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临床分离耐甲氧西林溶血葡萄球菌（MRSH）的耐药性及分子流行病学研究

作　者: 李睿
导　师: 熊自忠
学　校: 安徽医科大学
专　业: 内科学
关键词: 溶血葡萄球菌耐甲氧西林耐药性头孢西丁纸片 mecA-PCR MRSH SCCmec 多重PCR ERIC-PCR
分类号: R181.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

第一部分临床分离溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株(MRSH)及耐药性的检测前言凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative Staphylococcus,CNS)是医院感染的重要病原菌之一,近年来的检出率不断提高。溶血葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus,SH)在凝固酶阴性葡萄球菌中较为常见,检出率一般仅次于表皮葡萄球菌,在某些地区检出率甚至位列第一。耐甲氧西林溶血葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus haemolyticus,MRSH)的出现及其快速进化、演变、传播、流行给临床治疗带来极大的困难。MRSH对临床常用的多种抗菌药物具有耐药特征,但对糖肽类抗生素(Glycopeptides)仍然显示敏感,这类抗菌药物的大量应用,已导致了对糖肽类抗菌药物耐药葡萄球菌的出现。为了更好地指导临床用药,我们对安徽省部分医院临床分离的溶血葡萄球菌中MRSH菌株及其耐药性进行了检测和分析。目的了解安徽省部分医院临床分离的溶血葡萄球菌的耐药性和耐甲氧西林菌株的发生率,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法收集安徽医科大学第一附属医院、安徽省立医院、皖南医学院附属弋矶山医院、淮北市人民医院及舒城县人民医院等14家医院2005年临床分离的溶血葡萄球菌共103株。按照美国临床实验室标准委员会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)2008年标准,以头孢西丁纸片法及mecA-PCR法检测MRSH,采用琼脂稀释法检测其对常用抗菌药物的耐药性。结果103株溶血葡萄球菌中,以头孢西丁纸片法及mecA-PCR法,MRSH的检出率分别为86.4%、80.6%,两者无统计学差异(P>0.05)。MRSH对万古霉素及替考拉宁极其敏感,未发现耐药菌株;对青霉素、环丙沙星的耐药率>80%;对头孢唑啉、头孢呋辛、头孢曲松、克林霉素的耐药率>50%;对阿米卡星、四环素、利福平、氯霉素的耐药率分别为16.9%、48.2%、12.0%、31.3%。除阿米卡星、四环素、利福平和氯霉素外,MRSH对其他抗菌药物的耐药率显著高于甲氧西林敏感菌株(methicillin-susceptible Staphylococcus haemolyticus ,MSSH),差异有统计学意义(P<0.05)。结论MRSH对绝大多数抗菌药物呈现高度耐药;对糖肽类抗菌药物仍十分敏感,未发现对糖肽类耐药的溶血葡萄球菌。头孢西丁纸片法和mecA-PCR法检测MRSH无统计学差异(P>0.05)。MRSH的检出率高达80%以上,除阿米卡星、四环素、利福平和氯霉素外,MRSH对其他抗菌药物的耐药率均显著高于MSSH(P<0.05),临床应加强检测及监测。第二部分临床分离溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株(MRSH)的SCCmec分型及同源性分析前言近年来,临床分离的溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株(MRSH)的检出率越来越高,许多地区报道已超过80%,耐甲氧西林菌株已经成为了全世界医院感染的重要病原菌。MRSH对临床常用的多种抗菌药物耐药,目前其有效治疗药物主要为糖肽类抗生素:万古霉素、替考拉宁及唑烷酮类抗生素:利奈唑胺。MRSH耐药的主要机制是菌株携带了mecA基因,该基因位于新型的可移动元件SCCmec (Staphylococcal Cassette Chromosomemec mec,SCCmec)基因盒上,该基因盒不仅携带mecA基因,往往还携带有其他抗菌药的耐药基因,从而形成多重耐药。目前已发现5种SCCmec基因型,即SCCmecⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ。其中SCCmecⅠ、Ⅱ、Ⅲ型多为医院获得性(HA-MRS),SCCmecⅣ、Ⅴ型多为社区获得性(CA-MRS)。为了了解安徽省临床分离MRSH的SCCmec分型及同源性,我们进行了相关的研究,并报道如下。目的了解临床分离MRSH的SCCmec分型以及不同型别之间的耐药性差异情况,并对不同SCCmec型别的MRSH进行同源性分析。方法根据文献,合成引物,多重PCR进行SCCmec分型,ERIC-PCR法对不同SCCmec型别菌株进行同源性分析。结果1)多重PCR检测SCCmec分型:83株MRSH临床分离菌株中,SCCmecⅠ型23株(27.7 %),SCCmecⅡ型10株(12.1 %),SCCmecⅢ型24株(28.9 %),SCCmecⅣ型1株(1.2 %),Ⅰ、Ⅱ混合型8株(9.6 %),Ⅰ、Ⅲ混合型6株(7.2 %),Ⅱ、Ⅲ混合型5株(6.0 %),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ混合型3株(3.6 %),未分型3株(3.6%);2)不同SCCmec型别菌株的耐药性分析:SCCmecⅠ、Ⅲ型菌株对头孢唑啉、头孢呋辛和头孢曲松的耐药率显著高于Ⅱ型菌株,Ⅱ型菌株对氯霉素的耐药率高于Ⅰ、Ⅲ型菌株(P<0.05);3)不同SCCmec型别菌株的同源性分析:23株SCCmecⅠ型分为11型,其中A型5株,B型5株,C型3株,其余8株各为1型,2株未分型;10株SCCmecⅡ型分为6型,其中D型4株,E型2株,3株各为1型,1株未分型;24株SCCmecⅢ型分为9型,其中F型11株,G型2株,H型2株,I型2株,5株各为1型,2株未分型。结论1)83株MRSH中SCCmecⅠ、Ⅲ型较为多见;2)发现较多的混合型菌株;3)不同型别菌株对部分抗菌药的耐药性有所差异,进一步说明了耐药性与不同SCCmec型别所携带的不同耐药基因有关;4)部分菌株之间存在有克隆传播。

全文目录

中英文缩略词表  6-8
第一部分中文摘要  8-10
第一部分英文摘要  10-12
第二部分中文摘要  12-14
第二部分英文摘要  14-16
第一部分：临床分离溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株(MRSH)及耐药性的检测  16-36
  1 前言  16-17
  2 材料与方法  17-25
  3 结果  25-28
  4 讨论  28-30
  5 结论  30-32
  6 参考文献  32-36
第二部分：临床分离溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株(MRSH)的SCCmec分型及同源性分析  36-55
  1 前言  36-37
  2 材料与方法  37-43
  3 结果  43-46
  4 讨论  46-48
  5 结论  48-51
  6 参考文献  51-55
附录  55-56
致谢  56-57
综述糖肽类抗生素不敏感葡萄球菌感染的研究进展  57-69

临床分离耐甲氧西林溶血葡萄球菌（MRSH）的耐药性及分子流行病学研究

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