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棉酚旋光异构体的检测方法及其在大鼠体内、外代谢的初步研究
作 者: 何晓文
导 师: 李新霞
学 校: 新疆医科大学
专 业: 药物化学
关键词: (-)-棉酚 (+)-棉酚 (R)-(-)-2-胺基-1-丙醇 高效液相色谱-紫外法 高效液相色谱-质谱联用法 大鼠肝微粒体
分类号: R914
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
目的:建立棉籽仁和复方醋酸棉酚片中左旋棉酚和右旋棉酚含量检测的HPLC法,以及棉酚在大鼠肝微粒体的体外代谢模型,并对棉酚在大鼠体内、外代谢情况进行初步探讨。方法:1. HPLC法测定棉籽仁和复方醋酸棉酚片中左旋棉酚和右旋棉酚的含量:以(R)-(-)-2-胺基-1-丙醇为手性拆分试剂,用10%冰醋酸的N,N-二甲基甲酰胺作为溶剂,经Agilent XDB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)分离,流速1.0mL/min,其中HPLC-UV法的流动相为乙腈:10mM KH2PO4(pH=3.0)=80:20,检测波长247nm;HPLC-MS法的流动相为乙腈:1.0%甲酸=85:15,柱后分流比为15%,在电喷雾正离子模式下对m/z633.2进行选择性离子监测。2.选240±10g的SD系雄性大鼠若干,以苯巴比妥钠作为肝酶诱导剂,采用钙盐沉淀法制备肝微粒体,考马斯亮蓝法进行蛋白含量测定,以非那西丁作为底物进行P450酶活性评价,以此模型进行棉酚的体外代谢研究。3.选240±10g的SD系雄性大鼠若干,棉酚按80mg/Kg/d的剂量连续灌胃给药一周,采用UPLC-MS/MS法进行棉酚在大鼠肝脏和血浆中代谢情况的初步研究。结果:1.新疆地区的棉籽仁中(-)-棉酚含量为1.62~4.09mg/g,(+)-棉酚含量为2.33~5.69mg/g,比例约为1:1.271.47。2.复方醋酸棉酚片中含(-)-醋酸棉酚含量为9.55~9.82mg/片,(+)-醋酸棉酚含量为10.0~10.5mg/片,比例约为1:1。3.棉酚在大鼠肝微粒体的体外代谢研究中,疑为有代谢产物gossypolone生成;通过对比大鼠体内试验,(-)-棉酚在大鼠体内的含量相对较快。结论:本课题所建立的(-)-和(+)-棉酚含量测定的HPLC法,具有良好的专属性、灵敏度、准确度和精密度,样品处理方法简便,同时进行了棉酚在大鼠的体内、外代谢的初步研究,为棉酚的深入研究提供一定的基础。
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全文目录
摘要 7-8 Abstract 8-10 前言 10-12 实验内容 12-41 1. 棉酚旋光异构体检测方法的建立 12-30 1.1 棉酚旋光异构体拆分方法的研究 12-17 1.2 柱前手性衍生化-HPLC-UV 法测定左旋棉酚和右旋棉酚的含量 17-24 1.3 柱前手性衍生化-HPLC-MS 法测定左旋棉酚和右旋棉酚的含量 24-30 2. 棉酚在大鼠体外代谢的初步研究 30-37 2.1 大鼠肝微粒体药物代谢模型的建立及评价 30-35 2.2 棉酚在大鼠肝微粒体的体外代谢研究 35-37 3. 棉酚在大鼠体内代谢的初步研究 37-41 3.1 实验材料 37-38 3.2 实验方法与结果 38-40 3.3 讨论 40-41 小结 41-42 致谢 42-43 参考文献 43-48 附录 48-51 综述 51-58 参考文献 54-58 攻读硕士学位期间发表的学术论文 58-59 导师评阅表 59
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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药物基础科学 > 药物化学
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