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西杂牛MyHC基因的表达模式及其与部分肉质性状的相关分析

作 者: 傅冲云
导 师: 赖松家
学 校: 四川农业大学
专 业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 西杂牛 肌球蛋白重链 实时PCR 肉质 相关分析
分类号: S823
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


本实验采用荧光定量PCR技术(SYBR GreenⅠ法)检查了6月龄、12月龄、36月龄的西杂牛的背最长肌、半腱肌和比目鱼肌中肌球蛋白重链(MyHC)4种亚型的mRNA表达量。利用免疫荧光技术确定不同月龄、不同肌肉组织中Ⅰ型肌纤维和Ⅱ型肌纤维的面积。用石蜡切片技术、索式抽脂、Warner-Bratzler男切力测定法分别确定不同月龄、不同肌肉组织中肌纤维的密度、切面面积、直径、肌内脂肪和嫩度。分析了3种MyHC亚型的mRNA表达量的差异和两种类型肌纤维面积与肉质之间的相关性。结果表明:肌球蛋白重链(MyHC)3种亚型的mRNA表达量和两类肌纤维类型面积在不同的肌肉间存在差异,并且和肉质有不同程度的相关。背最长肌和半腱肌肉的MyHCⅠ、MyHCⅡx表达规律一致:前期上升后期下降。比目鱼肌中MyHCⅠ、MyHCⅡx表达为持续下降。MyHCⅡa的表达在三种肌肉中都为持续下降。不同的肌肉中3种肌球蛋白重链之间的相关性存在差异,主要表现为Ⅰ型蛋白的表达和Ⅱ型蛋白的表达成极显著的负相关,Ⅱ型蛋白中两种亚型在背最长肌和半腱肌中也有不同程度的负相关,这说明在不同肌肉中肌纤维类型的转换有差异。背最长肌和半腱肌中肌球蛋白重链的变化:Ⅱa型、Ⅱ型蛋白前期上升后期下降,Ⅱx型、Ⅰ型蛋白表达量前期下降后期略有上升。比目鱼肌中Ⅱa型蛋白、Ⅱx型蛋白持续下降,Ⅱ型蛋白、Ⅰ型蛋白前期下降后期上升,成体中背最长肌和比目肌中Ⅰ型蛋白和Ⅱ型蛋白的比例近似,半腱肌中Ⅱ型蛋白的比例要偏高。MyHCs基因与相关蛋白在不同的肌肉中的相关性存在差异:比目鱼肌中MyHCⅡa的表达和Ⅱa型肌球蛋白的表达,MyHCⅡx的的表达和Ⅱx型肌球蛋白的表达成显著正相关,而其他两种肌肉中这种相关性不明显。背最长肌和比目鱼肌中MyHCⅠ表达和Ⅰ型肌球蛋白的表达成极显著的负相关,半腱肌中这种相关性不明显。三种肌肉中Ⅱa型蛋白的表达和肉质无显著相关性,、半腱肌中三种肌球蛋白重链和肉质无显著相关性。背最长肌和比目鱼肌Ⅰ型蛋白和Ⅱx型蛋白分别和肉质有显著的相关性。MyHCⅠ、MyHCⅡa的表达在三种肌肉中与肉质的相关性类似。背最长肌和半腱肌中MyHCⅡx的表达与肉质无显著相关性,比目鱼肌中MyHCⅡx的表达与肉质相关性类似于MyHCⅠ、MyHCⅡa。

全文目录


摘要  6-7
Abstract  7-9
1. 文献综述  9-18
  1.1 引言  9-10
  1.2 肌纤维类型  10-11
  1.3 肌纤维与肉质  11-12
  1.4 肌纤维结构及其蛋白分类  12-13
  1.5 骨骼肌肌纤维类型的转变  13-14
  1.6 MYHCS在成年牛及其他成年哺乳动物中的表达  14-15
  1.7 免疫荧光技术  15-17
  1.8 本研究的内容和目的  17-18
2. 材料和方法  18-26
  2.1 试验材料的采集  18
  2.2 主要仪器  18-19
  2.3 试验试剂  19
  2.4 常用试剂的配置  19-20
  2.5 试验方法  20-26
3. 结果与分析  26-46
  3.1 总RNA提取  26
  3.2 常规PCR反应结果  26-27
  3.3 RT-PCR反应结果  27-28
  3.4 西杂牛MYHCS MRNA的相对表达量  28-31
  3.5 西杂牛肌球蛋白重链的表达  31-34
  3.6 西杂牛肌纤维的密度、直径、切面面积  34-35
  3.7 西杂牛三种肌肉的肌内脂肪及其嫩度  35-37
  3.8 西杂牛三种肌肉中MYHCS、肌球蛋白重链、肉质性状的变化规律  37-40
  3.9 相关性分析  40-46
4. 讨论  46-50
  4.1 西杂牛三种肌肉中MYHCS MRNA表达变化  46
  4.2 西杂牛三种骨骼肌中不同肌纤维比例的变化  46-47
  4.3 西杂牛三种肌肉中MYHCS基因表达和肌球蛋白重链相关性  47-48
  4.4 西杂牛三种肌肉中MYHCS基因表达和部分肉质的相关性  48
  4.5 西杂牛三种肌肉中肌球蛋白重链和部分肉质相关性  48-50
5. 结论  50-51
参考文献  51-59
致谢  59

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 >
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