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骨髓间充质干细胞治疗慢性特发性血小板减少性紫癜的体外研究

作　者: 危永基
导　师: 林艳娟
学　校: 福建医科大学
专　业: 内科学
关键词: 慢性特发性血小板减少性紫癜骨髓间充质干细胞治疗免疫调节巨核细胞集落形成单位
分类号: R554.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的体外探讨同种异体骨髓间充质干细胞( bone marrow mesenchymal stem cell, BM-MSCs)用于治疗慢性特发性血小板减少性紫癜(chronic idiopathic thrombocytopenic purpura, cITP)的可行性。方法1.正常人BM-MSCs的分离、扩增;倒置显微镜下观察BM-MSCs的细胞形态和生长特性。2.cITP患者外周血单个核细胞( peripheral blood mononuclear cells ,PBMNCs)的分离、纯化与培养。3.同种异体BM-MSCs与经美洲商陆刺激的cITP患者PBMNCs细胞共培养,用MTT法检测共培养前后淋巴细胞增殖能力的变化;通过流式细胞仪检测各组淋巴细胞中CD19+CD5+B1淋巴细胞比例的变化; ELISA法检测各组细胞培养上清液中PAIgG的含量。4.在正常人骨髓巨核祖细胞集落培养体系中分别加入50%、25%或不加骨髓间充质干细胞培养上清( BM-MSCs -LCM),通过计数各组CFU-MK的个数,观察BM-MSCs–LCM在体外对正常人骨髓巨核祖细胞集落形成的影响。结果1.正常人的骨髓MSCs呈梭形贴壁生长,能在体外连续传代,能冷冻保存;2、与对照组相比,与BM-MSCs共培养的cITP患者PBMNCs中淋巴细胞的增殖能力被显著抑制(P<0.01);3.与对照组相比,同种异体BM-MSCs能下调cITP患者外周血淋巴细胞中CD19+CD5+B1淋巴细胞比例(P<0.01),能显著抑制cITP患者外周血淋巴细胞分泌PAIgG(P<0.01)(PBMNCs: BM-MSCs=10:1);4.发现在体外培养实验中BM-MSCs–LCM对CFU-MK的生成并无明显影响( P>0.05)。结论1.正常人骨髓间充质干细胞能显著抑制由美洲商陆(PWM)丝裂原刺激引起的cITP患者外周血淋巴细胞的增殖;能显著抑制cITP患者外周血B淋巴细胞分泌PAIgG;能显著下调cITP患者外周血淋巴细胞中CD19+CD5+B1细胞的比例。2.BM-MSCs -LCM对体外正常人骨髓巨核祖细胞集落形成无明显影响。3.我们的体外实验表明同种异体BM-MSCs具有治疗cITP的可能性。

全文目录

常用英汉缩略词表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-12
第一部分同种异体骨髓间充质干细胞对 cITP 患者外周血 B 淋巴细胞亚群及其功能的调节  12-27
  材料与方法  12-21
  结果  21-27
第二部分 BM-MSCs 培养上清对体外正常人骨髓巨核祖细胞集落形成的影响  27-33
  材料与方法  27-31
  结果  31-33
讨论  33-37
结论  37-38
参考文献  38-41
综述间充质干细胞对各种免疫细胞的免疫调节作用的研究进展  41-50
  参考文献  46-50
致谢  50

骨髓间充质干细胞治疗慢性特发性血小板减少性紫癜的体外研究

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