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山莓叶抑菌活性成分分离、鉴定及抑菌效果研究

作　者: 陈雪香
导　师: 蔺万煌；曹庸
学　校: 湖南农业大学
专　业: 植物学
关键词: 山莓 分离纯化 结构鉴定 抑菌效果 抑菌机理
分类号: S663.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


研究山莓叶活性成份的分离、鉴定及其抑菌效果具有重要的理论意义和应用价值。该论文以蔷薇科悬钩子属的山莓(Rubus corchorifolius L.f)叶为材料,系统地开展了其活性成分的分离纯化、活性成分的结构鉴定及抑菌活性研究,取得如下主要结果：1.山莓80%乙醇提取物具有良好的抑菌效果,有机成分主要为有机酸、糖类、黄酮及其甙类、鞣质、酚类、强心甙、香豆素、甾体、萜类等化合物。山莓叶粗提物在温度30℃～121℃处理2h,光照6h～18 h,pH5～7时较稳定。2.分离纯化鉴定了6个化合物,其中4个新化合物。分别为：对映-贝壳杉-16α,17二羟基-2酮,对映-9β,16α,17三羟基-贝壳杉-2酮,对映-16α,17,19三羟基-贝壳杉-2酮,对映-2β,3α,16α,17-四羟基-贝壳杉醇,一个黄酮化合物山奈酚-3-O-β-D-(6”-对羟基桂皮酰基)-葡萄糖苷,一个三萜化合物为2α、3β、23α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸。3.山奈酚-3-O-β-D-(6”-对羟基桂皮酰基)-葡萄糖苷和三萜化合物为2α、3β、23α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸具有很好的抑菌活性,且后者的抑菌比前者的抑菌活性强。山莓叶提取物和2α、3β、23α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸的最低抑菌浓度分别为6.25-12.5mg/mL和256μg/mL,后者在作用大肠杆菌4.5h后其菌体表面粗糙,皱缩,其生长和分裂明显受到抑制。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-13
第一章 综述  13-20
  1 引言  13
  2 国内外研究现状  13-19
    2.1 山莓研究进展  13-18
      2.1.1 山莓的化学成分研究  13-16
      2.1.2 山莓的药理作用研究进展  16-18
      2.1.3 工业用途  18
    2.2 中草药活性成分分离纯化方法  18
    2.3 化合物结构鉴定方法  18
    2.4 中草药抑菌作用的研究进展  18-19
    2.5 抑菌机理研究进展  19
  3 研究前景及主要研究内容  19-20
    3.1 研究前景  19
    3.2 主要研究内容  19-20
第二章 山莓叶抑菌活性物提取、分离纯化及抑菌作用研究  20-38
  1 材料与方法  20-27
    1.1 材料  20-21
      1.1.1 原材料  20
      1.1.2 供试菌种  20
      1.1.3 培养基  20-21
      1.1.4 试剂  21
      1.1.5 仪器  21
    1.2 方法  21-27
      1.2.1 三种不同溶剂提取山莓叶抑菌活性物质  21-22
      1.2.2 醇提液的制备  22
      1.2.3 山莓叶醇提物化学成分检识方法  22
      1.2.4 山莓叶乙醇粗提物的制备  22
      1.2.5 山莓活性成分液液萃取分离纯化  22
      1.2.6 乙酸乙酯萃取物柱层析的分离纯化  22
      1.2.7 柱层析Ⅰ组份Fr.5的柱层析分离  22-23
      1.2.8 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物的脱鞣质试验  23
      1.2.9 乙酸乙酯萃取物脱鞣质样的分离纯化  23-25
      1.2.10 不同提取物的抑菌活性  25
      1.2.11 不同温度处理山莓叶提取物及抑菌活性测定  25-26
      1.2.12 不同光照时间及不同光质处理山莓叶提取物的抑菌活性测定  26
      1.2.13 不同pH值处理山莓叶提取物处理及的抑菌活性测定  26
      1.2.14 山莓乙醇初提物及液液萃取样的抑菌活性  26
      1.2.15 乙酸乙酯和正丁醇萃取物的最低抑菌浓度(MIC)的测定  26
      1.2.16 乙酸乙酯萃取物柱层析的分离纯化组份的抑菌试验  26-27
      1.2.17 柱层析Ⅰ组份Fr.5的柱层析分离组份的抑菌试验  27
      1.2.18 脱鞣质后样品的抑菌试验  27
      1.2.19 乙酸乙酯萃取物脱鞣质样的分离纯化组份的抑菌试验  27
  2 结果与分析  27-35
