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乌贼墨多糖的化疗保护作用研究

作　者: 王光
导　师: 钟杰平
学　校: 广东海洋大学
专　业: 水产品加工及贮藏工程
关键词: 乌贼墨多糖环磷酰胺雌性生殖系统造血系统抗氧化能力
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:环磷酰胺是目前临床上常用的氮芥类化疗药物,但其在杀伤肿瘤细胞的同时对于正常组织也具有较强的毒副作用,而使其在临床上的应用受到了一定程度的限制。乌贼墨多糖是从乌贼墨中分离提取得到的活性物质,对于乌贼墨及其中的蛋白多糖复合体和黑色素的研究前人已有诸多报道,但是鲜见关于乌贼墨多糖的活性研究报道。因此,本研究拟利用大鼠或小鼠通过腹腔注射环磷酰胺造化疗损伤模型,通过口服灌喂乌贼墨多糖,对比观察动物在化疗后同一时间上几种脏器组织内生化指标、血液学指标及病理组织学的变化情况,从而探讨乌贼墨多糖对环磷酰胺所致的卵巢、脾脏、肝、肺、肾脏、心肌化疗损伤的修复作用及其可能的作用机制,为其今后的合理开发及临床应用提供科学依据。方法:健康的昆明种小鼠(雌雄各半),随机分为8组,通过检测外周血象,谷丙转氨酶活力,尿酸和胆固醇的变化对乌贼墨多糖的最佳剂量浓度进行测试,并重复测试确定最佳剂量。40只雌性S.D.大鼠,随机分为4组:对照组,模型组,多糖组,治疗组。试验周期(15天)结束后,检测体重、卵巢指数、血清中激素水平、血清和卵巢中抗氧化能力及卵巢组织病理组织学变化。40只S.D.大鼠,随机分为4组,雌雄各半,分组方式同上,试验周期结束后(15天),检测外周血象、脾脏指数、骨髓DNA含量、脾脏组织中抗氧化能力及病理组织学变化。40只BALB/C小鼠,随机分为4组,雌雄各半,分组方式同上,试验周期结束后(15天),检测肝、肾、肺、心脏指数及四种脏器组织中抗氧化能力变化,肝组织中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力变化,血清中总胆红素、白蛋白、尿素氮、肌酐、尿酸和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的变化。结果:本试验得到的乌贼墨多糖的得率约为1%,经过几次Sevag法除蛋白后,蛋白含量仍为3.07%,硫酸根离子含量为6.297%,经过两次剂量浓度测试,本着浓度最低,活性最高原则,我们认为最佳剂量浓度为180mg/kg。腹腔注射环磷酰胺后大鼠卵巢指数显著降低(P<0.05),卵巢组织中T-AOC显著升高(P<0.05),血清中T-AOC也有所升高,但差异不显著(P>0.05),对于不同抗氧化酶以及氧化产物含量的影响也不尽相同(P<0.05或P>0.05),血清中E2和P的含量显著降低(P<0.05),FSH含量显著升高(P<0.01);与对照组比较,光镜下卵巢组织中各级卵泡的数量锐减,无成熟卵泡,组织细胞大量纤维化;与模型组比较,乌贼墨多糖均能不同程度的改变由环磷酰胺所致的各项指标的变化(P<0.05或P>0.05)环磷酰胺均能极其显著的降低正常大鼠外周血白细胞,红细胞,血小板,血红蛋白及骨髓中DNA变化(P<0.01),能显著的降低正常大鼠的脾脏指数(P<0.05),能代偿性的升高正常大鼠脾脏组织中SOD活力和MDA含量,但差异不显著(P>0.05)。乌贼墨多糖对正常大鼠的各项指标无显著影响(P>0.05),但能不同程度的抑制环磷酰胺所致的白细胞,血小板及骨髓DNA变化(P<0.01或P<0.05),对血红蛋白,红细胞具有一定的保护作用,对脾脏指数具有一定的升高作用但差异均不显著(P>0.05)。乌贼墨多糖能极其显著的抑制环磷酰胺所致的小鼠肝系数、肝组织中ALT和AST的变化(P<0.01),但对白蛋白和总胆红素变化的影响不显著;能够极其显著的升高环磷酰胺所致的尿素氮的降低(P<0.01),但对尿酸,β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶和肌酐的影响不显著。同时,乌贼墨多糖也能不同程度的抑制环磷酰胺所致的上述脏器组织中抗氧化能力的变化。结论:乌贼墨多糖对环磷酰胺引起的雌性生殖系统,造血系统及各种脏器损伤具有一定程度的修复作用。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-14
