 33-35 3.2 猪血液APP含量的检测比较 35-36 4 小结 36-37 第二章不同应激处理对猪群生产性能、血细胞参数及APP含量的影响 37-59 1 材料与方法 37-41 1.1 主要仪器与材料 37-38 1.2 试验动物与饲养管理 38-39 1.3 试验日粮 39 1.4 样品采集与处理 39-40 1.5 测定指标与方法 40-41 1.6 数据处理和统计分析 41 2 结果与分析 41-50 2.1 不同应激处理对试验猪行为学的影响 41-42 2.2 不同应激处理对仔猪生产性能的影响 42-43 2.3 不同应激处理对试验猪血细胞参数的影响 43-47 2.4 不同应激处理对试验猪血液APP含量的影响 47-50 3 讨论 50-57 3.1 不同应激处理对试验猪行为学的影响 50-51 3.2 不同应激处理对试验猪生产性能的影响 51-52 3.3 不同应激处理对试验猪血细胞参数的影响 52-55 3.4 不同应激处理对试验猪APP含量的影响 55-57 4 小结 57-59 第三章猪群APP健康评价指标关系的研究 59-66 1 材料与方法 59-60 1.1 主要仪器与材料 59 1.2 试验设计 59-60 1.3 测定指标与方法 60 1.4 数据处理与统计分析 60 2 结果与分析 60-63 2.1 表观健康猪与表观患病猪血液中APP含量比较 60-61 2.2 猪血液中MAP浓度、HPT浓度与Apo-A1浓度的相关性 61-63 3 讨论 63-64 3.1 表观健康猪与表观患病猪血液中APP含量的比较 63-64 3.2 猪血液中MAP浓度、HPT浓度与Apo-A1浓度的相关性 64 4 小结 64-66结论 66-67参考文献 67-78附录 78-81致谢 81-82攻读学位期间发表的学术论文 82-83

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