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稳定高表达RASSF1A基因的人胃癌SGC-7901细胞株的建立
作 者: 肖伟升
导 师: 廖爱军
学 校: 南华大学
专 业: 消化内科
关键词: RASSF1A SGC-7901 pcDNA3.1(+) 基因转染
分类号: R735.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 33次
引 用: 0次
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内容摘要
目的:建立高表达RASSF1A人胃癌SGC-7901细胞株,为研究其在肿瘤细胞凋亡、细胞周期阻滞、细胞增殖抑制等方面奠定基础。方法:采用RT-PCR从人胃组织中扩增出人RASSF1A基因的全长cDNA,利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中获得重组质粒pcDNA3.1(+)/RASSF1A。利用脂质体将重组质粒转染入人胃癌SGC-7901细胞株中,通过G418筛选阳性细胞克隆,采用RT-PCR、Western Blotting检测RASSF1A的表达。结果:1、酶切图谱分析及基因测序证明人RASSF1A基因已被完整、正确地插入到pcDNA3.1(+)质粒载体中;2、人胃癌SGC-7901细胞株的G418最佳筛选浓度为500μg/ml;3、RT-PCR及Western Blotting结果显示转染阳性质粒细胞的RASSF1A基因表达水平上调;结论:通过脂质体转染法能够成功获得稳定高表达RASSF1A基因的人胃癌SGC-7901细胞株;
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全文目录
主要英文缩略语索引 4-5 中文摘要 5-6 英文摘要 6-7 论文正文 7-35 前言 7-9 主要实验材料及仪器设备 9-12 实验方法 12-22 实验结果 22-27 讨论 27-31 结论 31-32 参考文献 32-35 综述 35-44 读研期间发表的文章 44-45 致谢 45
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胃肿瘤
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