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深海来源淡紫拟青霉ZBY-1的代谢产物及其抗肿瘤活性

作　者: 崔香
导　师: 崔承彬
学　校: 中南大学
专　业: 药学
关键词: 深海海水来源真菌 淡紫拟青霉ZBY-1 次级代谢产物 抗肿瘤活性 甾类 脑苷脂 鞘氨醇类似物
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


摘要：海洋天然产物己成为药源活性化合物的一个重要来源,其中海洋真菌尤其深海来源真菌产物越来越受到关注。本论文对16株得自不同海域的深海来源真菌进行了抗肿瘤活性筛选,结果显示有5株发酵样品100μg/ml对K562细胞的抑制率大于55%。选择活性菌株淡紫拟青霉ZBY-1,对其大量发酵样品进行产物研究,通过各种层析分离及重结晶手段,从中分离得到21个化合物。经波谱学研究结合甲醇解等化学反应分别鉴定为5个甾类化合物(1-5)；1个鞘氨醇类似物(6)及其人工产物盐酸盐(7)；4个脑苷脂类化合物(8-11)；2个DGTS类化合物(12和13)；4个脂肪酸类化合物(14-17)；4个其他类化合物(18～21)。采用MTT法,以4株人癌细胞为受试细胞,测试单体化合物的抗肿瘤活性。1-3对人癌K562、MCF-7、HL-60、BGC-823细胞有较强抑制作用,IC50在9.5～59.6μg/ml之间；化合物6和7对上述四株人癌细胞具有很强抑制作用,IC50在0.6～10μg/ml之间；其他化合物显示较弱或无抗肿瘤活性。本文通过对16株深海来源真菌进行抗肿瘤活性筛选,获得了5株活性菌株。对其中的淡紫拟青霉ZBY-1的发酵物通过活性追踪分离,阐明了其主要活性成分为paecilaminol(6),另外甾类化合物1-3对其抗肿瘤活性也有一定贡献。本文是有关海洋来源淡紫拟青霉代谢产物的首篇研究报道,所得化合物1-21均为首次从淡紫拟青霉中分离得到,其中1、3、12、13、18～21首次从拟青霉属、3首次从真菌产物中分离报道。上述研究结果为淡紫拟青霉的开发利用提供了科学依据。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-12
缩略词表  12-13
1 绪论  13-23
  1.1 海洋真菌抗肿瘤活性产物研究进展  13-19
  1.2 淡紫拟青霉研究进展  19-21
  1.3 立题依据及意义  21-22
  1.4 研究思路及方法  22-23
2 深海来源16株真菌的抗肿瘤活性筛选  23-30
  2.1 仪器、材料与试剂  23-25
  2.2 实验方法  25-27
    2.2.1 发酵培养与样品制备  25
    2.2.2 抗肿瘤活性测试  25-27
  2.3 实验结果  27-29
    2.3.1 深海来源16株真菌菌落形态  27
    2.3.2 抗肿瘤活性筛选结果  27-29
  2.4 小结与讨论  29-30
3 深海来源淡紫拟青霉ZBY-1的代谢产物研究  30-57
  3.1 仪器、材料与试剂  30-31
  3.2 代谢产物的分离纯化  31-41
    3.2.1 菌株孢子悬液的配制  31
    3.2.2 发酵时效考察  31
    3.2.3 大量发酵与样品制备  31-32
    3.2.4 代谢产物的活性追踪分离  32-41
  3.3 化合物1～21的结构鉴定  41-55
    3.3.1 甾类化合物1～5的结构鉴定  41-44
    3.3.2 鞘氨醇类似物6和7结构鉴定  44-46
    3.3.3 脑苷脂8～11结构鉴定  46-50
    3.3.4 甘油酯12和13结构鉴定  50-52
    3.3.5 脂肪酸14～17结构鉴定  52-53
    3.3.6 其他化合物18～21结构鉴定  53-55
  3.4 小结与讨论  55-57
4 单体化合物抗肿瘤活性初步评价  57-62
  4.1 仪器、材料与试剂  57
  4.2 实验方法  57-58
    4.2.1 肿瘤细胞培养及传代  57
    4.2.2 抗肿瘤活性测试方法  57-58
  4.3 抗肿瘤活性测试结果  58-60
    4.3.1 甾类化合物1～5活性测试结果  58-59
    4.3.2 鞘氨醇类似物6和7活性测试结果  59
    4.3.3 脑苷脂8～11活性测试结果  59
    4.3.4 甘油酯12和13活性测试结果  59-60
    4.3.5 脂肪酸14～7活性测试结果  60
    4.3.6 其他化合物18～21活性测试结果  60
  4.4 小结与讨论  60-62
5 结论  62-63
参考文献  63-73
附图  73-96
攻读学位期间主要的研究成果  96-97
论著  97-107
致谢  107

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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