学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

LASS2在肝癌生长和转移中的作用

作　者: 唐宁
导　师: 覃文新
学　校: 复旦大学
专　业: 病原生物学
关键词: LASS2 V-ATPase质子泵 ATP6L 肝细胞肝癌
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 5次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


LASS2 (homo sapiens longevity assurance homologue 2)是本室从人肝cDNA文库中筛选到的一个与酵母(Saccharomyces cerevisiae)长寿保障基因LAG1 (yeast longevity assurance gene 1)高度同源的人类新基因。LASS2基因定位于染色体lqll,属于LASS蛋白家族中的一员。在LASS2基因功能的前期研究中,我们发现过表达LASS2可以抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长。为了验证这一结果,我们将本室构建保存的pCMV-HA2-LASS2质粒瞬时转染高转移肝癌细胞HCCLM3,未转质粒的HCCLM3细胞作为对照。结果发现外源性LASS2的过表达对HCCLM3细胞生长有抑制作用。为了深入研究LASS2基因调控细胞生长的机理,我们利用流式细胞仪和Western blotting方法分析了细胞的凋亡情况。研究发现,LASS2的过表达可以激活细胞的线粒体凋亡通路,介导细胞发生凋亡。提示LASS2可能通过介导细胞凋亡来发挥其抑制细胞生长的作用。前期实验还发现,LASS2在高转移肿瘤细胞中低表达,而在低转移肿瘤细胞中高表达；并且,LASS2能与V-ATPase质子泵的c亚基ATP6L相互结合。V-ATPase质子泵是真核细胞膜上存在的一种与H+主动转运有关的跨膜蛋白,其c亚基ATP6L参与H+跨膜通道的形成。目前有很多文献报导V-ATPase质子泵,尤其是c亚基ATP6L与肿瘤侵袭和转移相关。以上提示LASS2可能参与肿瘤细胞的侵袭转移。为了研究LASS2在肿瘤侵袭和转移中的作用,我们利用RNA干扰技术,下调低转移肝癌细胞MHCC97-L中LASS2基因的表达,通过检测V-ATPase质子泵的泌氢功能,对H+敏感的基质蛋白水解酶MMP-2的含量和活性,以及体外侵袭实验,探讨LASS2基因通过调控质子泵的泌氢功能来参与肿瘤细胞侵袭转移的机制。结果显示,当LASS2基因的表达被抑制后,质子泵的泌氢功能增加,细胞外H+浓度升高,细胞外MMP-2的活性形式明显增加,MHCC97-L细胞体外侵袭能力显著增强。提示LASS2基因可能通过调控V-ATPase质子泵参与肿瘤侵袭转移。综上所述,本研究中我们探讨了LASS2参与肝癌细胞体外侵袭的机制,加深了对LASS2参与肝癌细胞侵袭转移的了解。然而,LASS2调控细胞生长和凋亡的具体途径还不清楚。LASS2具有HOX、TLC两个功能域,它可以通过诱导神经酰胺合成酶活性,增高细胞内神经酰胺含量,导致细胞通过线粒体途径发生凋亡。同时,LASS2还可以通过与V-ATPase质子泵的c亚基ATP6L相互结合,抑制细胞内H+泵出,导致细胞内pH值下降这条通路来引发细胞线粒体途径依赖的凋亡。以上结果为深入研究LASS2在肝癌细胞生长、转移中的作用打下了良好基础。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
第一部分 LASS2抑制肝癌细胞HCCLM3的生长  8-30
  引言  8-13
  材料与方法  13-22
  结果  22-26
  讨论  26-29
  小结  29-30
第二部分 LASS2对肝癌细胞体外侵袭的影响  30-51
  引言  30-33
  材料与方法  33-42
  结果  42-48
  讨论  48-50
  小结  50-51
参考文献  51-58
综述  58-68
附录  68-69
致谢  69-70

相似论文

  1. 核蛋白NDP52与肿瘤坏死因子受体相关因子TRAF6相互作用及临床意义的研究,R363
  2. 肝细胞癌中SK4的表达和意义,R735.7
  3. 胰岛素样生长因子-Ⅱ异常表达及活化干预对肝癌细胞增殖的影响,R735.7
  4. 生长抑素受体亚型特异性激动剂、尼美舒利对人肝癌细胞生长的影响,R735.7
  5. 人源性长寿保障基因LASS2在乳腺癌组织和细胞中的表达及意义,R737.9
  6. miR-122调控靶基因NDRG3在HBV相关肝癌中的作用研究,R735.7
  7. 染色体端粒长度与肝癌发病及预后关系的实验研究,R735.7
  8. Cripto-1瘤基因高表达在肝癌发病机理中的作用及其临床意义,R735.7
  9. 肝细胞肝癌根治性切除术后复发时间和复发类型影响因素的探讨,R735.7
  10. 酒精相关性肝癌及乙肝病毒相关性肝癌线粒体DNA D-loop区测序分析,R735.7
  11. 加温联合冬凌草甲素对肝癌细胞株SMMC-7721作用的研究,R735.7
  12. p27和PCNA在原发性肝癌的表达及侵袭复发关系的研究,R735.7
  13. 肝细胞肝癌转移复发与外周GPC3 mRNA及AFP mRNA表达的关系,R735.7
  14. 伴肝硬化的肝细胞肝癌根治性切除术预后因素分析,R735.7
  15. PITX1在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义,R735.7
  16. 肝细胞肝癌中乙酰肝素酶基因的表达及临床意义,R735.7
  17. 凋亡抑制因子survivin在肝癌中的表达和意义及其与c-myc的相关性,R735.7
  18. 全人源抗肝癌重组免疫毒素的构建、表达及初步鉴定,R735.7
  19. PTEN在肝癌中表达缺失的意义及其体外转染对HHCC作用的研究,R735.7
  20. 肝细胞肝癌微血管密度与雌激素受体表达的临床病理意义,R735.7

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com