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鼻咽癌紫杉醇耐药细胞系的生物学特性及多药耐药性检测

作　者: 刘理
导　师: 谭国林
学　校: 中南大学
专　业: 耳鼻喉头颈外科
关键词: 鼻咽癌紫杉醇耐药细胞株 MDR-1
分类号: R739.63
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：对本实验室建立的人鼻咽癌紫杉醇耐药细胞株(CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol)的生物学特性进行观察,检测这两株细胞系是否具有多药耐药性以及常见多药耐药基因MDR-1的表达情况。方法：采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法,建立了两株鼻咽癌紫杉醇耐药细胞株(CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol),分别比较了这两株耐药细胞与其亲本细胞的形态、生长曲线、倍增时间的差异；运用流式细胞仪检测了其细胞周期变化；集落形成实验检测了它们对紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤和博来霉素五种化疗药的敏感性；使用real time RT-PCR比较了亲本细胞与耐药细胞MDR-1表达差异。结果：两株细胞系CNE-1/Taxol和HNE-2/Taxol的细胞大小及形态与亲本细胞不一致,增殖速度减慢,倍增期延长,G2／M期细胞比例增多。集落形成实验结果显示CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol对紫杉醇的敏感性显著低于其亲本细胞CNE-1和HNE-2,前两者的IC50值分别为9.59±0.26、7.62±0.21,而后两者的IC50分别为1.14±0.08、0.92±0.08；同时,CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol对5-氟尿嘧啶和甲氨蝶呤的敏感性也显著低于其亲本细胞CNE-1和HNE-2,但耐药指数显著低于对紫杉醇的敏感性。然而,CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol对顺铂的敏感性显著高于其亲本细胞CNE-1和HNE-2,前两者的IC50值分别为95.4±9.2、158.3±5.6,后两者的IC50值分别为239.2±10.7、187.6±4.5；与亲本细胞系比较,耐药细胞系对博莱霉素的敏感性没有变化(p>0.05)；定量RT-PCR的结果显示MDR-1在两株亲本细胞中表达均很低,且在耐药细胞中表达无明显增高,反而降低。结论：CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol是两株对紫杉醇耐药的细胞株,是研究紫杉醇耐药机制的重要实验模型；两株耐药细胞对5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤产生了耐药,具有多药耐药性的特点；紫杉醇耐药细胞系对顺铂的敏感性更高；MDR-1在鼻咽癌细胞产生获得性紫杉醇耐药的过程中不起主要作用。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-9
前言  9-11
第一章实验材料与方法  11-18
  1.1 实验材料  11-13
  1.2 实验方法  13-18
第二章实验结果  18-25
  2.1 细胞形态学观察  18
  2.2 细胞生长曲线及倍增时间测定  18-19
  2.3 细胞周期检测  19-20
  2.4 鼻咽癌亲本细胞与耐药细胞对不同化疗药物的敏感性  20-22
  2.5 耐药基因MDR-1的表达  22-25
第三章讨论  25-28
  一、紫杉醇耐药细胞系的生物学特性  25
  二、鼻咽癌紫杉醇耐药细胞系的多药耐药性  25-26
  三、鼻咽癌紫杉醇多药耐药的机制  26-28
第四章结论  28-29
参考文献  29-32
综述  32-40
致谢  40-41
攻读学位期间主要的研究成果  41

鼻咽癌紫杉醇耐药细胞系的生物学特性及多药耐药性检测

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