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不完全川崎病外周血IL-17/Th17的变化和临床意义

作　者: 李蕴言
导　师: 狄亚珍
学　校: 宁波大学
专　业: 内科学
关键词: 川崎病不完全 Th17细胞 IL-17
分类号: R725.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

背景：川崎病（Kawasaki disease，KD）是一种病因不明的急性、免疫性、血管炎性疾病，冠状动脉损害(coronary artery lesions，CALs)是其严重并发症。不完全川崎病（Incomplete Kawasaki disease，IKD）呈逐年上升趋势，其临床特征少于KD，CALs发生率高于KD，故更受关注。KD病因及发病机制迄今尚未完全清楚。已证实KD患儿异常增高的前炎症细胞因子及趋化因子参与其发病[1]。Th17是新近发现的一种CD4+T效应细胞亚群，通过分泌白细胞介素-17（IL-17）诱导多种前炎症细胞因子和趋化因子，参与机体炎症反应及自身免疫反应。已有研究提出Th17细胞可能参与KD免疫发病过程。本研究探讨KD外周血Th17细胞及相关细胞因子水平变化是否与以往研究一致，并研究IKD外周血Th17细胞及相关细胞因子水平变化及临床意义。目的：检测30例川崎病（KD）患儿（以下称KD组）和30例不完全川崎病（IKD）患儿（以下称IKD组）急性期、缓解期外周血Th17细胞占CD4+细胞比例和血清IL-17水平，以及我院同期外科住院的斜疝术前患儿13例及门诊健康体检儿童17例，共30例（以下称对照组）Th17细胞占CD4+细胞比例和血清IL-17水平，并进行统计学分析。同时检测白细胞计数（WBC）、C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）、白蛋白、球蛋白、N末端脑利钠肽原（NT-proBNP）。并对30例KD患儿和30例IKD患儿进行心电图及超声心动图检查，来探讨KD、IKD发病中CD4+Th17细胞和IL-17可能的作用机制及变化的临床意义。方法：收集宁波市妇女儿童医院小儿风湿免疫科2012年3月—2012年12月住院的KD、IKD患儿各30例，同时收集与其性别和年龄相匹配在我院同期外科住院的斜疝术前患儿13例及门诊健康体检儿童17例，共30例，收集各组患儿外周血，经体外刺激活化、固定破膜、细胞内染色等一系列的处理后，应用流式细胞技术检测CD4+Th17细胞阳性比率，同时应用ELISA法检测各组血清IL-17水平。采用法国Biomerieux Sa公司mini-VIDAS全自动酶联荧光分析仪及配套VIDAS NT-proBNP试剂进行血浆NT-proBNP全自动定量检测，由OLYMPUS AU2700生化分析仪检测白蛋白及球蛋白，白蛋白采用溴甲酚绿法，总蛋白采用双缩脲法，球蛋白由总蛋白减白蛋白得出。采用比浊法检测C-反应蛋白（CRP）。采用魏氏法检测血沉（ESR）。采用血液全自动分析仪检测白细胞计数（WBC）。结果：1、KD组及IKD组急性期、缓解期与对照组之间，心电图和（或）超声心动图异常组与心电图和超声心动图正常组外周血Th17细胞阳性比率比较。KD组患儿（n=30）急性期外周血Th17比率高于对照组（n=30），（1.77±0.16vs0.12±0.08，P＜0.05）；IKD组患儿（n=30）急性期外周血Th17比率高于对照组（n=30），（1.83±0.15vs0.12±0.08，P＜0.05）；KD组和IKD组急性期外周血Th17比率比较差异无统计学意义；KD组及IKD组缓解期与对照组外周血Th17比率比较差异无统计学意义；心电图和（或）超声心动图异常组（n=18）外周血Th17比率高于心电图和超声心动图正常组（n=42），（1.88±0.16vs1.77±0.14，P＜0.05）。2、KD组、IKD组急性期外周血Th17与WBC、PLT、CRP、ESR、白蛋白、球蛋白、NT-proBNP相关性分析。KD组急性期WBC（15.73±5.1）、CRP（95.52±58.01）、ESR（68.83±28.86）、白蛋白（34.77±3.51）、球蛋白（27.17±4.74）、lg（NT-proBNP）（2.99±0.67）。