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意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica遗传多态性研究

作　者: 赵亚周
导　师: 彭文君
学　校: 中国农业科学院
专　业: 特种经济动物饲养
关键词: 意大利蜜蜂遗传多态性中国浙江地区 SSR
分类号: S891
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

由于意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica的生产性能优良,自其引进之后,一度得到广大养蜂生产者和科研工作人员的重视。目前为止,意大利蜜蜂已成为主要的蜜蜂饲养品种之一。我国目前饲养蜜蜂超过800万群,以意大利蜜蜂血统为主的西方蜜蜂占到了85%以上。因此对我国意大利蜜蜂进行遗传多态性研究,明确我国意大利蜜蜂种质资源现状及其分布特性,了解局部地区意大利蜜蜂资源的遗传变异情况,为我国蜜蜂优良品种的繁育和外来品种的引进奠定理论基础。研究采用10对微卫星(SSR)引物分析了来自我国黑龙江等14个省市自治区31个采集点的意大利蜜蜂样品的遗传多态性,并与来自德国的喀尼阿兰蜂A. m. carnica和来自美国的意大利蜜蜂进行比对。通过NTSYS-pc2.1和popGene32软件对SSR数据进行多态性分析。结果表明:10对SSR引物中8对表现出较高的遗传稳定性,可作为意大利蜜蜂遗传多态性标记。遗传一致度在0.61以上时,浙江、四川、甘肃和云南地区的样品出现较严重分化,其他地区的意大利蜜蜂样品则保持了美国原种意大利蜜蜂的典型基因特征。东北和新疆地区的样品与德国喀尼阿兰蜂血统亲缘关系较近(遗传距离在0.18149以内),分析主要原因可能是该地区的意大利蜜蜂样品杂有黑蜂A. m. mellifera血统。据此提出应在保护各地意大利蜜蜂原种特性及种群多态性的基础上,科学有效地进行高产品种的繁育。鉴于浙江地区样品遗传分化程度较高,本研究加大了浙江地区的样本量,以进行后续的研究探讨。利用5对荧光标记的SSR引物检测浙江地区的意大利蜜蜂样品与其他西方蜜蜂亚种样品之间的遗传差异。并采用NTSYS-pc2.1和popGene32软件对SSR的基因扫描(GeneScan)数据进行多态性分析。本研究中采用的5对SSR引物通过GeneScan技术共检测到等位基因101个,平均每个SSR引物所检测到的等位基因为20.2个,多态性位点占87.04%,总基因多样性Ht为0.3356±0.0256,多态性信息丰富;通过利用实验样品间的遗传一致度和遗传距离、UPGMA聚类分析、群体间的主成分分析均证明了浙江地区样品可以有效地聚在一起,与东北黑蜂和美国高加索蜂样品之间的亲缘关系较近。结论表明浙江地区意大利蜜蜂经过多年的繁衍进化,已经出现一定的血统分化情况,必须加以保护,以保证当地蜜蜂资源品质。对于SSR检测方法,本研究发现利用SSR方法检测蜜蜂遗传多态性所采用的引物数量应根据检测样品的分类单元水平进行确定,不能盲目地增加引物数量而加大不必要的研究成本。对于SSR的检测方法建议采用最新的GeneScan技术,以提高SSR数据的检测水平和结果的精确度。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-11
第一章引言  11-20
  1.1 本研究的目的意义  11
  1.2 遗传多态性的概念  11-12
  1.3 蜜蜂遗传多态性的影响因素  12-14
    1.3.1 自然影响因素  12-13
    1.3.2 人为影响因素  13-14
  1.4 蜜蜂遗传多态性的主要研究方法  14-20
    1.4.1 形态学方法  14
    1.4.2 细胞-染色体多态性的研究方法  14-15
    1.4.3 同工酶方法  15-16
    1.4.4 DNA 方法  16-20
第二章中国意大利蜜蜂遗传多态性研究  20-33
  2.1 材料与方法  20-26
    2.1.1 样品的采集整理  20-22
    2.1.2 仪器设备  22
    2.1.3 主要试剂及生产厂家  22
    2.1.4 基因组DNA 提取  22-23
    2.1.5 基因组DNA 的SSR 扩增  23-26
  2.2 结果分析  26-31
    2.2.1 样品重复类型聚类分析  26-27
    2.2.2 地理种群的遗传多态性分析  27-31
  2.3 讨论与结论  31-33
第三章浙江地区意大利蜜蜂遗传分化研究  33-42
  3.1 材料与方法  33-36
    3.1.1 样品的采集整理  33
    3.1.2 仪器设备  33-34
    3.1.3 主要试剂及生产厂家  34
    3.1.4 基因组DNA 的提取  34
    3.1.5 基因组DNA 的SSR 扩增  34-36
  3.2 结果与分析  36-39
    3.2.1 PCR 产物的GeneScan 结果  36
    3.2.2 微卫星位点的遗传多态性  36-37
    3.2.3 不同种群间的遗传一致度和遗传距离  37-38
    3.2.4 不同种群的聚类分析  38
    3.2.5 种群间的主成分分析  38-39
  3.3 讨论与结论  39-42
第四章全文结论与讨论  42-44
参考文献  44-50
附录 1 实验中常规试剂的配制  50-52
附录 2 英文缩略表  52-53
致谢  53-54
作者简历  54

意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica遗传多态性研究

内容摘要

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