    2.1 山莓抑菌活性成分的提取  27-28
    2.2 山莓提取物经不同温度处理后的抑菌活性  28
    2.3 山莓提取物经不同光照条件下的抑菌活性  28-29
    2.4 山莓抑菌物在不同pH条件下的抑菌活性  29-30
    2.5 山莓叶乙醇提取物化学成分检识  30
    2.6 山莓粗提物及液液萃取不同样品的抑菌活性  30-31
    2.7 乙酸乙酯萃取物与正丁醇萃取物的最低抑菌浓度  31-32
    2.8 乙酸乙酯萃取物柱层析的分离纯化组份的抑菌活性  32
    2.9 柱层析Ⅰ组份Fr.5的柱层析分离组份的抑菌活性  32-33
    2.10 脱鞣质实验样品抑菌活性  33-34
    2.11 乙酸乙酯萃取物脱鞣质样的分离纯化组份的抑菌活性  34-35
  3 讨论  35-36
  4 本章小结  36-38
第三章 山莓叶活性单体结构鉴定及其抑菌作用研究  38-60
  1 材料与方法  38-40
    1.1 材料  38-39
      1.1.1 单体化合物  38
      1.1.2 培养基  38
      1.1.3 菌种  38-39
      1.1.4 试剂  39
      1.1.5 仪器  39
    1.2 方法  39-40
      1.2.1 化合物结构鉴定  39
      1.2.2 六个化合物的抑菌活性  39-40
      1.2.3 化合物5和6的抑菌方法  40
  2 结果与分析  40-58
    2.1 化合物1的结构鉴定  40-41
      2.1.1 理化与光谱数据  40
      2.1.2 结构推导  40-41
    2.2 化合物2结构鉴定  41-45
      2.2.1 理化与光谱数据  41-42
      2.2.2 分子式的确定  42
      2.2.3 平面结构的确定  42-44
      2.2.4 立体结构的确定  44-45
    2.3 化合物3的结构鉴定  45-48
      2.3.1 理化与光谱数据  45
      2.3.2 分子式的确定  45
      2.3.3 平面结构的确定  45-47
      2.3.4 立体结构的确定  47-48
    2.4 化合物4的结构鉴定  48-51
      2.4.1 理化与光谱数据  48
      2.4.2 分子式的确定  48
      2.4.3 平面结构的确定  48-50
      2.4.4 立体结构的确定  50-51
    2.5 化合物5的结构鉴定  51-53
      2.5.1 理化与光谱数据  51
      2.5.2 结构推导  51-53
    2.6 化合物6的结构鉴定  53-56
      2.6.1 理化与光谱数据  53-54
      2.6.2 化合物结构推导  54-56
    2.7 六个化合物的抑菌活性  56-57
    2.8 化合物5不同浓度抑菌活性  57
    2.9 化合物6不同浓度的抑菌活性  57-58
  3 讨论  58-59
  4 本章小结  59-60
第四章 山莓叶提取物及化合物6的抑菌机理初步研究  60-70
  1 材料与方法  60-63
    1.1. 材料  60-61
      1.1.1 原材料  60
      1.1.2 菌种  60
      1.1.3 培养基  60-61
      1.1.4 试剂  61
      1.1.5 仪器  61
    1.2 方法  61-63
      1.2.1 提取物最低抑菌浓度(MIC)的测定  61
      1.2.2 化合物6的最低抑菌浓度  61-62
      1.2.3 提取物及化合物6作用下的大肠杆菌在扫描电镜中的观察  62
      1.2.4 提取物作用下大肠杆菌的生长曲线的测定  62
      1.2.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳  62-63
  2 结果与分析  63-68
    2.1 山莓叶提取物最低抑菌浓度(MIC)的确定  63-64
    2.2 化合物6的最低抑菌浓度  64
    2.3 提取物对大肠杆菌形态结构的影响  64-65
    2.4 化合物6对大肠杆菌形态结构的影响  65-67
    2.5 提取物对大肠杆菌生长的影响  67
    2.6 提取物对大肠杆菌特征蛋白质的差异比较研究  67-68
  3 讨论  68-69
  4 本章小结  69-70
全文总结  70-71
参考文献  71-74
附录  74-121
缩略词表  121-122
致谢  122-123
作者简介  123

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 浆果类 > 悬钩子（黑莓）
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