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离子交换层析制备高纯度肝素和硫酸皮肤素

作　者: 马继华
导　师: 朱俊铭
学　校: 华中科技大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 肝素钠硫酸皮肤素 SAX-HPLC TDA-SEC 离子交换层析树脂吸附梯度洗脱
分类号: R914
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 14次
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内容摘要

肝素钠和硫酸皮肤素同属于黏多糖类的天然多糖，都具有生物学活性，在医学上具有广泛的应用。肝素钠在临床上主要用于心血管疾病防治及作为抗凝血类药物，肝素钠是目前临床应用中最主要的凝血类生物药，硫酸皮肤素则具有降血脂和治疗骨关节疾病的应用。由于这两种物质都存在于猪小肠的黏膜中，而工业生产上主要是利用猪小肠作为原料提取肝素钠，通常在生产肝素钠的同时会产生大量的硫酸皮肤素副产物。本论文研究的目的是试图通过对当前生产工艺的改进以达到获得高纯度的肝素钠的同时获得高纯度硫酸皮肤素。本论文的主要工作如下：（1）在本实验室内建立了多种肝素钠和硫酸皮肤素的检测与分析方法，包括强阴离子高效液相色谱法测定肝素钠和硫酸皮肤素的含量，三检测器联用的分子排阻色谱法测定肝素钠类多糖物质的分子量，以及醋酸纤维素膜电泳对肝素钠和硫酸皮肤素的分析。（2）考查了影响树脂对肝素钠吸附效率的两个因素-温度和pH值，通过对温度的考察，未发现明显的影响，顾及到生产成本因素，在正常的生产环境中温度的影响可以不予考虑；对pH因素的考察发现在pH8.2下可取得最佳的吸附效率与速度。（3）试图通过对现有的离子交换层析工艺进行优化以达到同时获得高纯度肝素钠和高纯度硫酸皮肤素的目的，首先通过线性梯度洗脱确定了二元梯度洗脱浓度的范围，再通过多次层析对梯度的优化获得了以1.15mol/L和2mol/L为二元梯度的最优洗脱方法，并获得了纯度达到88%的硫酸皮肤素以及纯度达到96.6%的肝素钠。综合以上三点，本篇论文的工作主要是：对肝素钠和硫酸皮肤素分析检测方法的构建，采取梯度洗脱的方法对肝素钠生产工艺的改进。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-7
1 绪论  7-15
  1.1 前言  7-8
  1.2 肝素钠与硫酸皮肤素的结构和性质  8-9
  1.3 肝素钠检测与分析  9-12
  1.4 肝素钠生产工艺的研究  12-14
  1.5 本文研究目的及主要内容  14-15
2 肝素钠检测与分析方法的构建  15-33
  2.1 引言  15
  2.2 材料和方法  15-31
  2.3 本章总结  31-33
3 肝素钠树脂吸附条件的优化  33-48
  3.1 引言  33
  3.2 材料和方法  33-46
  3.3 本章小结  46-48
4 全文总结  48-50
  4.1 本论文主要研究结果  48-49
  4.2 本论文创新之处  49
  4.3 展望  49-50
致谢  50-51
参考文献  51-54

离子交换层析制备高纯度肝素和硫酸皮肤素

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