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慢性关节炎吗啡耐受大鼠脊髓及背根神经节辣椒素受体表达的研究

作 者: 王晓娜
导 师: 王国林;于泳浩
学 校: 天津医科大学
专 业: 麻醉学
关键词: 辣椒素受体 吗啡耐受 关节炎 背根神经结 脊髓背角 完全弗氏佐剂
分类号: R96
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


目的:阿片耐受的细胞和分子机制尚不清楚。慢性疼痛性疾病的最常见原因是慢性炎症。越来越多的证据表明辣椒素受体直接参与了炎性痛敏的形成,但其是否参与了与异常痛敏密切相关的阿片耐受,目前国内外尚没有相关报道。本实验以慢性关节炎大鼠模型为基础,观察脊髓背角及背根神经节在形成阿片耐受之后的辣椒素受体(vanilloid receptor-1,VR-1)水平的变化,目的是通过辣椒素受体途径了解阿片耐受的机制,为临床治疗提供新的思路。方法:40只成年雄性SD (Sprague-Dawley)大鼠,体重250±20g,随机分为5组,每组8只:A组为空白对照组,在大鼠左后踝关节腔内注射生理盐水50ul,3天后鞘内注射生理盐水10ul,一天2次,连续7天;B组为炎症对照组,在大鼠左后踝关节腔内注射完全弗氏佐剂(Complete Freund’s adjuvant, CFA)50ul,3天后鞘内注射生理盐水10ul,一天2次,连续7天;C组为关节炎吗啡10ug组,在大鼠左后踝关节腔内注射完全弗氏佐剂50ul,3天后鞘内注射吗啡10ug,一天2次,连续7天;D组为关节炎吗啡20ug组,在大鼠左后踝关节腔内注射完全弗氏佐剂50ul,3天后鞘内注射吗啡20ug,一天2次,连续7天;E组为吗啡对照组,在大鼠左后踝关节腔内注射生理盐水50ul,3天后鞘内注射吗啡20ug,一天2次,连续7天各组分别于致炎前1天、鞘内给药前1天、给药后第1、3、5、7天,采用Von Frey细丝法和热板法测定机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold, PWT)和热缩足反射潜伏期(paw withdrawa themall latency, PWL),评价疼痛行为学。于开始给药后第8天,10%水合氯醛液按375 mg·kg-1腹腔注射麻醉大鼠,快速取出脊髓及背根神经节,采用免疫荧光标记技术和计算机图象分析技术观察脊髓背角及背根神经节辣椒素受体表达。结果:1.B-D组大鼠于致炎后第3天缩爪潜伏期显著缩短(P<0.01);C、D组大鼠在鞘内给予吗啡后第1天缩爪阈值较致炎后及B组增加(P<0.05),于给药后第5天缩爪潜伏期开始较前缩短,且较基础值缩短(P<0.05),给药后第7天仍保持于低水平(P<0.05),标志吗啡耐受形成;A组大鼠的缩爪潜伏期在研究期间无明显改变;E组大鼠缩爪潜伏期在鞘内给药后第5天较基础值缩短(P<0.01),至给药后第7天仍保持于低水平,标志吗啡耐受形成。2.在鞘内给予吗啡后第7天,与A组相比,B-E组脊髓及背根神经节TRPV-1表达增加;与B组相比,C-E组脊髓及背根神经节TRPV-1表达增加;与E组相比,D组脊髓及背根神经节TRPV-1表达增加。结论:1.在慢性关节炎的基础上,连续7天鞘内给予吗啡,可以制作出慢性关节炎大鼠吗啡耐受模型。2.吗啡耐受的形成可能与脊髓背根神经节TRPV-1表达增加有关,TRPV-1表达增加可能是吗啡耐受产生的分子机制之一创新点:1.在关节炎基础上,制作出的吗啡耐受模型是在有疼痛背景的基础上反复给予吗啡导致耐受,更加接近于临床。2.将脊髓背根神经节辣椒素受体的变化引入吗啡耐受的研究中,为揭示其机理提供了新的思路。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-9
符号说明  9-10
前言  10-12
  研究现状、成果  10
  研究目的、方法  10-12
1 对象和方法  12-16
2 结果  16-22
3 讨论  22-32
4 小结  32-33
结论  33-34
参考文献  34-39
发表论文和参加科研情况说明  39-40
综述  40-57
  综述正文  40-47
  综述参考文献  47-57
致谢  57-58

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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