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壳聚糖/聚乙内酯复合材料在软骨修复中的应用
作 者: 许占江
导 师: 方煌
学 校: 华中科技大学
专 业: 外科学
关键词: 壳聚糖 聚乙内酯 3D支架 软骨组织工程
分类号: R318.08
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 3次
引 用: 0次
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内容摘要
目的探讨壳聚糖(CHT)/聚乙内酯(PCL)复合材料在生物工程中的应用,比较分析三种不同含量比CHT/PCL复合材料三维支架促软骨修复性能及其内部作用机理。方法本实验采用壳聚糖(CHT)/聚乙内酯(PCL)复合材料,根据其在共聚物中含量不同,制备三种不同软骨组织工程支架,分别是重量百分比为100:0(100CHT),的75:25(75CHT)和50:50(50CHT)的CHT/PCL复合材料,其主要制作工艺为:将CHT与PCL分别溶于不同浓度的乙酸溶液中,并按照预定重量比混合两种溶液,加入一定量的氯化钠颗粒,混匀、加热、铸型,在NaOH溶液中去除NaCl颗粒,最后脱水晾干,获得三种不同组分的复合物支架。扫描电镜分析显示获得的支架有足够的孔隙率,孔隙尺寸和内部连通性,适用于组织工程。分离并培养SD大鼠关节软骨细胞,通过II型胶原免疫组化染色鉴定其细胞类型。取第二代软骨细胞制备细胞悬液,接种于三维支架中,放入细胞培养箱中培养。分别于3天、7天、14天、21天测量支架中存活细胞总数及其代谢活动,检测其细胞外基质(ECM)的形成。并进行切片染色和扫描电镜观察细胞行态,对比分析各组支架促软骨修复性能。结果细胞存活实验表明,细胞在支架结构中附着,增殖,代谢活跃。在三种支架中均可观察到软骨细胞外基质(ECM)的形成。通过细胞增殖总数测定,75CHT支架中新生软骨细胞数量最多,形成ECM的量最为显著,明显高于50CHT支架及100CHT且有统计学意义(P<0.05)。扫描电镜显示新生软骨细胞在支架表面均匀分布。结论75CHT支架可以更好促进的新软骨组织形成,并维持软骨细胞生理特性,可能更适合应用于组织工程中软骨的修复。
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全文目录
摘要 5-6 Abstract 6-8 绪言 8-9 材料与方法 9-17 结果 17-24 讨论 24-29 结论 29-30 参考文献 30-35 综述 35-47 参考文献 43-47 致谢 47
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医用一般科学 > 生物医学工程 > 一般性问题 > 生物材料学
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