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miR-301对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响

作　者: 张忠来
导　师: 朱培谦
学　校: 南昌大学医学院
专　业: 外科学
关键词: miR-301 结肠癌 反义单核苷酸
分类号: R735.35
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 18次
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内容摘要


目的：通过检测微小RNA miR-301在结肠癌组织及对应癌旁组织中的表达差异，进一步探索性的研究miR-301反义寡核苷酸（antisense oligonucleotide，ASO）对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响，以期为后续深入研究miRNA-301在结肠癌中的生物学功能，寻找结肠癌早期诊断及基因治疗的新靶点奠定基础。方法：在患者知情同意的情况下，采集南昌大学第二附属医院胃肠外科住院接受手术治疗并且术后病理证实为结肠癌的120例结肠癌的患者癌组织及对应癌旁组织，抽提基因组DNA。运用荧光定量PCR定量分析120例结肠癌组织及对应癌旁组织中miR-301的表达；通过miR-301ASO降低结肠癌SW620细胞中miR-301的表达，采用MTT及流式细胞技术观察miR-301ASO对SW620细胞产生的生物学效应。结果：在120例结肠癌病例中，63.33%（76/120）的结肠癌组织miR-301表达明显高于对癌旁组织（P<0.05）；与对照组miR-301的表达量（0.50±0.07）相比，miR-301ASO可以显著降低miR-301的表达（0.09±0.01）（P<0.05）；MTT实验结果显示转染miR-301ASO后，24h、48h和96hSW620细胞的存活数量均明显低于对照组（P<0.05）；流式细胞仪检测显示转染miR-301ASO组（15.68±1.46）较对照组（3.36±0.88）细胞凋亡指数明显增加（P<0.05）。结论：miR-301在结肠癌组织中表达上调，降低miR-301的表达可有效抑制结肠癌细胞生长、促进细胞凋亡。miR-301有可能成为结肠癌基因表达调控的新靶点。

全文目录


摘要  3-4
ABSTRACT  4-6
中英文缩略表  6-8
第1章 前言  8-10
第2章 材料和方法  10-19
  2.1 材料  10-12
    2.1.1 临床材料  10
    2.1.2 主要试剂  10-11
    2.1.3 自配试剂  11
    2.1.4 主要仪器设备  11-12
  2.2 方法  12-18
    2.2.1 实时荧光定量 PCR 检测 miR-301 的表达  12-13
    2.2.2 反义 miR-301 单核苷酸序列设计  13-14
    2.2.3 细胞培养和反义寡核苷酸转染  14-15
    2.2.4 转染 miR-301 ASO 后对 miR-301 表达的影响  15-16
    2.2.5 MTT 法检测 SW620 细胞增殖情况  16-17
    2.2.6 流式细胞术分析细胞早期凋亡  17-18
  2.3 统计分析  18-19
第3章 结果  19-21
  3.1 结肠癌组织 miR-301 的表达情况  19-20
  3.2 降低 miR-301 的表达对 SW620 细胞存活率的影响  20
  3.3 降低 miR-301 的表达对 SW620 细胞凋亡的影响  20-21
第4章 讨论  21-23
第5章 结论  23-24
致谢  24-25
参考文献  25-26
攻读学位期间的研究成果  26-27
综述  27-36
  参考文献  34-36

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤 > 结肠肿瘤
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