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小麦avenin-likeb基因胚乳特异性表达载体的构建和遗传转化

作　者: 马凤云
导　师: 何光源；汪越胜
学　校: 华中科技大学
专　业: 植物学
关键词: 小麦加工品质 avenin-like 载体构建基因枪遗传转化
分类号: S512.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

小麦Avenin-like蛋白是一种新型的功能未知的种子储藏蛋白,Avenin-like蛋白富含半胱氨酸残基,因而推测该类蛋白可能影响小麦的加工品质。对Avenin-like蛋白与小麦加工品质关系的研究目前还未见报道。本文从小麦基因组中分离avenin-like b基因并构建真核表达载体,利用基因枪法将avenin-like b基因转入郑麦9023和鄂麦12中,获得了转基因植株,为研究该基因的功能提供了研究材料。主要研究结果如下:(1)选择不含目的基因的表达载体pLRPT和标记基因载体pAHC25,经酶切和测序鉴定后,成功构建了pLRPT-avel真核胚乳特异性表达载体,目的基因由胚乳特异表达的1Dx 5启动子所驱动。(2)比较了不同蔗糖浓度的诱导培养基对郑麦9023和鄂麦12的愈伤组织诱导,确定了蔗糖浓度为3%的诱导培养基适合于郑麦9023和鄂麦12的愈伤组织诱导。(3)利用基因枪法将avenin-like b基因转入郑麦9023和鄂麦12中,运用PCR的方法扩增Gus基因和CAMV35S基因对转基因植株进行筛选,转基因阳性的株数占总再生苗株数的比例近10%。本研究通过构建胚乳特异性表达载体pLRPT-avel,通过基因枪法获得转基因材料,为进一步研究avenin-like b基因与小麦加工品质关系提供了新的材料。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
1 绪论  9-18
  1.1 小麦的品质研究  9-11
  1.2 小麦转基因技术  11-13
  1.3 avenin-like 基因  13-15
  1.4 研究的目的和意义  15-16
  1.5 本研究的技术路线  16-18
2 真核表达载体的构建  18-34
  2.1 试验材料  18-19
  2.2 试验方法  19-28
  2.3 结果与分析  28-33
  2.4 讨论  33-34
3 pLRPT—avel 的遗传转化和转基因鉴定  34-52
  3.1 试验材料  34-35
  3.2 试验方法  35-43
  3.3 结果与分析  43-50
  3.4 讨论  50-52
4 总结与展望  52-54
  4.1 总结  52
  4.2 展望  52-54
致谢  54-55
参考文献  55-61
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文目录  61-62
附录2 本研究avenin-like b 基因序列  62-63
附录3 培养基母液配方  63-65

小麦avenin-likeb基因胚乳特异性表达载体的构建和遗传转化

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