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腹泻型IBS模型大鼠结肠粘膜MC、5-HT与NGF的表达及痛泻要方对其干预作用

作　者: 朴昭衍
导　师: 王垂杰
学　校: 辽宁中医药大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 肠易激综合症内脏高敏感性痛泻药方肥大细胞 5-羟色胺神经生长因子
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:探讨肠易激综合征(irritable bowel syndrome, IBS)的发病机制和痛泻要方煎剂干预腹泻型IBS模型大鼠结肠粘膜肥大细胞(Mast cell、MC)、5羟色胺(5-hydroxytryp -tamine、5-HT)和神经生长因子(Nervous growth factor、NGF)的表达。材料与方法:选用清洁级新生SD大鼠,年龄8天,体重10g±2g。应用慢性结肠刺激(两周)与夹尾刺激(一周)相结合的方法,建立肠道高敏的IBS模型并对其进行评估。验证造模成功后,将实验动物分组为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、中药低剂量组(C组)、中药中剂量组(D组)、中药高剂量组(E组)、西药对照组(F组)。A组和B组以生理盐水按1ml/100g灌胃,C、D、E组以痛泻要方分别按0.25ml/100g、0.5ml/100g、1ml/100g灌胃,F组以斯巴敏按1ml/100g灌胃,连续28天,每天一次。观察球囊在各组大鼠肠道内扩张引起腹部抬起和背部拱起的容量阈值和球囊在各组大鼠肠道内不同容量下扩张每次持续5min期间腹壁收缩次数,用甲苯胺蓝染色法定量测组织MC含量,免疫组化法观察5-HT、NGF的阳性细胞数与组织阳性表达。结果:1.用药后(第12周),痛泻要方高剂量与斯巴敏都能使肠道致敏后所致的行为学指标恢复正常,与B组相比E组与F大鼠腹部抬起和背部拱起的扩张容量阈值显著增高(分别为P<0.05,P<0.01);0.3ml、0.6ml、0.9ml扩张容量下,腹壁肌肉收缩次数显著降低(分别为P<0.01,P<0.05),且中药高剂量组与斯巴敏组间无明显差异。2.用药后(第12周),B组与A组相比MC密度显著升高(P<0.01),形状不规则者多见,有的破溃、颗粒溢出胞膜外,甚至形成空泡;E、F组MC密度较B组明显减少(P<0.05),形状规则,呈圆形或椭圆形,与A组相似;E组与F组之间无显著差异(P>0.05)。说明经中药痛泻要方高剂量及西药斯巴敏治疗后,模型大鼠结肠组织粘膜MC数量减少,明显抑制了脱颗粒的现象。3.用药后(第12周),B组大鼠结肠免疫染色5-HT与NGF阳性细胞数显著增多(P<0.01),组织阳性表达明显增强,与A组相比有显著差异;E、F组较B组大鼠结肠免疫染色5-HT与NGF阳性细胞明显减少(P<0.05),免疫组化染色强度显著减低,与A组接近;E组与F组之间无明显差异。说明痛泻要方高剂量与西药斯巴敏都能降低模型大鼠结肠5-HT与NGF阳性细胞的数目和组织的阳性表达。结论:1.中药痛泻要方高剂量能提高肠道高敏的大鼠腹部抬起和背部拱起的扩张容量阈值,能减少肠道高敏大鼠腹壁肌肉收缩次数,至恢复正常。2.中药痛泻要方高剂量能有效抑制模型大鼠MC脱颗粒,减少MC数量,并能降低结肠免疫染色5-HT与NGF的阳性表达及组织中阳性细胞数目,其效果与西药斯巴敏接近。3.痛泻要方作用于IBS的机制可能是直接抑制MC脱颗粒及5-HT与NGF化学递质的释放,或间接抑制MC活化和致敏机制的级联效应来降低5-HT与NGF免疫组化阳性表达,减弱背角神经元兴奋性,从而提高内脏痛阈,消除肠道过敏。证实了MC、5-HT和NGF在IBS的病理生理中起到重要作用,并且可能参与神经-免疫-内分泌网络调控。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
前言  8-9
文献综述现代医学关于肠易激综合征的研究进展  9-22
  1.IBS的流行病学  9
  2.IBS的诊断标准  9-10
  3.IBS 的危险因素  10-11
  4.IBS的发病机制  11-16
  中医药对 IBS 的认识  16-19
  参考文献  19-22
正文  22-38
  1.实验材料  22-23
  2.实验方法  23-27
  3.实验结果  27-38
分析讨论  38-44
  1.中医对肝郁脾虚型 D-IBS 的认识  38
  2.痛泻要方立方依据、方药分析及现代药理学研究  38-40
  3.MC、5-HT、NGF 与 IBS 的关系以及痛泻要方的作用机制  40-44
结论  44-45
参考文献  45-47
附图  47-48
致谢  48-49
个人简历  49

腹泻型IBS模型大鼠结肠粘膜MC、5-HT与NGF的表达及痛泻要方对其干预作用

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