1 引言  14-20
  1.1 乌贼墨的理化特性  14-15
  1.2 乌贼墨的药理作用研究  15-18
    1.2.1 乌贼墨的止血作用  15-16
    1.2.2 乌贼墨的抗肿瘤作用  16-17
    1.2.3 乌贼墨的抗菌活性  17
    1.2.4 乌贼墨的抗辐射作用  17
    1.2.5 乌贼墨的抗氧化作用  17
    1.2.6 乌贼墨的升白作用  17-18
    1.2.7 乌贼墨的其他作用  18
  1.3 环磷酰胺的药代动力学原理  18-20
2 乌贼墨多糖的提取及活性测试  20-26
  2.1 试验材料和方法  20-22
    2.1.1 乌贼墨多糖的提取  20-21
    2.1.2 蛋白含量的测定  21
    2.1.3 硫酸根离子含量的测定  21-22
    2.1.4 乌贼墨多糖的活性测试  22
  2.2 结果  22-25
    2.2.1 蛋白含量的测定  22-23
    2.2.2 硫酸根离子含量的测定  23
    2.2.3 乌贼墨多糖的活性测试结果  23-25
  2.3 讨论  25-26
3 乌贼墨多糖对雌性生殖系统的保护作用  26-33
  3.1 试验材料和方法  26-27
    3.1.1 试验设计  26
    3.1.2 体重和卵巢指数的测定  26
    3.1.3 血清和卵巢组织中抗氧化能力的测定  26-27
    3.1.4 血清中激素水平的测定  27
    3.1.5 病理组织学检验  27
  3.2 结果  27-32
    3.2.1 体重和卵巢指数的变化  27
    3.2.2 血清和卵巢组织中抗氧化能力的变化  27-28
    3.2.3 血清中激素水平的变化  28-29
    3.2.4 病理组织学变化  29-32
  3.3 讨论  32-33
4 乌贼墨多糖对造血系统的保护作用  33-39
  4.1 试验材料和方法  33-34
    4.1.1 试验程序设计  33
    4.1.2 指标的测定  33-34
  4.2 结果  34-36
    4.2.1 外周血象的变化  34
    4.2.2 脾脏指数的变化  34
    4.2.3 骨髓DNA 含量的变化  34-35
    4.2.4 脾脏组织中抗氧化能力的变化  35
    4.2.5 病理组织学观察  35-36
  4.3 讨论  36-39
5 乌贼墨多糖对肝、肾、肺、心肌组织的保护作用  39-47
  5.1 试验材料和方法  39-40
    5.1.1 试验程序设计  39
    5.1.2 指标测定  39-40
  5.2 结果  40-46
    5.2.1 体重变化  40-41
    5.2.2 肝、肾、肺、心脏指数变化  41-42
    5.2.3 肝功能的变化  42-43
    5.2.4 肾功能的变化  43-44
    5.2.5 肝、肾、肺、心脏中抗氧化能力变化  44-46
  5.3 讨论  46-47
6 结论与展望  47-48
  6.1 结论  47
  6.2 创新点  47
  6.3 展望  47-48
参考文献  48-54
致谢  54-55
作者简介  55-57
导师简介  57

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