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对映—贝壳杉烷二萜化合物的植物毒性及作用机制的研究——推定的化感作用潜能

作　者: 祁林林
导　师: 丁兰
学　校: 西北师范大学
专　业: 植物学
关键词: 对映-贝壳杉烷二萜化合物植物毒性 Leukamenin E 化感作用潜能
分类号: Q946
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

香茶菜属植物为唇形科多年生草本、灌木或亚灌木,全世界共有150多个种,广泛分布于热带及亚热带地区。对映-贝壳杉烷二萜化合物是该属植物的主要次生代谢产物,目前已从该属植物中分离得到400余种该类化合物。在长期进化过程中形成的如此含量丰富且种类繁多的次生代谢产物很有可能对物种自身的生存有着特殊的意义,然而这些化合物是否在其自然生境中发挥着某些生态作用仍然不清楚。为了确定该类化合物的植物毒性,推断其是否有可能在自然生境中发挥重要的生态作用,为系统开展该类化合物化感作用的研究提供依据,我们选取了4种含量丰富且具结构代表性的对映-贝壳杉烷二萜化合物,运用生物测定的方法研究了它们对常见受试植物莴苣的植物毒性,并探讨了具有较强植物毒性的化合物Leukamenin E可能的作用机制。研究结果如下:①4种二萜化合物Leukamenin E、Weisiensin B、Rabdosin B和Epinodosin在短期实验条件下对莴苣的种子萌发率、苗长、鲜重和干重等均没有表现出显著的影响,但是幼苗的根长和根毛发育却都受到了显著的影响。160μM的4种二萜化合物处理后,莴苣幼苗的根毛发育都受到了不同程度的抑制。除Rabdosin B以外,其余3种化合物在较高浓度(120-160μM)条件下都能够显著抑制幼苗的根长,化合物Rabdosin B在40-160μM的浓度范围内对莴苣幼苗根的生长表现出显著的促进作用。结果表明该类化合物能够特异影响莴苣幼苗根的生长及根毛发育,很有可能在其自然生境中发挥着重要的生态作用。②Leukamenin E在较低浓度(10-80μM)条件下就能够对莴苣幼苗的根毛发育过程产生显著的抑制作用,80μM的Leukamenin E就能够完全抑制根毛发育过程。而在较高浓度(50-200μM)条件下,根的净生长速率(NGR)也受到了显著的抑制。③100和200μM的Leukamenin E处理后莴苣幼苗的根系活力显著下降,说明高浓度的Leukamenin E处理后根系的代谢能力减弱,但是根系活力的降低可能只是高浓度条件下的一种综合反映,并不是根的生长受到抑制的直接原因。④Leukamenin E处理后根尖分生区的有丝分裂指数也受到了显著的抑制,而且与根的NGR变化趋势相一致,线性回归分析的结果表明根的NGR与有丝分裂指数具有显著的相关性,说明根的生长受到抑制的主要原因是由于根尖分生区的有丝分裂行为受到抑制的结果。有丝分裂指数的降低主要是由于前期细胞比率的下降,这种现象很有可能与细胞周期阻滞有关。⑤高浓度(100和200μM)的Leukamenin E处理后根尖分生区出现一些异常有丝分裂现象,主要与染色体受到损伤或者纺锤体微管受到影响有关系。纺锤体微管受到影响有可能阻止姐妹染色单体在后期的分离,从而增加了中期细胞相对于分裂期细胞的比率。⑥Leukamenin E和乙烯作用拮抗剂Ag+都能够显著抑制莴苣幼苗的根毛发育过程,而且它们对于乙烯利促进根毛顶端生长的作用均具有拮抗特性。Leukamenin E对莴苣幼苗根毛发育的抑制作用并不能通过同时添加乙烯利而恢复,说明Leukamenin E并没有影响乙烯的合成,而是和Ag+一样影响了乙烯的作用通路,但是Leukamenin E和Ag+抑制根毛发育的具体方式存在着差异。⑦Ag+对乙烯抑制根的生长这一反应同样具有拮抗特性,而Leukamenin E对这一乙烯反应不具有拮抗特性。可能的一种解释是,Leukamenin E是在乙烯通路中特异性调控根毛顶端生长的下游支路中起作用,而对于乙烯调控根的生长的支路则不起作用,该化合物在较高浓度条件下对根的生长的抑制作用主要是由于根尖分生区有丝分裂行为受到抑制所引起的;而Ag+则可能与乙烯受体发生相互作用,即在乙烯通路中的上游位点起作用,从而对乙烯调控的根毛顶端生长和根的生长均表现出拮抗特性。我们的研究首次证实了对映-贝壳杉烷二萜化合物对莴苣幼苗根的生长及根毛发育过程具有较强的植物毒性。Leukamenin E在较低浓度条件下就能够抑制莴苣幼苗的根毛发育过程,其对根毛发育的抑制作用可能与影响乙烯作用通路有关系,而在较高浓度条件下对根的生长的抑制作用则主要是由于根尖分生区有丝分裂行为受到抑制所引起的。该类化合物较强的植物毒性预示着它们很有可能在自然生境中发挥着重要的生态作用,系统开展该类化合物化感作用的研究具有理论依据和重要的生态学意义。

