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线粒体凋亡途径在亚硒酸钠诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用

作 者: 王艳
导 师: 苏衍萍
学 校: 泰山医学院
专 业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 亚硒酸钠 胃癌 凋亡 线粒体 Cytc Bax/Bcl-2
分类号: R735.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的研究亚硒酸钠诱导人胃癌SGC-7901细胞株凋亡过程中线粒体膜电位的变化、线粒体Cytc的释放和Bax/Bcl-2表达,探讨线粒体凋亡途径在亚硒酸钠诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用。方法人胃癌SGC-7901细胞株分为空白对照组、2.5、5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组,各浓度亚硒酸钠作用24h、48h后,罗丹明123荧光探针染色后流式细胞技术检测线粒体膜电位的变化;免疫细胞化学SABC法检测亚硒酸钠对Cytc分布、Bax/Bcl-2表达的影响;Western blot印迹法检测亚硒酸钠对细胞质Cytc和线粒体Cytc、Bax/Bcl-2蛋白含量的影响。结果流式细胞技术检测线粒体膜电位的变化结果显示:24h、48h随着亚硒酸钠浓度的增加,线粒体膜电位逐渐降低(P<0.05)。在同一时间点上,5.0μmol/L、10μmol/L亚硒酸钠组膜电位的下降程度明显高于2.5μmol/L亚硒酸钠组。免疫细胞化学SABC法检测Cytc蛋白分布和Western blot印迹法检测细胞质Cytc和线粒体Cytc含量变化结果分别显示:亚硒酸钠能够提高胃癌SGC-7901细胞中Cytc的表达,24h时5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Cytc蛋白的免疫细胞染色的平均光密度值(MOD)明显增强(P<0.05);48h时各亚硒酸钠组与对照组相比Cytc蛋白的免疫细胞染色的MOD明显增强(P<0.05);Western blot印迹法结果为24h、48h各亚硒酸钠组与对照组相比细胞质Cytc蛋白表达量逐渐升高(P<0.05),线粒体Cytc蛋白表达量逐渐降低(P<0.05)。同一时间点上,随着亚硒酸钠浓度的增高Cytc蛋白的MOD逐渐升高,细胞质Cytc蛋白表达强度逐渐增强,线粒体Cytc蛋白表达强度逐渐减弱。免疫细胞化学SABC法和Western blot印迹法检测Bax蛋白表达的结果分别显示:亚硒酸钠能够提高胃癌SGC-7901细胞中Bax蛋白免疫细胞化学染色的MOD,24h时10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Bax蛋白的免疫细胞染色的MOD明显增强(P<0.05);48h时5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Bax蛋白的免疫细胞染色的MOD明显增强(P<0.05)。Western blot印迹法结果为24h、48h各亚硒酸钠组与对照组相比蛋白表达量明显升高(P<0.05)。在同一时间点上,随着亚硒酸钠浓度的增高Bax蛋白MOD逐渐升高、蛋白表达强度逐渐增强。免疫细胞化学SABC法和Western blot印迹法检测Bcl-2蛋白表达结果分别显示:亚硒酸钠能够降低胃癌SGC-7901细胞中Bcl-2蛋白免疫细胞化学染色的MOD,24h时5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Bcl-2蛋白的免疫细胞染色的MOD明显减弱(P<0.05);48h时5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Bcl-2蛋白的免疫细胞染色的MOD明显减弱(P<0.05)。Western blot印迹法检测结果为24h、48h各亚硒酸钠组与对照组相比蛋白表达量明显降低(P<0.05)。在同一时间点上,随着亚硒酸钠浓度的增高Bcl-2蛋白MOD逐渐降低、蛋白表达强度逐渐减弱。结论亚硒酸钠可能通过降低线粒体膜电位,促进Cytc从线粒体释放到细胞质,调节Bax/Bcl-2基因表达,通过线粒体途径诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
符号说明  9-10
前言  10-12
材料与方法  12-28
结果  28-34
讨论  34-38
结论  38-39
附图  39-45
参考文献  45-48
综述  48-57
  参考文献  54-57
致谢  57

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胃肿瘤
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