KD组急性期外周血Th17与WBC、CRP、ESR、NT-proBNP、球蛋白成正相关（r=0.772、0.762、0.694、0.832、0.688），与白蛋白成负相关（r=-0.606），P均<0.05。IKD组急性期WBC（14.58±6.63）、CRP（63.84±50.32）、ESR（59.73±34.17）、白蛋白（37.20±2.94）、球蛋白（28.63±3.71）、lg（NT-proBNP）（2.35±0.83）。IKD急性期外周血Th17与WBC、CRP、ESR、NT-proBNP、球蛋白成正相关（r=0.732、0.792、0.694、0.848、0.679），与白蛋白成负相关（r=-0.753），P均<0.05。3、KD组及IKD组急性期、缓解期与对照组之间，心电图和（或）超声心动图异常组与心电图和超声心动图正常组血清IL-17水平比较。KD急性期血清IL-17水平明显高于KD缓解期及对照组，差异有显著性（F=51.464，P<0.05），IKD急性期血清IL-17水平明显高于IKD缓解期及对照组，差异有显著性（F=57.357，P<0.05），KD、IKD缓解期血清IL-17水平与对照组比较，差异无显著性（P>0.05）；心电图和（或）超声心动图异常组患儿血清IL-17水平高于心电图和超声心动图正常组患儿，差异有统计学意义（t=7.36，P<0.05）。4、KD组、IKD组急性期血清IL-17水平与WBC、CRP、ESR、白蛋白、球蛋白、NT-proBNP相关性分析。KD组急性期血清IL-17水平与WBC、CRP、ESR、NT-proBNP、球蛋白成正相关（r=0.546、0.862、0.714、0.823、0.560），与白蛋白成负相关（r=-0.781），P均<0.05。IKD组急性期血清IL-17水平与WBC、CRP、ESR、NT-proBNP、球蛋白成正相关（r=0.698、0.826、0.648、0.886、0.769），与白蛋白成负相关（r=-0.702），P均<0.05。5、急性期KD组外周血Th17细胞表达率与血清IL-17水平成正相关（r=0.854，P<0.05）；急性期IKD组外周血Th17细胞表达率与血清IL-17水平成正相关（r=0.868，P<0.05）。结论：外周血Th17细胞阳性率、血清IL-17水平在KD、IKD患儿急性期中均升高，与对照组及恢复期比较，差异均有统计学意义，认为Th17细胞及血清IL-17水平参与KD、IKD的发病，认为其为KD、IKD疾病活动性指标之一；心电图和（或）超声心动图异常患儿外周血Th17细胞阳性率、血清IL-17水平均高于心电图和超声心动图均正常患儿，认为Th17细胞及血清IL-17水平与心血管损害相关联。

全文目录

摘要  4-7
Abstract  7-11
目录  11-12
引言  12-15
1 研究对象  15-16
2 标本收集  16-17
3 试验方法及步骤  17-23
  3.1 Th17 细胞流式细胞仪技术检测  17-20
    3.1.1 主要试剂及材料  17
    3.1.2 主要实验仪器和设备  17
    3.1.3 外周血 Th17 细胞的流式细胞技术检测具体操作步骤  17-20
  3.2 KD 组、IKD 组及对照组血清 IL-17 水平的 ELISA 检测  20-22
    3.2.1 ELISA 试剂盒  20
    3.2.2 实验仪器  20-21
    3.2.3 实验前准备  21
    3.2.4 血清IL-17 的ELISA 检测的具体操作步骤  21-22
  3.3 心脏彩超检查  22
  3.4 心电图检查  22-23
4 统计学方法  23-24
5 实验结果  24-30
6 讨论  30-32
7 结论  32-33
参考文献  33-34
在学研究成果  34-35
综述  35-39
  References  38-39
致谢  39

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