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LRP16基因对人子宫内膜癌HEC-1-B细胞的影响

作　者: 何雯
导　师: 毛熙光
学　校: 泸州医学院
专　业: 外科学
关键词: 子宫内膜癌 HEC-1-B细胞基因转染生长曲线增殖
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：研究携带有目的基因LRP16的真核表达质粒EX-Y2069-M29,通过阳离子脂质体转染HEC-1-B细胞的转染效率,了解转染前后LRP16基因的表达情况,并观察LRP16对HEC-1-B细胞增殖的影响。方法：将LRP16真核表达载体EX-Y2069-M29和EX-NEG-M29空质粒分别用脂质体法转染体外培养的HEC-1-B细胞,以转染空载体EX-NEG-M29的HEC-1-B作为空载体对照,以HEC-1-B细胞作阴性对照,在荧光显微镜下观察转染荧光效应,用RT-PCR方法检测转染、前后LRP16基因的表达,描绘转染前后细胞生长曲线,用WST-1法检测细胞增殖情况。结果：1.LRP16组、空载体组部分细胞在荧光显微镜下发绿色荧光,阴性对照组细胞未见绿色荧光。2.空白对照组、空质粒组和质粒转染组HEC-1-B细胞中LRP16mRNA的相对表达量分别为0.1231±0.0366、0.1486±0.0287和0.5060±0.0198,质粒转染组与其他两组相比,差异有统计学意义(F=161.547,P=0.0003)。3.转染前后HEC-1-B细胞的生长曲线见,未转染的HEC-1-B细胞群体倍增时间为0.8天,对数生长期在2-6天之间。而转染LRP16的HEC-1-B细胞群体倍增时间为2天,对数生长期在4-6天之间,明显低于非转染组细胞。4.LRP16组、空载体组及阴性对照组HEC-1-B细胞WES-T比色法测定,LRP16转染组HEC-1-B细胞在体外能继续增殖,但与空载体组和阴性对照组相比,HEC-1-B细胞体外增殖能力明显下降；空载体组和阴性对照组HEC-1-B细胞体外增殖能力无明显改变。结论：1. EX-Y2069-M29真核表达质粒可通过脂质体法成功转入HEC-1-B细胞,并可获得有效,稳定的表达；2.转染后的HEC-1-B细胞LRP16基因表达明显增强；3.转染后的HEC-1-B细胞生长速率降低。

全文目录

1 LRP16基因对人子宫内膜癌 HEC-1-B细胞的影响  3-47
  1.1 中文摘要  3-5
  1.2 英文摘要  5-7
  1.3 前言  7-9
  1.4 材料与方法  9-22
  1.5 实验结果  22-34
  1.6 讨论  34-40
  1.7 结论  40-41
  1.8 参考文献  41-46
  1.9 英汉缩略词对照表  46-47
2 致谢  47-48
3 LRP16基因作用的研究进展  48-59
附录  59-64

LRP16基因对人子宫内膜癌HEC-1-B细胞的影响

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