全文目录

摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
第一章植物化感作用研究综述  10-49
  1 化感作用的研究历史  10-13
    1.1 化感现象的描述记载阶段  10-11
    1.2 化感作用概念的形成及发展阶段  11-12
    1.3 现代化感作用研究阶段  12-13
  2 化感作用的研究方法  13-16
    2.1 化感物质的收集方法  13-15
    2.2 化感物质的分离与鉴定  15
    2.3 生物测定  15-16
  3 化感物质的种类、生物合成和释放途径  16-22
    3.1 常见化感物质的种类  16-17
    3.2 化感物质的生物合成  17-18
    3.3 化感物质的释放途径  18-22
  4 化感物质的作用特点  22-25
    4.1 物种特异性  22-23
    4.2 环境条件的影响  23
    4.3 浓度依赖性  23-24
    4.4 结构依赖性  24
    4.5 化感物质的复合效应  24-25
  5 化感物质的作用机理  25-30
    5.1 影响膜功能  26
    5.2 影响光合作用  26-27
    5.3 影响呼吸作用  27-28
    5.4 影响激素代谢  28
    5.5 影响有丝分裂及根尖细胞结构  28-29
    5.6 影响酶活性  29
    5.7 影响基因表达和蛋白质合成  29-30
  6 化感作用研究的应用价值  30-32
    6.1 建立合理的耕作制度  30-31
    6.2 合理配置混交林  31
    6.3 某些化感物质对农业生产的促进作用  31-32
    6.4 杂草的生物控制  32
  7 萜类化合物及其化感作用  32-35
    7.1 萜类化合物概述  33
    7.2 萜类化合物的化感作用  33-35
  8 化感作用研究中应注意的问题  35-37
  9 立题依据和研究目的  37-39
  参考文献  39-49
第二章四种对映-贝壳杉烷二萜化合物化感作用潜能的初步评价  49-56
  1 前言  49
  2 材料及方法  49-50
    2.1 材料及仪器  50
    2.2 实验方法  50
    2.3 数据统计分析  50
  3 结果与讨论  50-52
    3.1 Leukamenin E 对莴苣种子萌发及幼苗生长的影响  50-51
    3.2 Weisiensin B 对莴苣种子萌发及幼苗生长的影响  51
    3.3 Rabdosin B 对莴苣种子萌发及幼苗生长的影响  51-52
    3.4 Epinodosin 对莴苣种子萌发及幼苗生长的影响  52
  4 结论  52-55
  参考文献  55-56
第三章 LEUKAMENIN E 作用机制的研究  56-76
  1 前言  56-57
  2 材料及方法  57-59
    2.1 材料及仪器  57
    2.2 实验方法  57-59
    2.3 数据统计分析  59
  3 结果  59-71
    3.1 Leukamenin E 对根长NGR 的抑制作用  59-60
    3.2 Leukamenin E 对根系活力的影响  60-61
    3.3 Leukamenin E 对根尖有丝分裂行为的影响  61-64
    3.4 Leukamenin E 对根毛发育的抑制作用  64-65
    3.5 Ag~+对根的生长及根毛发育的影响  65-67
    3.6 Leukamenin E 能够拮抗乙烯利对根毛长度的促进作用  67-70
    3.7 乙烯利不能恢复Leukamenin E 对根毛长度的抑制作用  70-71
  4 讨论  71-74
  参考文献  74-76
硕士在读期间发表学术论文  76-77
致谢  77

对映—贝壳杉烷二萜化合物的植物毒性及作用机制的研究——推定的化感作用潜能

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